专利名称：一种固态电化学发光检测三聚氰胺的方法
技术领域：
本发明涉及一种检测三聚氰胺的方法，具体地说，是一种基于介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法。
背景技术：
电化学发光(electrochemiluminescence, ECL)是通过电化学激发反应产生发光的现象。近年来，它已经得到了广泛关注由于其线性范围宽，灵敏度高及可控性强等优点.在所有的电化学发光体系中，由于三联吡啶钌具有良好的化学和电化学稳定性，已成为目前应用范围最广和研究最为活跃的ECL体系之一，已被广泛用于检测草酸，烷基胺，NADH、胺和氨基等化合物。三聚氰胺(I,3,4,6-triamine 5-triazine-2, C3H6N6MEL)是一种人工合成的化学 物，主要用于生产氨基树脂、热固性塑料泡沫和化肥。近年来，由于其高氮含量出6%)，三聚氰胺被非法添加到了食品和饲料中，在蛋白质浓度测试时以提高其蛋白质含量，因此，开发可靠、灵敏的三聚氰胺的检测方法在食品安全领域具有重要意义。中国专利CN101975774B于2010年9月18日公开了一种电化学发光检测三聚氰胺的方法，其中将10_3mol/L的三联吡啶钌或104mol/L的钌吩噻嗪以及待测的三聚氰胺样品分别加入到PH值为10的0. IM硼酸盐缓冲溶液中，经扫描电位范围0 I. 5V进行扫描，用光检测器采集电化学工作站扫描产生的光信号，再经计算机数据处理后得到三聚氰胺样品的含量。但是通常在使用溶液相的三联吡啶钌电化学发光检测分析物时，需要不断地向反应体系加入三联吡啶钌，由于其价格昂贵使检测成本颇高，从而限制了三联吡啶钌在电化学发光领域的广泛应用。因此已知的电化学发光检测三聚氰胺的方法存在着上述种种不便和问题。

发明内容
本发明的目的，在于提出一种能循环使用三联吡啶钌，且在循环反应中不产生消耗的基于介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法。为实现上述目的，本发明的技术解决方案是一种基于介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法，其特征在于包括以下步骤a、介孔二氧化硅纳米球的制备将乙醇、水、氨水和十六烷基溴化铵混合搅拌形成均匀的分散液，然后将正硅酸乙酯滴加到分散液中，反应10 20小时，反应产物经过离心、洗涤、干燥后，将干燥产物在620 670°C煅烧，即得到介孔二氧化硅纳米球，其粒径为400 600nm -；分散液pH值为9 12，其中十六烷基溴化铵含量为0. 002 0. 003g/ml，正硅酸乙酯与分散液的体积比为0. 002 0. 003。b、介孔二氧化娃纳米球/三联批唳钌/Nafion修饰电极的制备,包含以下步骤
(I)用2#和5#金相砂纸抛光打磨玻碳电极，再用0. 3和0. 05 i! m的Al2O3抛光粉抛光，冲洗去表面污物；(2)依次在体积比1:1的HNO3溶液、无水乙醇、二次蒸馏水中分别超声I 2分钟，最后将处理好的电极用高纯N2吹干；(3)取6 IOii L 2mgmL_1的介孔二氧化娃纳米球溶液滴到处理好的玻碳电极上，室温下自然干燥；(4)将3 6 ii L0. 5%wtNafion滴加到经步骤(3)处理的玻碳电极表面，然后浸到
I.OX 10_3M六水合三联吡啶钌(Ru (bpy) 32+)溶液中制备成修饰电极；C、用介孔二氧化娃纳米球/三联批唳钌/Nafion修饰电极对三聚氰胺的检测在任意一种型号的电化学工作站上，根据三聚氰胺样品浓度，使用介孔二氧化硅·纳米球/三联吡啶钌/Nafion修饰电极进行定量检测三聚氰胺的含量，所述修饰电极在使用之前，使用二次蒸馏水冲洗，在pH值7 12的0. IM的磷酸盐缓冲溶液进行循环伏安扫描，其中扫描电位范围所述修饰电极0 +1. 25V.d、用电致发光检测器采集电化学发光检测仪产生的光信号，再经计算机数据处理后得到三聚氰胺样品的含量。本发明的基于介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法还可以采用以下的技术措施来进一步实现。前述的方法，其中所述Nafion由Sigma-Aldrich化学公司生产。前述的方法,其中所述三联卩比唳钌由Sigma-Aldrich化学公司生产。前述的方法，其中所述方法适用于检测所有含有三聚氰胺的物质，检测可使用任意一款电化学发光检测仪。前述的方法，其中所述六水合三联吡啶钌的结构式如下
