专利名称：用于治疗阿尔茨海默病的疫苗的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于预防和治疗淀粉状蛋白生成疾病且特别是阿尔茨海默病的组合 物和方法。
背景技术：
阿尔茨海默病(AD)的特征在于进行性记忆损害和认知减退。它的标志病理损害 是特定脑区域中的淀粉状蛋白沉积物(老年斑)、神经原纤维缠结和神经元丧失。淀粉状 蛋白沉积物由40-43个氨基酸残基的淀粉状蛋白β肽(Αβ)组成，其是淀粉状蛋白前体蛋 白质(APP)的蛋白水解产物。神经原纤维缠结是高磷酸化τ蛋白质的细胞内丝状聚集物 (Selkoe, Science, 275 :630-631,1997)。AD的发病机理仍未完全了解，但它预期是多因素事件。Αβ在脑组织中的积 累和聚集被认为在疾病过程中起关键作用，也称为淀粉状蛋白级联假设(Golde，BrMn Pathol. ,15 :84-87,1995)。根据这个假设，A β，特别是A β 42，易于形成各种形式的聚集 物，范围从小寡聚物到大的延长的初原纤维结构。这些聚集物是神经毒性的，并且被称为负 责与疾病早期阶段中的记忆丧失和认知减退相关的突触病理学(Klein等人，Neurobiol. Aging, 25 =569-580,2004)。近期出版物暗示三重转基因小鼠模型中A β的减少也阻止细胞 内τ沉积(Oddo等人，Proc. Neuron，43 =321-332, 2004) 0这个发现暗示细胞外淀粉状蛋白 沉积物可能是后续神经元纤维缠结形成的成因，这可能依次导致神经元丧失。用Αβ抗原免疫APP转基因小鼠可以减少脑Αβ沉积物且缓和疾病进展。这首先 由Shenk等人，Nature, 400 173-177，1999报道，并且目前已由大量研究确证，所述大量研 究涉及不同转基因动物模型、各种主动疫苗以及用Αβ特异性单克隆抗体被动免疫(Bard 等人，Nature Med, 6 :916-919, 2000 Janus 等人，Nature, 408 :979-982, 2000 ；Morgan 等 人，Nature, 408 :982-985,2000 ；DeMattos 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. ,98 :8850-8855, 2001 ；Bacskai 等人，T. Neurosci. , 22 :7873-7878, 2002 ；Wilcock 等人，T. Neurosci. , 23 3745-3751,2003)。与动物数据一致，来自先前已接受用预先聚集的A β 1_42肽作为免疫原 (ΑΝ1792,Betabloc)主动免疫的患者的死后人脑组织的3个公开评估显示老年斑的局部清 除(Nicoll 等人，Nature Med. ,9 :448-452,2003 ；Ferrer 等人，Brain Pathol. , 14 :11-20, 2004 :Masliah等人，Neurology, 64 :129-131, 2005)。这些数据共同表明有效引起对A β抗 原的抗体应答的疫苗对在AD中发现的病理老年斑有效。然而，疫苗或抗体功效的机制仍有 待确定。使用主动免疫方法治疗AD的最先进研究曾经是使用与佐剂QS-21TM(AntigeniCS， New York, NY)共同施用的AN1792 (Betabloc)的II期试验。在2002年1月，当4个患者显 示与脑膜脑炎一致的症状时，这个研究终止(Senior, Lancet Neurol,! :3，2002)。