专利名称：蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒的制作方法
蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒技术领域
本发明属于食品快速检测领域，具体涉及一种向鲜奶、液体奶制品及奶粉中掺入假蛋白质尿素和铵盐的快速检测试剂盒。
背景技术：
蛋白质食品营养的重要指标，由两性氨基酸通过肽键键合连接，其主要组成元素为C、H、0、N、S，蛋白质种类虽多，但其含氮量比较接近，平均为16%。乳中加入尿素等含氮物质，能提高非蛋白氮的含量，造成蛋白质增多的假象，并可提高比重，掺尿素等含氮物质不仅影响成品奶的口感和风味，改变牛奶的溶解度，还会损害消费者的身体健康，甚至造成中毒。饲料是发展畜牧业的物质基础，饲料中所含的营养物质及有害物质直接影响畜禽产品的质量，进而影响人类健康。
众所周知，凯氏定氮法是测定总有机氮的经典方法，具有适用性强、重复性好的优点。但是对食品中蛋白质的评价有一定的局限，此方法测定包括非蛋白质氮，造假者正是利用蛋白质测定方法的局限性进行造假，掺入尿素、铵盐等含氮物质，提高产品中“蛋白质”含量。无论是掺入尿素还是铵盐，对样品蛋白质含量的影响都很明显，掺入尿素和铵盐含量越高，对蛋白质测定结果影响越大，每掺入1%的尿素，蛋白质测定量平均增加2.7% ;每掺入1%的硝酸铵，蛋白质测定量平均增加1.34%。目前，虽然有尿素、铵盐等含氮物质检测发文献报道，但是还没有快速检测试剂盒。发明内容
本发明提供一种操作简单、适用于现场半定量地检测鲜奶及奶粉等中掺入假蛋白质尿素和铵盐的试剂盒。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是:
I)取2ml多份液体奶或奶粉溶解液，分别向每份空白液体奶或奶粉溶解液中掺入不同浓度的尿素和铵盐，制成含尿素和铵盐浓度梯增的样品。
2)向该含尿素浓度梯增的样品中加入10滴0.05%亚硝酸钠和10滴浓硫酸，反应3min，泡沫消失后加一小勺(0.3g)格里试剂，放置lOmin，观察颜色变化。根据显现的不同颜色将鲜奶样品中尿素含量与颜色相对应，制备成比色卡。
3)向该含铵盐浓度梯增的样品中加入碘化汞钾试剂3滴，放置约10s，观察颜色变化。根据显现的不同颜色将鲜奶样品中铵盐含量与颜色相对应，制备成比色卡。
4)取待测样品，按照上述步骤2和3进行检测，将反应的显色结果与步骤2和3中制备的比色卡比对，得到样品中掺入尿素和铵盐的含量范围。
蛋白质掺伪快速检测试剂盒，包括:
A试剂:格里斯试剂
B试剂:0.05%亚硝酸钠
C试剂:硫酸
D试剂:碱性碘化汞试剂
掺尿素比色卡
掺铵盐比色卡
所述试剂盒还包括试剂盒类产品常配的塑料吸管，玻璃比色管，小药勺，奶粉取样勺等。
本发明优点在于:
1.弥补了市场上该类产品的空白。
2.显色色阶明显，视觉直观效果好，灵敏度好。
3.操作简单，快速，适合在质检、工商、市场监督等部门推广应用。
具体实施方式
检测液的配制
A试剂:格里斯试剂酒石酸89g、对氨基苯磺酸10g、a_萘胺Ig混合研磨均匀
B试剂:0.05%亚硝酸钠
C试剂:硫酸
D试剂:碱性碘化汞试剂碘化汞22.7g及碘化钾17.5g溶于50ml蒸馏水中，取氢氧化钾56g溶于250ml水中，将上述两种溶液合并，定容至500ml。
试剂盒操作步骤
样品前处理:如果是奶粉或豆奶粉等固体样品，用奶粉取样勺取一勺样品(约2克)，放入比色管中，加入5ml水，充分振摇，全部溶解，溶解液备用。如果是鲜奶或其他液体奶样品，不需要前处理。
1.直接取2ml液体奶或奶粉溶解液于玻璃比色管中，加10滴B试剂和10滴C试齐U，反应3min,泡沫消失后加一小勺(0.3g)A试剂,反应IOmin,观察颜色变化。
2.将显色结果与掺尿素比色卡比对，确定样品中掺入尿素的含量范围。
3.直接取2ml液体奶或奶粉溶液于玻璃比色管中，慢慢加入碘化汞钾试剂3滴，放置约10s，观察颜色变化。
4.将显色结果与掺铵盐比色卡比对，确定样品中掺入铵盐的含量范围。
权利要求
1.一种蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒，其特征在于:鲜奶、液体奶制品及奶粉中经常掺入尿素和铵盐以用来做“假蛋白质”，根据尿素影响亚硝酸盐与格里斯试剂发生偶氮反应，铵盐与碘化汞钾在碱性溶液中生成棕黄色络合物的原理，向样品中分别加入A、B、C试剂和D试剂，化学反应后，将显色结果与本试剂盒制作的掺尿素比色卡和掺铵盐比色卡比对，确定样品中掺入尿素和铵盐的含量范围。
2.如权利要求1所述的蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒，其特征在于:所述的A试剂为格里斯试剂。
3.如权利要求1所述的蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒，其特征在于:所述的B试剂为0.05%亚硝酸钠。
4.如权利要求1所述的蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒，其特征在于:所述的C试剂为硫酸。
5.如权利要求1所述的蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒，其特征在于:所述的D试剂为碱性碘化汞试剂。
6.如权利要求1所述的蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒，其特征在于:还包括掺尿素比色卡、掺铵盐比色卡、塑料吸管、玻璃比色管、小药勺、奶粉取样勺。
7.如权利要求1所述的蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒的使用方法: 样品前处理:如果是奶粉或豆奶粉等固体样品，用奶粉取样勺取一勺样品(约2克)，放入比色管中，加入5ml水，充分振摇，全部溶解，溶解液备用。如果是鲜奶或其他液体奶样品，不需要前处理。
1)直接取2ml液体奶或奶粉溶解液于玻璃比色管中，加10滴B试剂和10滴C试剂，反应3min,泡沫消失后加一小勺(0.3g)A试剂,反应IOmin,观察颜色变化。
2)将显色结果与掺尿素比色卡比对，确定样品中掺入尿素的含量范围。
3)直接取2ml液体奶或奶粉溶液于玻璃比色管中，慢慢加入碘化汞钾试剂3滴，放置约10s，观察颜色变化。
4)将显色结果与掺铵盐比色卡比对，确定样品中掺入铵盐的含量范围。
全文摘要
本发明公开了一种蛋白质掺伪现场快速检测试剂盒，检测鲜奶、液体奶制品及奶粉中掺入尿素或铵盐“假蛋白质”，属于食品快速检测领域。向液体奶或奶粉溶解液中加A、B、C、D试剂，化学反应后，将显色结果与掺尿素比色卡和掺铵盐比色卡比对，确定样品中掺入尿素和铵盐的含量范围，本试剂盒成本低、操作步骤简单、显色效果好，检测下限均为0.05％，适用于现场进行定性半定量检测。
文档编号G01N21/78GK103149205SQ201310062758
公开日2013年6月12日 申请日期2013年2月7日 优先权日2013年2月7日
发明者方邢有, 路东琪, 马青, 邵秋荣, 丁晓 申请人:顺德出入境检验检疫局