专利名称：千斤拔配方颗粒的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种检测方法，具体的说，是千斤拔配方颗粒的质量检测方法，属于中药质量检测领域。
背景技术：
千斤拔配方颗粒是豆科植物蔓性千斤拔Flemingia prostrata Roxb. F. exRoxb.的干燥根经加工制成的配方颗粒，味甘、微潘，性平，归脾、胃、肝、肾经，具有补脾胃，益肝肾，强腰膝，舒筋络之功效，主要用于脾胃虚弱，气虚脚肿，肾虚腰痛，手足酸软，风湿骨痛，跌打损伤等症。与传统的中药煎剂相比，其具有免煎易服，易储存，携带方便等优点。《中国药典》2010年版一部未收载千斤拔药材品种，而中药配方颗粒经过一系列工序的加工后已失去药材的外形特征，性状鉴别已不适用于中药配方颗粒。

发明内容
本发明的目的在于提供一种千斤拔配方颗粒的质量检测方法，先用薄层色谱鉴别成分，再用高效液相色谱仪测定含量，该方法准确，灵敏度高，精密度、稳定性好。本发明的技术方案是这样的千斤拔配方颗粒的质量检测方法，依次包括下述步骤1)薄层色谱法鉴别成分；2)高效液相色谱法测定含量；
其中，步骤I)所述的薄层色谱鉴别成分取本品粉末0. 45、. 55g，加甲醇25 35ml，回流25 35分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取千斤拔对照药材5g,加水50ml,煮沸30分钟,滤过,滤液水浴蒸干，残洛加甲醇30ml,同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5W，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色、绿色荧光斑点；
步骤2)所述的高效液相含量测定，首先制备对照品溶液精密称取染料木素对照品适量，加甲醇制成每Iml含染料木素11. 02ng的溶液，即得；再制备供试品溶液取本品粉末约0. 6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定方法分别精密吸取对照品溶液5 ill、供试品溶液15 iil，注入液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0. 4%磷酸为流动相，DAD检测器检测，检测波长263nm,柱温 25°C,流速lml/min ;测定。上述的千斤拔配方颗粒的质量检测方法，其中，步骤I)所述的展开剂氯仿-丙酮-甲酸体积比为8:1:0. 8。上述的千斤拔配方颗粒的质量检测方法，其中，步骤2)所述的甲醇与0. 4%磷酸的体积比为50:50。本发明的优点在于方法简单、准确，灵敏度高，精密度、稳定性好，采用HPLC法测定千斤拔配方颗粒中染料木素的含量，峰形好，分离度高，可作为千斤拔配方颗粒的质量控制和考察工艺稳定性的有效技术手段，对保证产品质量的稳定性及临床用药的有效性与安全性具有重要意义。


图I是本发明的千斤拔配方颗粒薄层色谱 图2是本发明的千斤拔配方颗粒高效液相色谱图。其中对照药材试验薄层色谱图Al ;供试品第一次试验薄层色谱图B2 ;供试品第二次试验薄层色谱图C3 ;供试品第三次试验薄层色谱图D4 ;供试品第四次试验薄层色谱图E5 ;供试品第五次试验薄层色谱图F6 ;点样点11 ;蓝色点21 ;绿色点31 ;对照品HPLC图A;供试品HPLC图B ;染料木素I。·
具体实施例方式下面结合具体实施方式
，对本发明做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何人在本发明的权利要求范围内所做出的非实质性改变，仍在本发明的权利要求保护范围内。实例I
本发明所提供的千斤拔配方颗粒的质量检测，依次包括下述步骤1)薄层色谱法鉴别成分；2)高效液相色谱法测定含量；