最后，298 个治疗患者中的18个发展脑膜脑炎体征(Orgogozo等人，Neurology, 61 =46-54, 2003) 0 在脑炎和抗体滴度之间无关联，并且已报道关于这种效应的可能成因机制是针对自身免疫 原，特别是A β 42中部和羧基末端部分的T细胞的激活(Monsonego等人，J. Clin. Invest., 112 :415-422, 2003)。支持这个结论，来自发展脑炎的两个疫苗接受者的脑组织尸体检查揭示在1个患者中CD4+T细胞的大量脑膜浸润(Nicoll等人，NatureMed. ,9 =448-452,2003) 和在另一个患者中⑶4+、⑶8+、⑶3+、⑶5+、⑶7+T细胞的大量脑膜浸润O^errer等人， Brain Pathol. ,14 :11-20, 2004)。部分基于这些发现，基于靶向Aβ的N末端例如Αβ1_7 和Αβ 1-6将提供缺乏T细胞介导的不利事件的功效的概念，几个临床试验已用主动抗Aβ 疫苗起始。发明概述在一个实施方案中，本发明是治疗患有较严重形式的阿尔茨海默病(AD)的患 者的方法，该方法包括(i)确定患者患有较严重形式的ADjP (ii)以有效诱导免疫应答 的量施用Αβ的免疫原性片段。患有较严重形式的AD的患者选自简短精神状态检查 (Mini-Mental State Exam) (MMSE)得分为20或更低的个体、阿尔茨海默病评定量表认知 分量表(Alzheimer' s Disease Assessment Scale-Cognitive) (ADAS-Cog)得分为 35 或 更高的个体、总体衰退量表(GlcAal Deterioration Scale)(⑶S)得分为5期或更高的个 体、多套临床痴呆评级总和(ClinicalDementia Rating-Sum of Boxes) (CDR-SB)得分为 2 或更高的个体、在60-64岁以下且表现AD症状的个体，或在遗传筛选后诊断患有早发阿尔 茨海默病(EOAD)或家族型AD的个体。Αβ的免疫原性片段构成多价疫苗，所述疫苗包括 Αβ的多个、非邻接和非等同的免疫原性片段，所述片段各自具有至少一个抗原决定簇且 缺乏T细胞表位。在另一个实施方案中，多价疫苗包括通过赖氨酸支架连接的Aβ 3-10和 Αβ 21-28。多价疫苗进一步包括与Αβ肽片段缀合的载体，并且可以任选与佐剂一起施用。在另一个实施方案中，本发明是选择用作疫苗构建体的Αβ的免疫原性片段的方 法，所述疫苗构建体适合于治疗患有较严重形式的阿尔茨海默病(AD)的患者，所述方法包 括(i)以有效诱导免疫应答的量给动物施用Aβ的测试免疫原性片段；和(ii)评估来自被 免疫动物的抗血清与Αβ的N末端截短形式的交叉反应性；其中合适的疫苗构建体将选择 为能够诱导抗体形式的免疫应答的疫苗构建体，所述抗体对于A β的一种或多种N末端截 短形式是特异性的。Αβ的N末端截短形式选自Αβχ-42、pGlu-A0 3-4O、pGlu-A0 3-42、 pGlu-A β 11-40和pGlu-A β 11-42，其中χ与天然存在的A β的残基2-17对应。附图简述

图1表示从来自动物的抗血清的连续稀释液中检测的抗体，所述动物用与作为载 体的KLH缀合的A β 1-8 (MoVCl-8)的肽缀合物免疫且与ISCOMATRIX —起施用。图2表示从来自动物的抗血清的连续稀释液中检测的抗体，所述动物用与作为载 体的OMPC缀合的多价疫苗(Αβ 3-10/Αβ 21-28) (MVC)免疫且与ISCOMATRIX —起施用。发明详述术语“8聚体”意指与A β片段、天然A β肽类似物或肽模拟物对应的8氨基酸肽。 一个或多个8聚体可以与至少一个间隔区组合，以形成多价线性肽或形成多价分支MAP。术语“Αβ缀合物”意指与载体化学或生物连接的Aβ的8聚体或免疫原性片段， 所述载体例如匙孔血蓝蛋白或脑膜炎奈瑟氏球菌的外膜蛋白质复合体(OMPC)。术语“Αβ肽”意指本文在疫苗构建体中使用的任何合成(与天然存在的淀粉状蛋 白β肽(Αβ)比较)Αβ肽，包括但不限于线性8聚体、具有至少一个间隔区的多价线性肽 和多价分支多抗原肽(MAPs)。
