专利名称：：体外诊断试剂的着色方法
技术领域：
：本发明涉及了临床医学诊断过程中体外诊断试剂的一种着色方法。目前用于临床诊断的试剂药盒种类很多，包括放射免疫类试剂、酶免疫类试剂、生化类试剂、基因诊断(PCR)类试剂等，每类试剂中又包括诸多不同的品种，而每种试剂盒又由多种不同的半成品组份组成(多者可达十种半成品成份)，大部分成份多是无色液体(有些为冻干品，在使用前用液体稀释)，在具体使用时，按顺序分别滴加到样本中(有的用专用的取液器吸取后滴加，有的已盛装在专用塑料滴瓶中，可直接滴加)。大部分半成品成份基本都为无色液体，没有直接的颜色区分，按不同的先后顺序滴加到样本中时，前后也不发生颜色变化。由于在具体使用每种试剂时，需在样品中顺序滴加多种液体成份，要求滴加的量很少，难以在数量的变化上加以区分，而在顺序滴加两种成份时，前后又没有明显的颜色变化，所以操作人员极易发生漏加或重复滴加的失误。本发明的目的，是提供一种体外诊断试剂的着色方法，以通过颜色变化有效避免操作过程中的重复加样或漏加某种成份的问题。该方法的具体方案是在常温常压下，在试剂半成品组份中加入食品红、伊文斯蓝、苋菜红、藻红B、藏红T、甲酚蓝、西湖蓝、考马斯蓝、夜蓝等染色剂，染色剂与具体半成品组份的重量比在0.001-100‰左右，最佳选择为0.01-0.5‰之间，所谓的半成品组份最好选择抗体、样品稀释液、中和溶液或标记物溶液。该染色剂与原溶液不发生化学反应，不影响半成品的性能指标，但可使原来无色的液体成份显示很明显的颜色，如红色、兰色等。由于加入的量非常小，故亦不影响原溶液的体积和浓度等。进行了相应处理的液体半成品成份，由于颜色区别明显，操作人员在具体操作过程中可根据颜色的变化得知是否已经加入某种成份，从而避免了因忘记或重复加入某种成份而造成的工作失误。使操作过程方便、准确，为临床诊断尤其是大规模操作提供了可靠的质量保证。列举两个实施例如下实施例一用放射免疫(RIA)方法检测乙型肝炎核心·IgM抗体(抗-HBC.IgM)放免试剂盒的半成品成份有6种稀释液、阴性对照血清、阳性对照血清、包被球、中和液、125I-标记物溶液。其中，中和溶液中加入0.05‰的伊文斯蓝，呈明显深蓝色；125I-标记物溶液中加入0.1‰的食品红，则标记物溶液呈深红色。具体使用过程如下步骤1.按要求量取病人血清样本加入试管中并稀释，取阴、阳性血清各200微升加入相应反应管，分别加入包被球一粒，按程序培育后洗涤。因是实验的第一步操作，一般不会出现误操作，所以该步骤所用溶液不需着色。步骤2.加中和溶液，培育后洗涤。虽然中和溶液每管加样的数量仅为200微升，但由于中和溶液呈明显的深兰色，这样，在具体的实验操作中是否在各试管中滴加了溶液就一目了然。步骤3.加125I-酶标记物，温育洗涤。125I-标记物溶液为深红色，每管滴加量也以微升计，食品红与标记物不发生任何不良反应，毫不影响标记物溶液的各项指标性能。列举一组实验数据如下</tables>从对比数据可以看出，加入不同浓度的染色剂(伊文斯蓝、一品红)对阴阳性对照cpm平均值没有规律性的影响。但在具体配制时，若染色剂加入量太少，则溶液显色较淡，不利观察，若染色剂加入量过多(如达到1‰以上时)，则溶液有些浑浊。所以，根据使用和实用的需要，我们选择了比较合适的加入量，分别在中和液、标记物溶液中加入0.05‰的伊文斯蓝、0.1‰的食品红。步骤4.仪器测量，判断结果。实施例二酶免法(EIA)测定乙型肝炎θ抗体(抗-HBe)。试剂盒组成成份包被板、阴性对照、阳性对照、酶标记物溶液、底物液、终止液、中和溶液。其中，常温常压下在中和溶液中加入0.1‰的食品红，使其呈深红色；在标记物溶液中加入0.05‰的伊文斯蓝，使其呈深兰色。具体使用过程步骤1.拆取包被板微孔，分别加待测样本及阴阳性对照于相应孔内。步骤2.在微孔中分别加入中和溶液一滴。中和溶液为深红色，加样与否便一目了然，大大方便操作，而且食品红不影响原溶液性能指标。步骤3.分别加酶标记物溶液1滴。酶标记物溶液为深红色，加样与否便极易判断。伊文斯蓝对原溶液性能指标无影响。列举一组实验数据如下</tables>从对比数据可以看出，加入不同浓度的染色剂(伊文斯蓝、一品红)对阴阳性对照平均吸光度值(0D值)没有规律性的影响。但在具体配制时，若染色剂加入量太少，则溶液显色较淡，不利观察，若染色剂加入量过多(如达到1‰以上时)，则溶液有些浑浊。所以，根据使用和实用的需要，我们选择了比较合适的加入量，分别在中和液、标记物溶液中加入0.1‰的食品红、0.05‰的伊文斯蓝。步骤4.温育洗涤。步骤5.加底物液。本步骤加样后可发生颜色变化，故无需着色。步骤6.仪器或目测判断结果。权利要求1.一种体外诊断试剂的着色方法，其特征在于在常温常压下，在试剂半成品组份内加入食品红、伊文斯蓝、苋菜红、藻红B、藏红T、甲酚蓝、西湖蓝、考马斯蓝、夜蓝等染色剂，染色剂与具体半成品组份的重量比在0.001-100‰之间。2.根据权利要求1所述的体外诊断试剂的着色方法，其特征在于加入染色剂的量与具体半成品组份的重量比最好在0.01-0.5‰范围之间。3.根据权利要求1所述的体外诊断试剂的着色方法，其特征在于体外诊断试剂半成品组份最好是在抗体、样品稀释液、中和溶液或标记物溶液内加入染色剂。全文摘要本发明涉及了临床医学诊断过程中体外诊断试剂的一种着色方法,主要解决诊断试剂操作过程中由于各半成品组分无颜色变化带来的重复加样或漏加某种成分的问题。本发明的特征是在常温常压下,在试剂半成品组分内加入食品红、伊文斯蓝等染色剂,染色剂的具体半成品组分的重量比在0.001—100‰之间,最好选择0.01—0.5%之间。加注颜色的半成品组分最好选择抗体、样品稀释液、中和溶液或标记物溶液。本发明可方便地应用于临床医学诊断,尤其是为大规模操作提供了可靠的质量保证。文档编号G01N33/50GK1180169SQ9611594公开日1998年4月29日申请日期1996年9月3日优先权日1996年9月3日发明者许宏艳申请人:许宏艳