薄层鉴别方法取本品粉末0. 5g，加甲醇30ml，回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取千斤拔对照药材5g，加水50ml，煮沸30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5W，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-甲酸(体积比8 1 0. 8)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，参阅图1，显相同颜色的蓝色、绿色荧光斑点，其中，对照药材检测结果是对照药材试验薄层色谱图Al ;供试品第一次试验薄层色谱图B2 ;供试品第二次试验薄层色谱图C3 ;供试品第三次试验薄层色谱图D4 ;供试品第四次试验薄层色谱图E5 ;供试品第五次试验薄层色谱图F6 ;点样点11 ;蓝色点21 ;绿色点31。含量测定照高效液相色谱法测定。参阅图2，其中，对照品HPLC图A ;供试品HPLC图B ;染料木素I。I、仪器与试药
(I)仪器=Agilent 1200高效液相色谱仪，DAD检测器，四元梯度泵，G2170AA数据处理系统。(2)试药甲醇为色谱纯试剂(一级)，水为双蒸水，其它试剂均为分析纯。染料木素对照品(批号111704-200501)购于中国药品生物制品检定所。2、实验条件(I)色谱条件色谱柱Agilent Zorbax SB C18 (4. 6mmX 250mm, 5Mm)柱；流动相甲醇-0. 4%磷酸溶液(50 50);检测波长263nm ;柱温25°C ;流速1. Oml/min。3、方法学考察
对照品溶液的制备精密称取染料木素对照品适量，加甲醇制成每Iml含染料木素
11.02ng的溶液，即得。(I)线性范围的考察
分别精密吸取对照品溶液(每Iml含染料木素11.021^) I yl、3 yl、5 yl、7 iil、9ia，注入液相色谱仪进行色谱测定，按上述色谱条件测定峰面积，并以峰面积(Y)对进样量(X)进行线性回归，得标准曲线。Y=6. 41450152X-7. 1041885，r=0. 99987 ；
表明染料木素在11.02-99. 18ng范围内呈线性关系，结果见表I。表I染料木素对照品测定结果
权利要求
1.一种千斤拔配方颗粒的质量检测方法，其特征在于，依次包括下述步骤1)薄层色谱法鉴别成分；2)高效液相色谱法测定含量； 其中，步骤I)所述的薄层色谱鉴别成分取本品粉末0. 45、. 55g，加甲醇25 35ml，回流25 35分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取千斤拔对照药材5g，加水50ml，煮沸30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇30ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5W，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色、绿色荧光斑点； 步骤2)所述的高效液相色谱测定含量，首先制备对照品溶液精密称取染料木素对照品适量，加甲醇制成每Iml含染料木素11. 02ng的溶液，即得；再制备供试品溶液取本品粉末约0. 6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定方法分别精密吸取对照品溶液5 ill、供试品溶液15 iil，注入高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0. 4%磷酸为流动相，DAD检测器检测，检测波长263nm,柱温25°C,流速lml/min ;测定。
2.根据权利要求I所述的千斤拔配方颗粒的质量检测方法，其特征在于，步骤I)所述的展开剂氯仿-丙酮-甲酸体积比8:1:0. 8。
3.根据权利要求I所述的千斤拔配方颗粒的质量检测方法，其特征在于，步骤2)所述的甲醇与0. 4%磷酸的体积比为50:50。
全文摘要
本发明公开一种千斤拔配方颗粒的质量检测方法；旨在提供一种方法准确，灵敏度高，精密度、稳定性好的千斤拔配方颗粒的质量检测方法；其技术要点依次包括下述步骤1)薄层色谱鉴别成分；2)高效液相色谱测定含量，其中，步骤1)所述的薄层色谱鉴别成分是先制作供试品溶液和对照药材溶液，最后照薄层色谱法试验；步骤2)所述的高效液相色谱测定含量，首先制备对照品溶液，再制备供试品溶液，再用高效液相色谱仪测定；属于中药质量检测领域。
文档编号G01N30/90GK102721782SQ20121022433
公开日2012年10月10日 申请日期2012年7月2日 优先权日2012年7月2日
发明者刘法锦, 孙冬梅, 毕晓黎, 涂瑶生, 程学仁 申请人:刘法锦, 孙冬梅, 毕晓黎, 涂瑶生, 程学仁