专利名称：一种无边缘效应的96孔酶标板的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及生物学中酶联免疫实验使用的酶标板，尤其是一种无边缘效应的96孔酶标板。
背景技术：
目前，在生物学中酶联免疫实验使用的酶标板，在酶联免疫实验的过程中，经常会
发生边缘效应，酶联免疫检测(ELISA)中的边缘效应是指在使用96孔酶标板检测样品时，
周边孔的数值总是会高于中间孔的数值，外周孔显色较中心孔深，表现为酶标板读数在均
一的实验条件下外周孔的读数高于中间孔；这种现象在实验中常用的96孔板中十分明显；
而边缘孔的数量占到总数的1/3，这就意味着因为此误差所导致的影响相当巨大。 产生这种"边缘效应"的原因为96孔板周边孔与中心孔表面热力学特征的不同；
但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所；聚苯乙烯本身为不良热导体，
在实验室的常规ELISA测定中，将酶标板从室温(通常在25t:左右)置于37t:温箱，酶标
板也升温时，在外周孔与中心孔之间存在一热力学梯度；酶标板上产生的温度差影响被包
被物(如抗原或抗体等)与酶标板的结合以及抗原、二抗或酶标记抗体与被包被物结合的
效率，造成温育时间的相对不平衡，从而产生外周孔显色较中心孔深的现象。 为了避免边缘效应可以采取一些方法，如尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水
面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部
直接与37t:水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与
温室平衡；也有使用快速法ELISA来消除边缘效应的，但是不是所有的ELISA试验都适用快
速法，有一定的局限性；另外还可以借助一种分窗数字显时自动酶免孵育仪来减轻频繁开
启温育箱门引起的温度波动从而减弱边缘效应；但因此也就提高了试验的条件和对试验器
材的要求，增加了试验的繁琐程度。 导致目前常规的96孔酶标板产生边缘效应的原因是目前应用的96孔酶标板外圈的孔侧壁直接与外界接触，对温度非常敏感，从而在温度波动很大时不能调控抗原抗体反应的温度；而内侧的孔由于仅从底部接触外界，免疫反应的条件就很均匀；因此如果能够在外侧孔的侧面设计结构使其仅从底部感受外界温度变化，将会避免边缘效应的产生。

发明内容本实用新型的发明目的是提供了一种酶标板，该酶标板是通过改变原有96孔板的结构，在最外侧孔的外侧设计了不同宽度及厚度的槽形结构，达到最大程度消除边缘效应的目的，同时又保证了酶联免疫实验的最佳状态；为了实现上述目的，本实用新型是这样实现的一种酶标板，是由上盖、酶标板和酶标板孔组成；其特征在于酶标板上有96个酶标板孔，酶标板孔为8X12分布，每个孔为大小、形状均相等的正圆形或方形，底端封闭，上端敞开便于培养液加入，周边有侧壁围绕孔的周围；酶标板孔的高度稍高于侧壁形成的平面；在最外一圈孔与酶标板侧围之间存在槽的结构；上盖平坦，与酶标板上面孔形成的
3平面平行，有裙边，与酶标板之间存在缝隙，间距为0. l-2mm ;孔的分布为矩阵形，每个孔的
中心距相等，距离为0. 5-2cm ;酶标板；其中酶标板上最外一圈酶标板孔与酶标板侧围之
间存在间隔，距离为12孔长边侧l-4mm，8孔短边侧2-6mm ;在酶标板上最外一圈酶标板孔 与酶标板侧围之间存在槽结构，该槽结构为四周连通的，四边可以设计有一条或多条的槽， 或者四个转角处相连通的槽，槽的高度为0-15mm，将孔与外界从底部隔开；其中槽的宽度 为12孔长边侧0. 5-3. 5mm，8孔短边侧0. 5-5. 5mm，槽的内径为12孔长边侧0-3. 5mm，8孔 短边侧0-5. 5mm，可以是实心槽，其长度覆盖周边所有的孔；槽可拆卸，或者与酶标板为一 体，槽可以是上端敞开的，或者上端封闭，在一处或多处有孔与外界连通；由于槽的结构使 内外隔绝了热交换，因此可以达到最大程度消除边缘效应的目的，同时又保证了酶联免疫 实验的最佳状态。