术语“表位”指抗原上的位点，B和/或T细胞对该位点有应答。B细胞表位可以 由邻接氨基酸或通过蛋白质三级折叠而并列的非邻接氨基酸形成。由邻接氨基酸形成的 表位一般在暴露于变性溶剂后保留，而由三级折叠形成的表位一般在用变性溶剂处理后丧 失。T细胞表位由能够与宿主MHC分子形成复合体的肽组成。负责诱导CD8+T细胞应答的 人MHC I类分子的T细胞表位一般包括9-11个氨基酸残基，而负责CD4+T细胞应答的人MHC II类分子的表位一般包括12个或更多个氨基酸残基(Bjorkman等人Nature329 =506-512, 1987 ；Madden 等人 Cell75 :693-708 ；Batalia 禾口 Collins :Engelhard Annu Rev Immunol.， 12 :181-207-622. 1995 :Madden,Annu Rev Immunol.，13 :587-622. 1995)。与 T 细胞不同，B 细胞能够识别长度小至4个氨基酸的肽。由T细胞受体识别的T细胞表位/MHC复合体导 致T细胞激活。术语“多价肽”指具有超过一个抗原决定簇的肽。术语“多价疫苗”或“MVC”意指包含多种A β肽的疫苗构建体，所述Αβ肽各自具 有抗原决定簇且缺乏T细胞表位。在一个实施方案中，多价疫苗包括A β的两个非邻接、非 等同的免疫原性片段，例如Aβ 3-10和Αβ 21-28，它们各自缺乏T细胞表位。术语“Αβ的免疫原性片段”或“缺乏T细胞表位的A β的免疫原性片段”意指能 够诱导抗Aβ的抗体形式的免疫应答的8聚体或Aβ片段，但所述应答不包括对自身抗原 A β的T细胞应答。术语“免疫学”或“免疫”或“免疫原性”应答指脊椎动物个体中针对抗原的体液 (抗体介导的)和/或细胞(由抗原特异性T细胞或其分泌产物介导的)应答的发展。此 应答可以是通过施用免疫原诱导的主动应答或通过施用抗体诱导的被动应答。术语“较严重形式的AD”指与年龄对照非AD患者或显示更晚期临床病理学的患 者比较，具有与更晚期形式的神经元变性相关的任何形式AD的患者。此类患者包括但不限 于简短精神状态检查(MMSE)得分为20或更低的个体、阿尔茨海默病评定量表认知分量表 (ADAS-Cog)得分为35或更高的个体、总体衰退量表(GDQ得分为5期或更高的个体、多套 临床痴呆评级总和(CDR-SB)得分为2或更高的个体、在60-64岁以下且表现AD症状的个 体，或在遗传筛选后诊断患有早发阿尔茨海默病(EOAD)或家族型AD (特别是与PS-I突变 相关的那些)的个体，或患有特征在于A β的致病沉积物的AD形式的患者。术语“淀粉状蛋白β肽(Αβ)的致病沉积物”或“Αβ的致病沉积物”意指包括 Αβ的神经毒性形式例如Aβ 42，或已知与较多神经元变性或较严重临床表型相关的Aβ的 N末端或C末端截短形式的斑块沉积物。此类Αβ形式包括但不限于4 0 404 0 424 0的N 末端截短形式例如A β χ-42，其中χ与天然存在的A β的残基2-17对应，和通过末端氨基酸 环化，例如N末端谷氨酸的环化修饰的A β的截短形式，即pGluA β 3-42或pGluA β 11-42。术语“致病A β沉积物的特异性抗体”指与A β的神经毒性形式交叉反应的抗体， 所述A β的神经毒性形式包括全长A β 40或Αβ 42、A β的N末端截短形式、或在末端氨基 酸上具有修饰的A β的N末端或C末端截短形式，例如pGluA β 3-42或pGluA β 11-42。术语“药物组合物”意指适合施用于哺乳动物个体的化学或生物组合物。如本文 使用的，它指任选连同或不连同佐剂一起施用的包括本文描述的8聚体、Αβ的免疫原性片 段和Aβ缀合物的组合物。淀粉状蛋白β肽(Αβ)的致病沉积物