权利要求
1.一种基于介孔ニ氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法，其特征在于包括以下步骤 a、介孔ニ氧化娃纳米球/三联卩比唳钌/Nafion修饰电极的制备,包含以下步骤 (1)用2#和5#金相砂纸抛光打磨玻碳电极，再用O.3和O. 05 μ m的Al2O3抛光粉抛光，冲洗去表面污物； (2)依次在体积比为I:I的HNO3溶液、无水こ醇、二次蒸馏水中分别超声I 2分钟，最后将处通好的电极用闻纯N2吹干； (3)取6 10μ L2mgmじ1的介孔ニ氧化娃纳米球溶液滴到处理好的玻碳电极上,室温下自然干燥； (4)将3 6μ L O. 5wt%的Nafion溶液滴加到经步骤(3)处理的玻碳电极表面，然后浸到I. OX IO-3M六水合三联吡啶钌溶液中制备成修饰电极； b、用介孔ニ氧化娃纳米球/三联卩比唳钌/Nafion修饰电极对三聚氰胺的检测 在电化学发光检测仪上，使用介孔ニ氧化硅纳米球/三联吡啶钌/Nafion修饰电极进行定量检测三聚氰胺的含量，所述修饰电极在使用之前，使用二次蒸馏水冲洗，在PH值7 12的O. IM的磷酸盐缓冲溶液进行循环伏安扫描，所述修饰电极扫描电位范围O +1. 25V ； C、用电致发光检测器采集电化学发光检测仪产生的光信号，再经计算机数据处理后得到三聚氰胺样品的含量。
2.权利要求I所述基于介孔ニ氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法，其特征在于，所述介孔ニ氧化娃纳米球的粒径为400 600nm。
3.权利要求I或2所述基于介孔ニ氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法，其特征在于，所述介孔ニ氧化硅纳米球的制备方法包括以下步骤 将こ醇、水、氨水和十六烷基溴化铵混合搅拌形成均匀的分散液，然后将正硅酸こ酯滴加到分散液中，反应10 20小吋，反应产物经过离心、洗涤、干燥后，将干燥产物在620 670°C煅烧，即得到介孔ニ氧化硅纳米球； 分散液PH值为9 12，其中十六烷基溴化铵含量为O. 002 O. 003g/ml，正硅酸こ酯与分散液的体积比为O. 002 O. 003。
4.如权利要求I所述的基于介孔ニ氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法，其特征在于，所述六水合三联吡啶钌的结构式如下
全文摘要
一种基于介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法，其特征在于包括以下步骤a介孔二氧化硅纳米球的制备，b介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌/Nafion修饰电极的制备，c用介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌/Nafion修饰电极对三聚氰胺的检测和d用电致发光检测器采集电化学发光检测仪产生的光信号，再经计算机数据处理后得到三聚氰胺样品的含量。本发明的基于介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌固态电化学发光检测三聚氰胺的方法具有介孔硅(mSiO2)材料具有大比表面积和孔隙体积，以及介孔二氧化硅纳米球/三联吡啶钌/Nafion修饰电极能有效地用于电致化学发光(ECL)检测三聚氰胺的优点。
文档编号G01N21/76GK102854183SQ20121032410
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月4日 优先权日2012年9月4日
发明者贾能勤, 曹宏梅, 胡晓青 申请人:上海师范大学