专利名称：七叶皂苷四种单体组分的高效液相色谱分离方法
技术领域：
本发明属于混合物的分离技术领域，涉及一种七叶皂苷la、七叶皂苷lb、异七 叶皂苷Ia和异七叶皂苷Ib的高效液相色谱分离方法。
背景技术：
七叶皂苷是从七叶树的干燥种子中提取得到的一组三萜皂苷类化合物的混合 物，由于其具有抗炎、抗水肿及静脉保护作用，并且具有很好的耐受性，因而临床上广 泛用于慢性静脉功能不全、痣和手术后水肿的治疗。七叶皂苷中含有很多种皂苷化合 物，七叶皂苷la、七叶皂苷Ib和异七叶皂苷la、异七叶皂苷Ib是其中四种主要活性成 分。它们互为同分异构体(见下图)，七叶皂苷la、七叶皂苷Ib的主要区别在于C21位羟 基上成酯的有机酸的不同，分别为巴豆油酸和当归酸，异七叶皂苷la、异七叶皂苷Ib分 别是七叶皂苷la、七叶皂苷Ib的C22位乙酰基转移到C28位羟基上的异构体。这四种七 叶皂苷单体组分分别属于两种类型，七叶皂苷la、七叶皂苷Ib为β-七叶皂苷，异七叶 皂苷la、异七叶皂苷Ib为α-七叶皂苷，这两种类型七叶皂苷的熔点、比旋度、溶血指
数和水溶解度均有明显不同。
权利要求
1.一种七叶皂苷四种单体组分的高效液相色谱分离方法，所述的四种单体组分是七 叶皂苷la、七叶皂苷lb、异七叶皂苷Ia和异七叶皂苷Ib;分离过程是将配制原料注入定 量环，经色谱柱进行分离，由紫外检测器在线检测，按检测的物质峰分段收集四种单体 组分的分馏液；最后将分馏液分别进行旋转蒸发和干燥处理，得到固态产物；其特征在 于，所述的配制原料，是以七叶皂苷提取物或原料药为原料，用甲醇和水混合溶剂溶 解，其中混合溶剂按体积比甲醇水=4 3；所述的流动相，是以甲醇和体积浓度为0.6%的乙酸水溶液相混合作流动相，其中按 体积比甲醇乙酸水溶液=29 31 19 21 ；流动相的pH = 2.0 3.0 ；所述的色谱柱，使用C18色谱柱，粒径5μιη。
2.按照权利要求1所述的七叶皂苷四种单体组分的高效液相色谱分离方法，其特征在 于，所述的色谱柱，柱温为室温；所述的流动相，按体积比甲醇乙酸水溶液=3 2； 所述的在线检测物质峰，检测波长为210nm。
3.按照权利要求1或2所述的七叶皂苷四种单体组分的高效液相色谱分离方法，其特 征在于，所述的旋转蒸发，是将收集到的四种单体组分的分馏液分别在减压条件下旋转 蒸发，旋转蒸发仪水浴温度为45°C，真空度为0.08 0.09MPa得到单体组分的浓缩液； 所述的干燥处理，是将旋转蒸发得到的浓缩液氮气吹干或冷冻干燥。
4.按照权利要求1或2所述的七叶皂苷四种单体组分的高效液相色谱分离方法，其特 征在于，所述的配制原料，用0.45 μ m滤膜过滤制得配制原料。
5.—种七叶皂苷四种单体组分的高效液相色谱检测方法，具体的液相条件是色谱 柱为C18柱，5μιη粒径；流动相为乙腈和体积浓度0.04%的三氟乙酸水溶液，乙腈和 三氟乙酸水溶液的体积比为33 37 63 67，流动相pH = 2.0 3.0 ；检测波长为 2IOnm ；进样流速为1.0mL/min，进样量为20 μ L。
全文摘要
本发明的七叶皂苷四种单体组分的高效液相色谱分离方法属于混合物的分离技术领域。以七叶皂苷提取物或原料药为原料，用甲醇和水混合溶剂溶解，采用反相高效液相色潽法，选择流动相的两相体系，可选用的两相体系有甲醇-水、乙腈-水，水相的pH控制在2-3之间；然后选择色谱柱，确定为C18柱；柱温室温；检测波长210nm；最后经旋转蒸发和干燥处理，得到固态的七叶皂苷Ia、七叶皂苷Ib、异七叶皂苷Ia和异七叶皂苷Ib。本发明在分离和后处理过程中都不会发生各单体之间的相互转化，得到的四种产品的纯度均大于99％；产物可以作为七叶皂苷标准品，并广泛用于药剂、药物分析和药理学等研究领域。
文档编号G01N30/02GK102020691SQ20101050600
公开日2011年4月20日 申请日期2010年10月14日 优先权日2010年10月14日
发明者吴秀君, 崔相勇, 张梦亮, 张超, 顾景凯, 高峰 申请人:吉林大学