越来越多的证据显示在AD患者脑中沉积的Aβ在结构上不是均质的(Saido等 人，Neuroscience Letters, 215 173-176,1996)。除多种形式的全长淀粉状蛋白β肽 (Αβ )Αβ 40和Αβ 42外，已检测出在肽的N末端和C末端上具有修饰的Aβ的多种截短形 式(Russo 等人，FEBSLetters,409 :411-416,1997 ；Saido 1996)。越来越多地认为这些Αβ 的截短形式在AD发展中是关键的(Piccini等人，Τ, Biol. Chem. , 280 (40) =34186-34192, 2005)。在这些Αβ的截短形式中，从残基Glu3或Glull上的焦谷氨酰开始的N末端截短 的肽占优势(Russo，1997)。pGlu3形式(Αβ3(ρΕ)_42)特别普遍，包括总A β的约50% (Youssef 等人，Neurobiol. Aging, 29 1319-1333，2008)。已发现这些N末端截短形式在诊断患有散发性AD的患者的脑中、在早发家族 性AD(EOAD)患者(最特别地具有早老蛋白-I(PS-I)突变的那些)中和在患有唐氏综合 征(DS)的患者中早期积累(Russo 等人，FEBS Lett. ,409 :411-416，1997 ;Saido 等人， Neurosci, Lett. , 215 173-176,1996 :Tekirian 等 人，J. Neuropathol. Ex. Neurol. , 57 76-94，1998)。与患有不含突变的散发性、晚发AD (LOAD)的患者比较，患有由PS-I突变驱动 的EOAD的个体一般在60-64岁前发展疾病症状。此外，患有唐氏综合征(此)的患者由于其 21号染色体(与某些遗传形式的AD相关的基因位于同一染色体)的额外拷贝也发展E0AD， 导致多30%的APP和增加的Αβ产生。家族性丹麦痴呆是另一种形式的早发痴呆，其特征在 于大的、几乎独占的pyroGlu(N末端修饰Αβ的)比例CTomidokoro,等人，Τ. Biol. Chem.， 280 (44) =36883-36894,2005) 与LOAD比较，由于PS-I突变或携带DS，展示EOAD的个体 在其脑中携带明显更多的 pGluA β 3-42 (Russo，1997 ；Russo 等人，Nature, 405 :531-532, 2000 ；Russo 等人，Neurobiol. Pis. ,8 173-180，2001 ；Hosoda 等人，J. Neuropathol. Exp. Neurol. ,57 :1089-1095,1998).更重要的是，如尸体组织分析所测定的，具有更大比例的 N末端截短形式，特别是占优势的PGluAi3 3-42形式的患者，获得在神经元变性程度和临床 病理学严重性方面较严重的疾病(Russo，1997 ;Russo 2000)。评估个体的AD或痴呆一般将包括某些形式的精神或认知评估，这可以通过各种 方法进行，包括阿尔茨海默病评定量表认知分量表(ADAS-Cog)、总体衰退量表(GDQ、多套 临床痴呆评级总和(CDR-SB)或更典型地，简短精神状态检查(MMSE)。MMSE得分最大值是 30，其中得分一般分类为轻度(2146)、中度(15-20)和重度(14或更低)。