专利名称：一种优选金莲花的黄酮高产量部位的方法
技术领域：
本发明涉及一种优选金莲花的黄酮高产量部位的方法。
背景技术：
金莲花是一种常用中药，其基源植物主要包括金莲花(Trollius chinensisBunge)、宽瓣金莲花(T. asiaticus L.)、矮金莲花(T. farreri Stapf)、短瓣金莲花(T. Iedebouri Reichb)和长瓣金莲花(T. macropetalus Fr. Schmidt)。根据文献报道，金莲花主要含黄酮类、有机酸类和生物碱类成分(康少文，等.中草药，1984，15 ) 7 ；ffang RF，et al. Heterocycles, 2004,63 (6) :1443-1448),而黄酮类是金莲花中的重要活性成分，具有抗病毒、抗菌、抗氧化等作用(Cai Shaoqing, et al. Chem Biodivers, 2006, 3 (3) :343)。为此，有关金莲花总黄酮的生物活性和制备工艺的研究有大量的报道(唐津忠，等.食品科学，2003,24(6) :88-91 ;苏志伟，等.中草药，2007，38 (6) :850-851 ;徐秀全，等.中国实验方剂学杂志，2011，17(14) :35-38)。在这些报道中，有关总黄酮制备工艺的研究多集中于用各种有机溶剂对金莲花全花进行提取，然后再利用大孔树脂和聚酰胺等色谱柱对粗提物进行纯化。但是，我们在研究中发现，金莲花的不同花部中总黄酮的含量差异较大，花萼、花冠、花蕊群、子房、花柄的总黄酮含量分别为5. 93 %、2. 06 %、0. 98 %、I. 44 %、2. 89 %，而金莲花全花中总黄酮含量为3. 09%。由此可见，总黄酮在金莲花各花部中分布不均匀，除了花萼以外，其它花部中总黄酮的含量较少，杂质较多。这些花部所占全花的质量分数也相差很大，花萼、花冠、花蕊群、子房、花柄的质量分数分别占全花的41. 90%、10. 24%、22. 40%、
15.29%U0. 17%。这再次表明，金莲花的花萼不但总黄酮含量高，其所占金莲花全花的质量比例也最大。因此，如果能采用科学的贡献度优选方法优选出金莲花中黄酮产量高的部位，可以提高金莲花粗提物中总黄酮的含量或产量，有利于简化和优化金莲花总黄酮的制备步骤。

发明内容
本发明的目的为提供一种优选金莲花的黄酮高产量部位的方法。其特征为将金莲花全花分成花萼、花冠、花蕊群、子房和花柄五个花部，分别测定各花部的总黄酮含量，然后测定各花部占全花的质量分数，最后计算出各个花部对金莲花总黄酮的贡献度。据此，选取对总黄酮贡献度最大的花部作为金莲花高黄酮产量的优选花部。采用该方法优选的总黄酮的主要富集花部的总黄酮含量为5. 93 %，质量分数为41. 90 %，总黄酮贡献度高达 72. 35%。本发明优选采用比色法，以荭草素作为对照品，测定各花部及全花总黄酮的含量。采用质量分析法测定各花部占全花的质量分数。采用下列公式计算出各个花部对金莲花总黄酮的贡献度
ImC = ab/2a bi
I Iwi
这里，a为各花部的总黄酮含量，b为各花部的质量分数。本发明采用的原料药材为金莲花属药材，优选金莲花(Trollius chinensisBunge)、短瓣金莲花(T. Iedebourii reichb)、阿尔泰金莲花(T. altaicus C. A. Mey)、长瓣金莲花(T. macropetalus Fr. Schmidt)矮金莲花(T. farreri Stapf)和亚洲泰金莲花(T. asiaticus L.),最优选金莲花(T. chinensis Bunge)。


