专利名称：一种检测转基因水稻温室气体排放的方法
技术领域：
本发明涉及一种基于13C同位素标记，精确检测转基因水稻温室气体(CO2和CH4) 排放的方法。
背景技术：
全球气候变暖及其可能带来严重的生态环境和社会经济影响已被世界各国政府 及科学家广泛关注。许多研究表明，人类活动对大气成分具有显著性的影响，温室效应是 引起全球气候变暖的重要原因。中国政府在哥本哈根全球气候峰会上郑重承诺，延缓二 氧化碳的排放，既到2020年中国单位国内生产总值(GDP) 二氧化碳排放比2005年下降 40% -45%。稻田生态系统是温室气体排放的重要来源，我国常规水稻种植面积约4.5亿 亩，如何减少稻田温室气体的排放实施我国当年急需解决的问题。目前关于水稻温室气体排放的检测主要是应用常规的静态箱采集方法，但由于稻 田的田间异质性强，且稻田温室气体排放来源复杂，很难精确的测定稻田中水稻对温室气 体排放的贡献。

发明内容
本发明的目的是基于13C稳定态同位素标记技术，提供一种能精确检测转基因水 稻温室气体排放的方法，为转基因水稻环境安全评估标准提供有力的技术依据。本发明的检测转基因水稻温室气体排放的方法，采用"C稳定碳同位素标记结合 静态箱采样，检测转基因水稻与亲本之间温室气体的排放，具体步骤如下(1)制作t稳定碳同位素标记箱标记箱由透明桶状箱体和底座构成，底座是沿 周边具有回形槽的矩形框，箱体的箱口与回形槽相吻合，箱体内顶部装有用于调节箱内气 体均勻性的风扇和预检测(X)2浓度的传感器，箱体下部侧面设有标记药品进样管，箱体上部 侧面设有用丁胶塞密封的气体采集口；(2)1 稳定碳同位素标记将标记箱的箱体口嵌入底座回形槽中，并在回形槽 中注入足够的蒸馏水进行密封，标记箱罩住供试水稻并固定，标记箱内位于标记药品进 样管的下方放置盛有乳酸的烧杯，标记时间为早上9点至12点之间，由传感器监控标记 箱内CO2气体浓度。当箱内CO2浓度降为125ppm时，通过标记药品进样管注入浓度为 Imol · L-1Na213CO3,标记时使室内13CO2浓度维持在150-200ppm浓度；(3)用注射器定时采集气体样品，测试结果取平均值；(4)用气象色谱-同位素比质谱分别测定13C-甲烷和二氧化碳气体的同位素丰度 比Rsample值，再根据公式⑴将数据转换成稳定态同位素相对比率S 13C,供后期评价转基因 水稻温室气体排放的统计分析，稳定态同位素比率按照以下公式计算
权利要求
1. 一种检测转基因水稻温室气体排放的方法，具体步骤如下(1)制作"C稳定碳同位素标记箱标记箱由透明桶状箱体⑵和底座⑴构成，底座 (1)是沿周边具有回形槽的矩形框，箱体(7)的箱口与回形槽相吻合，箱体内顶部装有用于 调节箱内气体均勻性的风扇( 和预检测CO2浓度的传感器(3)，箱体下部侧面设有标记药 品进样管G)，箱体上部侧面设有用丁胶塞密封的气体采集口(6)；(2)"C稳定碳同位素标记将标记箱的箱体口嵌入底座回形槽中，并在回形槽中注入 足够的蒸馏水进行密封，标记箱罩住供试水稻并固定，标记箱内位于标记药品进样管(4) 的下方放置盛有乳酸的烧杯(5)，标记时间为早上9点至12点之间，由传感器(3)监控标 记箱内CO2气体浓度。当箱内CO2浓度降为125ppm时，通过标记药品进样管注入浓度为 Imol · L-1Na213CO3,标记时使室内13CO2浓度维持在150-200ppm浓度；(3)用注射器定时采集气体样品，测试结果取平均值；(4)用气象色谱-同位素比质谱分别测定13C-甲烷和二氧化碳气体的同位素丰度比 Rsample值，再根据公式⑴将数据转换成稳定态同位素相对比率S 13C,供后期评价转基因水 稻温室气体排放的统计分析，稳定态同位素比率按照以下公式计算
全文摘要
本发明公开的检测转基因水稻温室气体排放的方法，利用13C稳定碳同位素标记结合静态箱采样方法，检测转基因水稻与亲本之间温室气体的排放。具体步骤包括(1)制作密闭式13C稳定碳同位素标记箱；(2)13C稳定碳同位素标记；(3)静态箱法采集气体；(4)同位素比质谱测定。利用该方法可精确评价转基因水稻与对照之间的温室气体排放差异。为制定我国转基因水稻商品化释放标准提供有力的技术依据。
文档编号G01N30/72GK102053133SQ201010558059
公开日2011年5月11日 申请日期2010年11月23日 优先权日2010年11月23日
发明者刘微, 吕豪豪, 吴伟祥 申请人:浙江大学