ADAS-Cog的得 分范围从O (最可能)到70 (最不可能)，其中23附近的得分是轻度损伤的截止值，并且 约35或更高的得分与中度和更高的损伤相关。CDR的得分最大值是4，其中得分分类为正 常(0)、轻度(0. 5-1)、中度⑵和重度(3-4)。类似地，⑶S的得分从1期(最佳)到7期 (最差)，其中4期与轻度损伤的约22. 5的ADAS-Cog得分相似，并且5期与中度损伤的约 35的ADAS-Cog得分相似。关于与AD和痴呆相关的匪SE的一般讨论，参见，i^olstein等 人，J. Psichiat2 Res.，12 189-198，1975。关于 ADAS_Cog、MMSE 和 GDS 评分和有效性的比 较，参见 Doraiswamy 等人，Neurology，48 (6) :1511_1517，1997。ADAS-Cog 和 MMSE—般已 被接受用于在临床试验中评价功效中使用。待考虑的另一种因素将是个体的家族史，即另 一个(或多个)紧密相关的家族成员是否具有视为重度的AD形式。为了证实由于FAD突 变导致的EOAD的存在，可以对来自患者的白细胞的基因组DNA执行序列分析(Finclch，等 人，Am. J. Hum. Genet.，66 :110_117，2000)。因此，展示早期、迅速发展形式的AD或痴呆例 如EOAD或FAD的个体，特别是在60-64岁以下的个体，或匪SE评分20或更低的个体将被视为患有较严重形式的AD，并且预期具有特征在于致病性淀粉状蛋白沉积物的斑块，包括 N末端截短形式，并且将是本文多价疫苗的候选人。申请人:在本文中已发现包括A β的多个免疫原性片段的疫苗构建体提供更有效 方法来治疗AD患者，所述AD患者患有与A β的N末端截短形式相关的较严重形式的AD。 多价疫苗是广谱疫苗，因为它能够治疗患有含斑块的AD形式的患者，所述斑块不仅包含与 AD相关的Αβ的全长形式，还包括Αβ的N末端截短形式。本发明的多价疫苗能够与多种 和更多形式的神经毒性Aβ (特别是就N末端截短形式而言)交叉反应。申请人在本文中 首次显示包括Αβ的多个非邻接、非等同免疫原性片段，缺乏T细胞表位的多价疫苗，可以 更有效地用于治疗AD，特别是以下那些患者其具有已知与在神经元变性和临床病理学方 面较严重形式的疾病相关的Aβ种类。治疗较严重形式的AD的疫苗构建体申请人:在本文中已令人惊讶地发现包括缺乏T细胞表位的Αβ的多个免疫原性 片段的疫苗构建体(本文称为多价疫苗)可以提供广谱疫苗，以治疗患有较严重形式的AD 的患者，且特别是具有Αβ的致病沉积物的患者，所述沉积物包括Aβ的N末端截短形式。 由于在文献中报道的其他抗Αβ疫苗构建体看起来针对Αβ的单个免疫原性片段，本发明 提供有利和更有效的疫苗，用于靶向已知与Αβ的N末端截短形式的存在相关的那些AD形 式。在相关共同未决的申请中，申请人已描述了肽缀合物的组合物和使用该肽缀合 物来治疗AD的方法，所述肽缀合物包括缺乏T细胞表位并且能够诱导抗A β抗体形式 的有益免疫应答的Αβ的免疫原性片段(PCT/US 2006/016481、WO 2006/121656 ；USSN 11/919,897、US2009-0098155，其教导引入本文，如同详尽阐述一样)。其中的疫苗组合物 包含Αβ的免疫原性片段，所述免疫原性片段的大小限制为8个氨基酸(8聚体)，并且设计 为去除任何潜在的C末端T细胞表位锚定残基。Αβ的免疫原性片段可以是8聚体线性肽、 具有至少一个PEG间隔区的多价线性Αβ缀合物或多价分支多抗原肽(MAP)。在一个优选 实施方案中，疫苗构建体是包括在赖氨酸支架上连接的Aβ 3-10和Αβ 21- 的分支MAP。