图I是本发明的工艺流程图。参见图1，取干燥的金莲花药材，将全花分成花萼、花冠、花蕊群、花柄和子房五个花部。分别测定各花部的总黄酮含量，然后将各花部分别称重，测定各花部占全花的质量分数，最后计算出各个花部对金莲花总黄酮的贡献度，贡献度最高的花部作为优选花部。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明作进一步说明。实施例I.各花部质量分析用万分之一天平对干燥至恒重的每批金莲花的各花部分别称重，并计算其占金莲花全花的质量分数，结果见表I。2.总黄酮含量测定(I)供试品制备取金莲花药材6批，将全花分成花萼、花冠、花蕊群、子房和花柄五个花部。精密称取干燥至恒重的各花部及全花80. OOmg,用20倍量的95%乙醇超声提取2次，每次20min。合并提取液，用0.45iim微孔滤膜过滤。取续滤液2mL，置于IOmL容量瓶中，用95%乙醇稀释至体积。(2)对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的荭草素对照品20. Omg,置于50mL容量瓶中。加适量95%乙醇，50°C水浴加热溶解。放冷，用95%乙醇稀释至体积。精密量取25mL于50mL容量瓶中，用95%乙醇稀释至体积，即得对照品溶液。其中荭草素的质量浓度为200mg/L。(3)标准曲线的制备精密量取对照品溶液0、I、3、5、7、9、I lmL，分别置于25mL容量瓶中，加95 %乙醇至
IImL,摇勻。然后，分别加入5% NaNO2溶液ImL,摇勻。放置6min后,加入10% Al (NO3) 3溶液lmL，摇匀。再放置6min后，加入4%似011溶液101^。最后，用95%乙醇稀释至体积，摇匀。放置15min后，以第一管作为空白对照，用比色法在510nm处测定吸光度，以质量浓度(C)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程A= 11.2649C+0. 0127，R2=0. 9998，线性范围 8. 00 88. 00 u g。(4)总黄酮含量测定精密量取供试品溶液5mL，置于25mL容量瓶中，按标准曲线项下的测定方法测定其吸光度，按照回归方程计算总黄酮含量，结果见表2。3.各花部贡献度分析
用每个花部的总黄酮含量乘以其占全花的质量分数，再除以所有花部的各自总黄酮含量与其质量分数的积的总和，得出每个花部对金莲花总黄酮的贡献度，结果见表3。表I金莲花各花部的质量分数)
权利要求
1.一种优选金莲花药材的黄酮高产量部位的方法，包括以下步骤将金莲花全花分成花萼、花冠、花蕊群、子房和花柄五个花部，分别测定各花部的总黄酮含量，然后测定各花部占全花的质量分数，最后计算出各个花部对金莲花总黄酮的贡献度，据此，选取对总黄酮贡献度最大的花部作为金莲花高黄酮产量的优选花部。
2.根据权利要求I所述优选方法，包括以下步骤将金莲花全花分成花萼、花冠、花蕊群、子房和花柄五个花部，采用比色法分别测定各花部的总黄酮含量，然后采用质量分析法测定各花部占全花的质量分数，最后采用下列公式计算出各个花部对金莲花总黄酮的贡献度并优选高黄酮产量部位
3.根据权利要求I或2所述优选方法，其中金莲花药材为金莲花属植物的干燥花。
4.根据权利要求3所述优选方法，其中金莲花属植物选自金莲花TrolliuschinensisBunge、短辧金莲花T. Iedebourii Reichb、阿尔泰金莲花T. altaicus C. A. Mey、长辧金莲花T. macropetalus Fr. Schmidt、矮金莲花T. farreri Stapf 和亚洲金莲花T. asiaticus L 中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述优选方法，其中金莲花属植物选自金莲花TrolliuschinensisBunge0
全文摘要
本发明涉及一种优选金莲花的黄酮高产量部位的方法。该方法包括将金莲花全花分成花萼、花冠、花蕊群、子房和花柄五个花部，采用比色法分别测定各花部的总黄酮含量，然后采用质量分析法测定各花部占全花的质量分数，最后采用下列公式计算出各个花部对金莲花总黄酮的贡献度这里，a为各花部的总黄酮含量，b为各花部的质量分数。据此，选取对总黄酮贡献度最大的花部作为金莲花高黄酮产量的优选花部。采用该方法优选的总黄酮的主要富集花部的总黄酮含量为5.93％，质量分数为41.90％，总黄酮贡献度高达72.35％。
文档编号G01N21/31GK102721657SQ20121022333
公开日2012年10月10日 申请日期2012年7月2日 优先权日2012年7月2日
发明者孙震晓, 王如峰, 袁铭 申请人:王如峰