专利名称：扶正固本颗粒的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种癌症患者放、化疗合并用药，特别是涉及该药物的质量控制方法。
背景技术：
扶正固本颗粒为益气养阴，凉血解毒类用药。用于食管癌，胃癌气阴两虚兼热毒证患者放、化疗时合并用药。其现执行标准为国家食品药品监督管理局标准。在该质量标准中制定了以下内容。I)取本品15g，研细，置锥形瓶中，加甲醇20ml，振摇30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2)取本品10g，研细，加乙醚40ml，低温回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品，对照品加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取供试品溶液15 μ 1、对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100°C烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。3)取本品15g，研细，加甲醇40ml，加热回流I小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加盐酸2ml，置水浴上加热30分钟后，冷却，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10mL，合并乙酸乙酯液，置水浴上浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材0.4g，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品，加乙酸乙酯制成每Iml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取供试品溶液10 μ 1、对照药材溶液5 μ 1、对照品溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。4)检查:应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2010年版一部附录I C)。5)含量测定:色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(48:52:1)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的黄芩苷对照品10mg，置IOOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置IOml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每Iml含黄芩苷0.05mg)。供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，研细，混匀，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流I小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每袋含黄芩苷(C21H18O11)不得少于50.0mg0
上述质量标准存在着比较严重的缺陷:首先，该标准对于主要药物有效成分含量的定量测定数量较少；其次，50%以上的组成药物未进行化学鉴别。中药制剂质量稳定、可控和具有生产可重复性是药物具有药理和临床结果可重复性的前提保证，中药质量能否得到控制以及中药质量标准是否科学化，是影响中药产业化的重要制约因素。质量可控性是药品评价的重要指标，质量标准则是药品质量可控性的具体体现。

发明内容
本发明的目的是提供一种上述扶正固本颗粒的质量控制方法，以确保生产的药品质量稳定可控。本发明提供的扶正固本颗粒的质量控制方法适合于由以下原料药制备而成的药物:黄芩、女贞子、淫羊藿、何首乌、地黄、黄精、茜草、人参。所述质量控制方法包括鉴别方法和含量测定方法。其中，所述鉴别方法包括如下鉴别:
1)取所述药物15g，研细，加甲醇20ml，振摇30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=5:3:1:1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
2)取所述药物10g，研细，加乙醚40ml，低温回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取齐墩果酸对照品，加乙醇制成Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15 μ 1、对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷:丙酮:乙酸乙酯=5:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
3)取所述药物15g，研细，加甲醇40ml，加热回流I小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加盐酸2ml，置水浴上加热30分钟，冷却，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取何首乌对照药材0.4g，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品，加乙酸乙酯制成每Iml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 μ 1、对照药材溶液5 μ 1、对照品溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯:乙酸乙酯:甲酸=15:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；
4)取所述药物15g，研细，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，通过内径2cm、柱高12cm的DlOl型大孔吸附树脂柱，用水IOOml洗脱，弃去水洗液，再用50%乙醇IOOml洗脱，弃去50%乙醇洗脱液，继用乙醇IOOml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液15 μ 1、对照药材8 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水=14:6:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显示相同的绿色荧光斑点；
5)取所述药物30g，研细，加甲醇40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取茜草对照药材0.5g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；再取大叶茜草素对照品，加甲醇制成每ImL含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液20 μ 1、对照药材5 μ 1、对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以60-90°C石油醚:丙酮=12:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显示相同的绿色荧光斑点。所述含量测定方法包括黄芩苷含量、淫羊藿苷含量和大黄素含量的测定。本发明具体以下述高效液相色谱法测定所述黄芩苷的含量:
1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水:冰醋酸=48:52:1为流动相；检测波长280nm ;理论板数按黄芩苷峰计算不低于2000 ；
2)对照品溶液的制备:取黄芩苷对照品，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含50μg的对照品溶液；