其中在主动免疫方案中使用以治疗AD的疫苗构建体可以以药物组合物形式施 用，其中MAP的免疫原性片段可以与载体化学或生物连接，所述载体例如血清白蛋白、匙孔 血蓝蛋白(KLH)、免疫球蛋白分子、卵白蛋白、破伤风类毒素蛋白质，或来自其他致病细菌例 如白喉、大肠杆菌、霍乱或幽门螺杆菌(H. pylori)的类毒素，或减毒的毒素衍生物。在一个 优选实施方案中，载体是脑膜炎奈瑟氏球菌的外膜蛋白质复合体(OMPC)。其中在主动免疫方案中使用以治疗AD的疫苗构建体可以与佐剂一起施用，所述 佐剂例如明矾(alum)、脂质例如3-脱-0-酰化单磷酰脂质A(3D-MPL)或基于皂苷的佐剂。 在一个优选实施方案中，佐剂是基于皂苷的佐剂ISCOMATRIX (CSL Ltd,Parkville, Australia)。申请人:在本文中已令人惊讶地发现其中肽缀合物的优选实施方案，即包括用赖氨 酸支架连接的A β 3-10和A β 21-28且与OMPC缀合的分支MAP的多价疫苗目前提供广谱主 动疫苗用于治疗AD。这种多价疫苗(MVC)的结构如下(SEQ ID NO:l) Ac-EFRHDSGY(Aha)-Lys-Lys-(BrAc)-NH2
(SEQ ID NO:2) Ac-AEDVGSNK(Aha)J其中“Aha”表示6-氨基己酸，并且“BrAc”表示溴乙酰。申请人:在本文中已显示这种广谱MVC提供相对于目前正在进行临床评价的其他 主动疫苗方法的优点。这种多价疫苗不仅已显示提供与Aβ的多种形式(且特别是与较严 重形式的AD相关的A β的N末端截短形式)特异性交叉反应的抗体形式的免疫应答，它还 提供更强的免疫应答，因为当χ彡3时，Aβ 1-8疫苗不产生对Αβ χ-42的任何免疫应答。因 此，本文中的多价疫苗能够提供比在临床考虑下的其他主动疫苗更佳的、对Αβ的N末端截 短形式的免疫原性，即更广谱的应答。用于治疗较严重形式的AD的治疗剂申请人:用多价疫苗构建体免疫豚鼠，所述构建体即包括经由赖氨酸支架连接的 A β 3-10和A β 21-28的分支MAP (本文称为多价疫苗构建体-MVC)，其与载体(OMPC)缀合 且与基于皂苷的佐剂ISCOMATRIX —起施用。免疫的动物产生多克隆抗体形式的免 疫应答。从动物中抽取血清，并且使抗血清系列稀释且测试对A β的众多形式的交叉反应 性，所述Αβ的众多形式包括全长Αβ40和Αβ42、和表1中列出的Αβ的N末端截短形式。类似地，申请人用与天然存在的A β的氨基酸残基1-8对应的合成的单价A β肽 (本文称为单价疫苗构建体-MoVC 1-8)免疫豚鼠，所述合成的单价A β肽与载体(KLH)缀 合且与基于皂苷的佐剂ISCOMATRIX —起施用。依据信息和信心，认为目前正在进行 临床评估的其他主动疫苗采用与分别缀合于CRM197或VLP的Αβ 1-7和Αβ 1-6对应的类 似单价疫苗构建体。A β 1-7/CRM197疫苗构建体被认为与基于皂苷的佐剂QS-21—起施用， 而A β 1-6/VLP构建体不与佐剂一起施用。目前在用于AD的临床试验中的主动疫苗包括Αβ序列的N末端残基1，并且长度 为6-7个氨基酸。与之形成对比，由申请人利用的MVC包括与Αβ残基3对应且在残基10 处终止的Αβ的免疫原性片段，和与残基21对应且在残基观处终止的Αβ的第二个免疫原 性片段。如本文证实的，与采用从Αβ残基1开始的肽的其他主动疫苗方法比较，这种MVC 识别更多A β的N末端截短形式。不希望受任何理论束缚，认为在WO 2006/121656中描述 的其他多价疫苗构建体将以相似特异性执行。本领域普通技术人员将认识到且理解多价8 聚体抗原的使用将产生代表可以掺入如本文描述的疫苗构建体内的任何片段长度的应答， 条件是该片段长度能够产生所需多克隆免疫应答，而不刺激针对T细胞应答的抗原。