专利名称：Trpc蛋白亚型联合检测判断卵巢癌预后的方法
技术领域：
本检测方法可应用于卵巢癌病人手术后预后的评判。对于选择手术后的辅助性治 疗有提示作用。
2.
背景技术：
卵巢癌是一种严重威胁女性健康的杀手，因为早期缺乏典型症状，直至出现肿瘤 转移出现相关症状才被发现，病死率高。大部分患者需要进行手术治疗，手术标本经常规病 理诊断得到组织学类型和分级指标，再结合临床分期指标进行预后的判断，操作上复杂，而 且准确性不高。为了更加准确的评判卵巢癌病人的危险度，利于合理使用辅助治疗和随诊 周期的确定，需要新的预后评判指标。TRPC是一类细胞膜表面的离子通道，它的表达量与功能与细胞的活性状态有较强 的相关性。与多种肿瘤的发生和发展有关，例如Sydorenko V发现淋巴结转移的前列腺癌 细胞株中TRPCl和TRPC3表达增高并与肿瘤的增殖有关。El Hiani Y等发现乳腺癌细胞株 中TRPCl和TRPC6表达增高。Aydar E等研究乳腺癌结果显示，癌组织表达TRPC3和TRPC6 高于正常对照组织，转移率低的细胞株只表达TRPC3而高转移率的细胞株表达TRPC3和 TRPC6，两者在细胞内结合在一起，TRPC6的激活剂可以抑制肿瘤细胞增殖并杀灭细胞，而抑 制TRPC6则只抑制细胞增殖而不能杀灭细胞。Cai R等研究胃癌显示TRPC6表达增高，使用 TRPC的抑制剂SKF96365则可以抑制细胞周期于G2/M期并抑制体内成瘤性。同样在食管 鳞癌的研究也提示了 TRPC6参与细胞周期的G2期跨越。Beck B等发现TRPCl和TRPC4与 鳞状上皮的分化有关，这与基底细胞癌的发生有关。Yang SL在卵巢癌细胞株中发现TRPC3 表达增高，抑制TRPC3的表达可以抑制细胞增殖，阻止细胞周期的M期通过；并抑制体内成 瘤。TRPC在肿瘤局部神经系统的分布还与肿瘤性疼痛有关。目前申请者也发现TRPC1、3、 6、7等在不同级别的卵巢癌中表达不同(见附图1-4)。就目前的肿瘤研究发现，肿瘤细胞与正常细胞相比，往往出现多种基因和蛋白呈 系统性的改变。正如TRPC离子通道蛋白各种亚型是相互关联起作用的，因此，单一的TRPC 亚型检测不能全面反映肿瘤细胞的状态。因此，本发明是将TRPC各亚型联合检测，并采用 数学建模，在模型的基础上，判断卵巢癌患者的预后。
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发明内容
本发明目的在于用联合检测卵巢癌组织中TRPC各亚型的表达强度，配合数学模 型进行卵巢癌病人预后的较准确的评价。
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图ITRPCl在不同恶性程度的肿瘤中表达的实例图2TRPC3在不同恶性程度的肿瘤中表达的实例图3TRPC6在不同恶性程度的肿瘤中表达的实例
图4TRPC7在不同恶性程度的肿瘤中表达的实例图5结果评判的人机对话软件的操作界面
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具体实施例方式本发明是这样实现的1)征得病人或病人家属同意，采集不同地区、不同医院的卵巢癌组织标本和临床 病史资料。标本进行免疫组织化学染色，标记TRPC1、3、4、5、6、7六种亚型。显微镜观察表 达强度，进行评级。所得评级与临床指标、病理指标以及病人预后进行多重线性回归模型建 立数学模型，并制作相关计算软件；2)在此基础上，手术病人的标本送检病理科化验时，除进行常规的病理检查，再进 行TRPC1、3、4、5、6、7六种TRPC亚型的免疫组织化学染色(采用指定的公司抗体、指定的浓 度和一定的操作流程)；3)染色完毕的切片在显微镜高倍镜下随机选择5个肿瘤组织视野进行染色强度 的评判，判断结果取平均值；4)六种TRPC亚型的相关值输入软件(附图幻，得出与预后相关的提示。
权利要求
1.一种对上皮性卵巢癌病人预后和后续治疗效果评判的有效方法。
2.如权利要求1的方法，对于卵巢癌病人手术切取的手术标本，采用免疫组织化学方 法对标本进行TRPCl，TRPC3，TRPC4, TRPC5, TRPC6, TRPC7六种TRPC亚型蛋白的染色。染色 结果采用显微镜高倍镜随机选择5个肿瘤组织部分进行染色强度的评判，按0、1、2、3和4 进行评分，取平均值。
3.将上述染色值代入特定公式，计算得出与预后相关的参数，对病人的术后情况进行 评估。
4.如权利要求2的方法，TRPC各亚型的检测抗体选自特定公司的产品，并按照特定的 浓度进行稀释使用。
5.如权利要求3的方法，计算公式来源于对已知病人预后的卵巢癌组织标本进行联合 检测的数据采用多重线性回归模型等统计学处理后得到数学模型。
6.如权利要求5的方法，将数学模型编程，该软件具有良好的人机对话界面，方便医师 操作。
7.如权利要求5的方法，卵巢癌病人的标本采集自上海、河南以及广东多家医院，从而 保证该方法地域局限小。
全文摘要
本发明涉及一种应用于卵巢癌病人手术后预后的评判的方法。针对卵巢癌病人死亡率高、现有的预后评价体系繁琐且不够准确，本发明的特征在于在卵巢癌病人手术标本上，采用免疫组织化学的方法，联合检测TRPC各蛋白亚型的表达强度，采用友好的人机对话软件对数值进行处理，得出较为准确的卵巢癌预后评价。
文档编号G01N33/68GK102128933SQ20101002286
公开日2011年7月20日 申请日期2010年1月15日 优先权日2010年1月15日
发明者陶祥 申请人:陶祥