附图为一种薄底的酶标板简单示意图。
具体实施方式
以下结合附图对本实用新型做进一步的说明 —种96孔酶标板，是由上盖、酶标板和酶标板孔组成；其特征在于酶标板上 有96个酶标板孔，酶标板孔为8X 12分布，每个孔为大小、形状均相等的正圆形或方形，底 端封闭，上端敞开便于培养液加入，周边有侧壁围绕孔的周围；酶标板孔的高度稍高于侧 壁形成的平面；在最外一圈孔与酶标板侧围之间存在槽的结构；上盖平坦，与酶标板上面 孔形成的平面平行，有裙边，与酶标板之间存在缝隙，间距为O. l-2mm;孔的分布为矩阵形，
每个孔的中心距相等，距离为0. 5-2cm ;酶标板；其中酶标板上最外一圈酶标板孔与酶标
板侧围之间存在间隔，距离为12孔长边侧l-4mm，8孔短边侧2-6mm ;在酶标板上最外一 圈酶标板孔与酶标板侧围之间存在槽结构，该槽结构为四周连通的，四边可以设计有一条 或多条的槽，或者四个转角处相连通的槽，槽的高度为0-15mm，将孔与外界从底部隔开；其 中槽的宽度为:12孔长边侧0. 5-3. 5mm，8孔短边侧0. 5-5. 5mm，槽的内径为:12孔长边侧 0-3. 5mm，8孔短边侧0_5. 5mm，可以是实心槽，其长度覆盖周边所有的孔；槽可拆卸，或者与 酶标板为一体，槽可以是上端敞开的，或者上端封闭，在一处或多处有孔与外界连通。
权利要求无边缘效应的96孔酶标板，是由上盖、酶标板和酶标板孔组成；其特征是孔呈8×12矩阵分布，每个孔为大小、形状均相等的正圆形或方形，底端封闭，上端敞开便于培养液加入，周边有侧壁围绕孔的周围；酶标板孔的高度稍高于侧壁形成的平面；在最外一圈孔与酶标板侧围之间存在槽的结构。
2. 根据权利要求1所述的无边缘效应的96孔酶标板，其特征是上盖平坦，与酶标板上面孔形成的平面平行，有裙边，与酶标板之间存在缝隙，间距为0. l-2mm。
3. 根据权利要求1所述的无边缘效应的96孔酶标板，其特征是孔的分布为矩阵形，每个孔的中心距相等，距离为0. 5-2cm ;酶标板上最外一圈酶标板孔与酶标板侧围之间存在间隔，距离为12孔长边侧l-4mm，8孔短边侧2-6mm ;
4. 根据权利要求1所述的无边缘效应的96孔酶标板，其特征是该槽为四周连通的，或者四边各有一条或多条的槽，或者四个转角处相连通的槽，槽的高度为10-15mm，将孔与外界从底部隔开；槽的宽度为12孔长边侧0. 5-3. 5mm，8孔短边侧0. 5-5. 5mm，槽的内径为12孔长边侧1-3. 5mm，8孔短边侧1_5. 5mm。
5. 根据权利要求1所述的无边缘效应的96孔酶标板，其特征是槽可以是实心的，其长度覆盖周边所有的孔。
6. 根据权利要求1所述的无边缘效应的96孔酶标板，其特征是槽可拆卸，或者与酶标板为一体；槽可以是上端敞开的，或者上端封闭，在一处或多处有孔与外界连通。
专利摘要本实用新型涉及生物学中酶联免疫使用的酶标板，尤其是一种无边缘效应的96孔酶标板，是由上盖、酶标板和酶标板孔组成；其特征在于酶标板上有96个酶标板孔，酶标板孔为8×12分布，每个孔为大小、形状均相等的正圆形或方形，底端封闭，上端敞开便于培养液加入，周边有侧壁围绕孔的周围；酶标板孔的高度稍高于侧壁形成的平面；在最外一圈孔与酶标板侧围之间存在槽的结构；上盖平坦，与酶标板上面孔形成的平面平行，有裙边，与酶标板之间存在缝隙；孔的分布为矩阵形，每个孔的中心距相等；其中在96孔酶标板的外周孔的外侧增加了新的槽结构，这种结构可以在ELISA实验时减少内、外孔之间的热动力不平衡问题，使数据均一性提高，从而消除边缘效应，减少实验系统误差。
文档编号G01N33/543GK201464474SQ20092011040
公开日2010年5月12日 申请日期2009年7月24日 优先权日2009年7月24日
发明者张 杰 申请人:无锡耐思生物科技有限公司