因此， 在备选实施方案中，本文描述的本发明可以包括Αβ片段，包括但不限于7聚体、6聚体、5 聚体和4聚体。在进行本文实验前，申请人寻求基于疫苗构建体的组合物预测，来自接种的动物 的抗血清将与A β的何种形式交叉反应，即全长或N末端截短形式。与来自多价疫苗构建 体(Αβ 3-10/Αβ 21-28) (MVC)和单价疫苗构建体A β 1-8 (MoVCl-8)所交叉反应的抗血清的 实际种类比较，这些预测在表1中显示。每种Αβ形式的交叉反应性程度也显示于图1和 2中。如由图1和2显而易见的，与MoVCl-8构建体比较，本文描述的MVC不仅识别更大量 的N末端修饰的A β肽，它还与和最严重形式的疾病最相关的形式且特别是PGlu3Ai3 3-42 具有更大的交叉反应性。最简洁地，这个数据证实与包括等于或少于8个氨基酸的肽的疫苗比较，多价疫苗可能诱导能够与从游离N末端开始的截短形式(Αβ -χ)结合的抗体。表 权利要求
1.治疗患有较严重形式的阿尔茨海默病(AD)的患者的方法，该方法包括(i)确定患者 患有较严重形式的ADdP (ii)以有效诱导免疫应答的量施用A β的免疫原性片段。
2.权利要求1的方法，其中患有较严重形式的AD的患者选自简短精神状态检查 (MMSE)得分为20或更低的个体、阿尔茨海默病评定量表认知分量表(ADAS-Cog)得分为 35或更高的个体、总体衰退量表(GDQ得分为5期或更高的个体、多套临床痴呆评级总和 (CDR-SB)得分为2或更高的个体、在60-64岁以下且表现AD症状的个体，或在遗传筛选后 诊断患有早发阿尔茨海默病(EOAD)或家族型AD的个体。
3.权利要求2的方法，其中所述Αβ的免疫原性片段构成多价疫苗，所述疫苗包括Αβ 的多个非邻接的免疫原性片段，所述片段各自缺乏T细胞表位。
4.权利要求3的方法，其中所述多价疫苗包括通过赖氨酸支架连接的Αβ3-10和 Αβ 21-28ο
5.权利要求4的方法，其中所述多价疫苗进一步包括与所述Aβ免疫原性片段缀合的 载体。
6.权利要求5的方法，其中所述多价疫苗与佐剂一起施用。
7.选择用作疫苗构建体的Αβ的免疫原性片段的方法，所述疫苗构建体适合于治疗患 有较严重形式的阿尔茨海默病(AD)的患者，所述方法包括(i)以有效诱导免疫应答的量给动物施用A β的测试免疫原性片段；和( )评估来自被免疫动物的抗血清与Αβ的N末端截短形式的交叉反应性；其中合适的疫苗构建体将选择为能够诱导抗体形式的免疫应答的疫苗构建体，所述抗 体对于Αβ的一种或多种N末端截短形式是特异性的。
8.权利要求7的方法，其中所述Aβ的N末端截短形式选自Ai3x-42、pGlu-Ai33-40、 pGlu-Αβ 3-42、pGlu-A3 11-40 和 pGlu-A β 11-42，其中 χ 与天然存在的 A β 的残基 2-17 对 应。
全文摘要
本发明提供了用于治疗患有较严重形式的阿尔茨海默病(AD)的患者的方法，其中严重形式的AD的特征在于淀粉状蛋白β肽(Aβ)的致病沉积物，所述方法包括施用能够诱导抗体形式的免疫应答的Aβ的免疫原性片段，所述抗体对于Aβ的致病沉积物，且特别对于Aβ的神经毒性形式，包括Aβ的N末端截短形式是特异性的。本发明进一步提供了用于选择Aβ的合适免疫原性片段的方法，所述片段用于治疗较严重形式的AD。
文档编号G01N33/50GK102089000SQ200980126533
公开日2011年6月8日 申请日期2009年7月2日 优先权日2008年7月8日
发明者G·G·金尼, L·B·罗森, M·J·萨瓦奇, M·奇特伦, 梁小平 申请人:默沙东公司