专利名称：尿液中锌含量的测定方法
技术领域：
本发明属于尿液的测试方法，具体涉及一种尿液中锌含量的测定方法。
微量元素锌是维护机体正常免疫功能及保持机体防御机制完整性所必需的物质，对人的生长和性的发育，调节淋巴细胞功能等方面发挥重要作用。锌的缺乏会造成蛋白质、脂肪、糖和核酸等的合成障碍，影响人的生长发育；会造成食欲低下，伤口不易愈合，脱发及口腔溃疡等病症；孕妇孕期锌营养不良，可造成胎儿先天畸形。锌还是许多酶的组成部分，许多二肽酶和氨肽酶靠锌来激活。因此，准确测定人体锌代谢水平，对于诊断、治疗疾病，改善人体锌代谢水平，促进生长发育，恢复健康，增强体质极为重要。然而，尽管人们对人体锌的研究已有30多年的历史，但至今仍未找到一种公认的准确、灵敏反映人体锌营养状况的指标。
迄今，大多通过测试头发或血清(血浆)中的锌含量来推知人体锌代谢水平是否正常。
发锌检测法，虽毛发取材容易，但测试设备原子分光光度仪比较昂贵，不易推广，而且，由于毛发易受环境污染，但尚无一种公认的可靠的洗涤方法，会影响测试结果，更为重要的是，当人体缺锌时，影响体内蛋白质的合成，使毛发生长减慢，发锌含量反而增高，显然，发锌的含量不能准确反映人体锌含量水平。
血锌检测法，虽比较简单，但血清或血浆中锌浓度易受各种生理(如膳食、妊娠等)、病理(如应激、肝肾疾病等)的影响，而且，当人体缺锌时，组织分解增强，细胞内的锌可释放入循环，血锌含量增高，影响测试结果，所以，血锌法测试结果也不能准确反映人体锌含量水平。
相反，当人体缺锌时，机体会保护性地减少锌的排泄以维持体内锌的平衡，即排泄尿液中的锌含量能准确反映体内相应的锌代谢水平。
本发明的目的在于提供一种能准确反映体内锌代谢水平的尿液中锌含量的测定方法。
本发明的尿液中锌含量的测定方法，其特征在于按以下步骤进行1) 在比色管中加入一定量的尿液，2) 加入A液调节尿液的PH值至7.5-10，3) 加入过量B液，与尿液中的锌络合生成络合物，4) 边摇动比色管、边加入C液，混匀，直至络合物沉淀全部溶解，5)用72型分光光度计，550nM处比色，通过标准曲线查得尿液中锌的浓度，所述的A液是碱性溶液，所述的B液是1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(简称PAN)，
所述的C液是溶解Zn-PAN络合物的有机溶剂或非离子表面活性剂。
所述的碱性溶液，最好选用氨缓冲液或氨水。
所述的过量B液，是指加入的B液的量足以使尿液中的锌离子全部生成Zn-PAN络合物。
Zn离子与B液1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(简称PAN)反应生成的络合物，可溶于氯仿、四氯化碳等有机溶剂中，从而通过比色，测定锌的含量，或在非离子性表面活性剂，例如异辛基苯氧基聚乙氧基乙醇(简称Triton X 100)的增溶作用下，Zn-PAN络合物可溶于水中，显橙红色，其吸收峰在550nM波长处，摩尔吸光系数ε550＝5.6×104，操作十分方便，可以在较大量的Ca、Mg、K、Na、Ci、Po等元素存在下测定微量锌，这些共存元素不会干扰锌的测定而影响测定结果。
在实际测定过程中，在加入A液调节尿液PH值后，也可以先加入C液，后加B液。
Z标准曲线的绘制称取纯锌0.1000克，溶于少量的盐酸中，以蒸馏水多次稀释配制成锌浓度为20M的标准溶液；取5毫升比色管5支，分别加入上述20μM的锌标准溶液0.0，0.5，1.0，2.0，2.5毫升；加入A液1毫升；
加入B液0.2％PAN酒精溶液0.25毫升；加入C液20％ Triton X 100 0.2毫升，混匀；加入蒸馏水至刻度；用空白管调零，550nM光密度比色，依此绘制锌浓度标准曲线。
与现有的发锌或血锌检测法相比，本发明的尿液中锌含量的测定方法，不仅尿液取样容易，也避免了抽血给人造成的痛苦及危害，更为重要的是尿锌法所测的锌浓度能准确反映人体的锌代谢水平，且灵敏度高，重复性好，易于动态观察、早期判断体内锌含量水平的变化，以便及时诊断和治疗。
实施例取5毫升比色管5支，分别加入随机尿液各2.5毫升，加入1.5毫升氨缓冲液调节PH值至8，加入0.2毫升20％Triton X 100溶液，混匀；再加入0.25毫升0.1％PAN溶液，混匀；加入蒸馏水至刻度；用空白管调零于550nM波长处，以试剂空白为参比，测定其吸光度，从标准曲线上查得各试样的含锌量，各试样的尿锌浓度分别为2.8，5.0，7.8，9.7，13.5μM，均在正常范围(2.3-18.4μM)之内。
权利要求
1.一种尿液中锌含量的测定方法，其特征在于按以下步骤进行1) 在比色管中加入一定量的尿液，2) 加入A液调节尿液的PH值至7.5-10，3) 加入过量B液，与尿液中的锌络合生成络合物，4) 边摇动比色管、边加入C液，混匀，直至络合物沉淀全部溶解，5) 用72型分光光度计，550nM处比色，通过标准曲线查得尿液中锌的浓度，所述的A液是碱性溶液，所述的B液是1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚，所述的C液是溶解Zn-PAN络合物的有机溶剂或非离子表面活性剂。
2.如权利要求1所述的尿液中锌含量的测定方法，其特征在于所述的碱性溶液是氨缓冲液，所述的有机溶剂是氯仿或四氯化碳，所述的非离子表面活性剂是Triton X 100。
全文摘要
尿液中锌含量的测定方法，是在比色管中先后加入尿液，氨缓冲液，PAN液，Triton X 100液，蒸馏水，混匀，用分光光度计，在550nM处比色，通过标准曲线查得尿液中锌的浓度。与发锌或血锌法相比，本法不仅尿液取样容易，也避免了抽血给人造成的痛苦及危害，特别是尿锌法所测的锌浓度能准确反映人体的锌代谢水平，且灵敏度高，重复性好，易于动态观察、早期判断体内锌含量水平的变化，以便及时诊断和治疗。
文档编号G01N21/75GK1137117SQ95106238
公开日1996年12月4日 申请日期1995年5月29日 优先权日1995年5月29日
发明者朱建安 申请人:朱建安