专利名称：用于基质辅助激光解吸/离子化的基质及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于紫外线基质-辅助激光解吸/离子化质谱分析的基质，其由作为质子受体的胺盐和作为质子供体的有机物质组成，其中胺或有机物质吸收紫外线；本发明还涉及这类基质的应用。
紫外线基质-辅助激光解吸/离子化质谱分析通常简写为UV-MALDI-MS。
UV-MALDI-MS的分析原理基于从被分析物与紫外线吸收基质物质的共结晶内分子(包括生物分子)的基质-辅助激光解吸和离子化。此类紫外线吸收物质也简称为MALDI基质。
常见的MALDI基质例如2，5-二羟基苯甲酸(DHB)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)和反-3，5-二甲氧基4-羟基肉桂酸(芥子酸)。
被分析物和基质的共结晶例如通常受在金属试样夹上混合和干燥所述紫外线吸收基质和被分析物的水合溶液的影响。所述共结晶物固相中产生的离子然后用质谱分析仪检测，其基于例如TOF、四极杆、离子捕集器、或FTICR原理、或这些技术的组合。
UV-MALDI-MS主要用于分子或生物分子的质谱分析，例如碳水化合物、蛋白质、缩氨酸、核苷酸、和类脂物包括其相应的共轭物如糖蛋白、脂蛋白等。使用MALDI-MS分析对全细胞和微生物进行直接性能表征也是可行的。关于这一点可参见例如，Alomirah HF，Alli I，Konishi Y.的Applications of mass spectrometry to food proteins andpeptides，J.Chromatogr.A.2000 Sep 29；893(1)1-21.Review；和Kussmann M，Roepstorff P.Sample preparation techniques for peptidesand proteins analysed by MALDI-MS，Methods Mol.Biol.2000；146405-24；和Bonk T，Humney A.，MALDI-TOF MS analysis of Protein andDNA，Neuroscientist，2001，27(5)，465-72。
MALDI-MS方法有许多优点。其中包括分析的高灵敏度(离析范围为10-15至1018摩尔)、对不纯物和各种缓冲物质有高的容许误差、简单的样品制备(“干燥液滴法”)、以及所述MALDI-MS分析原理可具有高的分析容量。
此外，可在MALDI靶子或MALDI试样夹上使用酶，以便对用质谱分析待研究和待检测的物质进行修饰。为此，可将酶的溶液、被分析物/培养基和中性原子、常规的MALDI基质如ATT直接施加到MALDI靶子上。发生的酶促反应然后通过反应混合物的干燥和共结晶而终止。然后照常在实际的酶促反应后用MALDI法对反应产物进行分析。可替换地，酸性基质如DHB可被加入到后来的反应混合物中以结束酶促反应。
但是，用固体基质或固态被分析物制品进行MALDI-MS分析的显著不足是，分析物从同一制品或同一样品不同位置解吸的信号强度差别非常大。首先，该变化由于被分析物分子在干燥制品表面的分布不同；其次，导致这种结果的原因在于不同种类的物质在被分析物/样品和基质的干燥共结晶物的晶格内有不同的结合。目前，为了得到更均匀的结晶物已提出各种制备方法。例如包括薄层制备(Vorm O.，Roepstorf，P.，Mann M.，Anal.Chem.，64，1992，1879-1884)，作为晶核的基质晶体薄层的制备，加入硝化纤维以及岩藻糖，以及将常规MALDI基质例如DHB或CHCA溶解在甘油中(Sze ET，Chan TW，Wang G.Formulation of matrix solutions for use in matrix-assisted laserdesorption/ionisation of biomolecules.J.Am.Soc.Mass.Spectrom.1998Feb；9(2)166-74).但是，这些最优化的方法往往仅能解决与MALDI-MS分析法相关的某些问题。
由有机酸胺盐组成的离子液体已被提出作为用于MALDI-MS的基质，参见D.W.Armstrong et al.，Anal.Chem.2001，73，3679-3686。这涉及各种肉桂酸衍生物的胺盐或从氨基喹啉和CHCA得到的胺盐(Kolli VSK，Orlando R，Rapid Commun.Mass Spectrom.1996，10923-926)。
本发明的目的是提供用于UV-MALDI-MS的改进的基质，通过所述UV-MALDI-MS法可获得没有误差且可再现的分析值，其中特别地可将单纯的质谱分析与从酶促反应/改性得到的附加结果结合起来，并能进行检测。
本发明的该目的可通过使用权利要求1～4中教导的基质来实现，也可通过使用根据所述权利要求中教导的离子型液态基质来实现。
本发明的对象包括新型基质，即离子型液态基质，从而基质在室温下为液态。这些基质由作为质子受体的胺盐和作为质子给体的有机物质制备而成，其中或胺盐或有机物质可吸收紫外线。所述胺为3-氨基喹啉；吡啶；伯胺，其上的氮原子可连接苯基、或直链或支链的饱和C1-C11烷基，且这些基团可用羟基取代；仲胺或叔胺，其上的N原子可连接两个或三个可相同或不同可为直链或支链且可用羟基取代的饱和C1-C8烷基，和苯基；咪唑；C和/或N烷基化的咪唑衍生物。
所述C1-C8烷基可具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子，伯胺中的C1-C11烷基可具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个碳原子。
因此本发明的所用胺包括·伯胺，其上的氮原子可连接可用羟基取代的甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正丁基、异丁基、