3)供试品溶液的制备:取所述药物，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，加热回流I小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得；
4)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明具体以下述高效液相色谱法测定所述淫羊藿苷的含量:
1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相Α，0.2%磷酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长270nm ;理论板数按淫羊藿苷峰计算不低于1500 ；
权利要求
1.扶正固本颗粒的质量控制方法，所述扶正固本颗粒是由以下原料药制备而成的药物:黄芩、女贞子、淫羊藿、何首乌、地黄、黄精、茜草、人参，所述质量控制方法中的鉴别方法包括如下鉴别: 1)取所述药物15g，研细，加甲醇20ml，振摇30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=5:3:1:1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 2)取所述药物10g，研细，加乙醚40ml，低温回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取齐墩果酸对照品，加乙醇制成Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15 μ 1、对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷:丙酮:乙酸乙酯=5:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清 晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 3)取所述药物15g，研细，加甲醇40ml，加热回流I小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加盐酸2ml，置水浴上加热30分钟，冷却，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取何首乌对照药材0.4g，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品，加乙酸乙酯制成每Iml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 μ 1、对照药材溶液5 μ 1、对照品溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯:乙酸乙酯:甲酸=15:2:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点； 其特征在于所述质量控制方法中的鉴别方法还包括如下鉴别: 4)取所述药物15g，研细，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水IOml使溶解，通过内径2cm、柱高12cm的DlOl型大孔吸附树脂柱，用水IOOml洗脱，弃去水洗液，再用50%乙醇IOOml洗脱，弃去50%乙醇洗脱液，继用乙醇IOOml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液15 μ 1、对照药材8 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:甲醇:水=14:6:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显示相同的绿色荧光斑点； 5)取所述药物30g，研细，加甲醇40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取茜草对照药材0.5g，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；再取大叶茜草素对照品，加甲醇制成每ImL含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液20 μ 1、对照药材5 μ 1、对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶H薄层板上，以60-90°C石油醚:丙酮=12:1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显示相同的绿色荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的扶正固本颗粒的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法中的含量测定方法包括黄芩苷含量、淫羊藿苷含量和大黄素含量的测定。
3.根据权利要求2所述的扶正固本颗粒的质量控制方法，其特征在于以下述高效液相色谱法测定所述黄芩苷的含量: 1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水:冰醋酸=48:52:1为流动相；检测波长280nm ;理论板数按黄芩苷峰计算不低于2000 ； 2)对照品溶液的制备:取黄芩苷对照品，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含50μg的对照品溶液； 3)供试品溶液的制备:取所述药物，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，加热回流I小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得； 4)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。
4.根据权利要求2所述的扶正固本颗粒的质量控制方法，其特征在于以下述高效液相色谱法测定所述淫羊藿苷的含量: 1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相Α，0.2%磷酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长270nm ;理论板数按淫羊藿苷峰计算不低于1500 ；
5.根据权利要求2所述的扶正固本颗粒的质量控制方法，其特征在于以下述高效液相色谱法测定所述大黄素的含量: 1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:0.2%磷酸=84:16为流动相；检测波长437nm ;理论板数按大黄素峰计算不低于2000 ； 2)对照品溶液的制备:取大黄素对照品，精密称定，加甲醇制成每Iml含2.5μ g的对照品溶液； 3)供试品溶液的制备:取所述药物，研细，取15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液25ml，蒸干，残渣加30%乙醇20ml使溶解，再加盐酸2ml，摇匀，置80°C水浴加热I小时，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取3次，每次15ml，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇定容于5ml量瓶中，摇匀，用0.45 μ m微孔滤膜滤过，取滤液，即得; 4)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
本发明公开了扶正固本颗粒的质量控制方法，分别以薄层色谱法鉴别药物中的黄芩、女贞子、何首乌、淫羊藿和茜草，以液相色谱法测定药物中的黄芩苷、淫羊藿苷和大黄素含量。本发明建立的质量控制方法中，药材鉴别方法成熟可行，专属性强，阴性无干扰，含量测定方法操作容易，精密度高，重现性好，使用本发明的质量控制方法能够精确、稳定地控制药物的质量，以适应药物的工业化稳定生产。
文档编号G01N30/02GK103197026SQ20131011067
公开日2013年7月10日 申请日期2013年4月1日 优先权日2013年4月1日
发明者王六贵, 吕建英 申请人:山西振东开元制药有限公司