专利名称：一种总胆固醇比色卡的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种医疗检测仪器，具体涉及一种测定血液中总胆固醇含量的总胆固 醇比色卡。
背景技术：
总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和，人群总胆固醇水平主要取决 于遗传因素和生活方式。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯，肝脏是合成和贮存的主要 器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原 料，也是构成细胞膜的主要成分，其血浆浓度可作为脂代谢的指标。由于许多含有胆固醇的食物中其它的营养成分也很丰富，如果过少，很容易引起 营养平衡失调，导致贫血和其它疾病的发生；过多将导致动脉粥样硬化和冠心病的发生与 发展。国内外专家推荐成人理想胆固醇值为< 5. 20mmol/L,当总胆固醇> 5. 20mmol/L，就 应该开始药物治疗。因此，总胆固醇是临床工作中重要的控制指标，总胆固醇的监测越来越 受到重视。血浆总胆固醇测定是血脂分析的常规项目，目前国内大多数实验室的常用方法有 酶法、硫酸_磷酸_高铁显色法、硫酸_醋酐直接显色法、硫酸_醋酐煮沸显色法及邻苯二 甲醛-硫酸显色法等。人体中2/3胆固醇以酯的形式存在，1/3以游离的形式存在，所以测 定胆固醇的第一步是使胆固醇酯在胆固醇酯化酶(CE)的作用下释放出游离的胆固醇，这 样才能测出总的胆固醇含量。(2)游离的胆固醇在胆固醇氧化酶(CO)的作用下生成过氧化 氢，生成的过氧化氢在过氧化氢酶(HRP)的作用下跟显色剂反应产生颜色的变化，根据颜 色的变化判断总胆固醇值。目前医疗机构自动生化分析仪多采用酶法进行血浆总胆固醇测定，然使用自动生 化分析仪测定，虽然结果准确、重复性好、易于批量测定，但不方便、用血量大(5mL全血)， 且不能达到即时测定，其应用和患者依从性受到一定的限制。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种采用酶法和干化学显色相结合测定血液 中总胆固醇含量的总胆固醇比色卡。本发明解决其技术问题所采取的技术方案是一种总胆固醇比色卡，包括由背衬、 透明层、显色层、过滤层、表面层组成，其特征在于背衬上设有透明层，透明层上设有比透 明层小的显色层，显色层上设有比显色层大的过滤层，过滤层上设有比过滤层大的表面层； 背衬上设有比色观察窗；表面层上设有血液滴加区。为了防水并且使其他各层都可以粘贴在背衬上，所述背衬采用疏水材料，并在表 面覆盖有可粘性的胶。为了透光并且防水，所述透明层采用透明性疏水材料，厚度< 0. 5mm。为了使显色层能够更好的反应出检测之后的颜色，所述显色层的厚度为0. lmnTl.Omm，并含有3，3’，5，5’ -四甲基联苯胺、辣根过氧化物酶、胆固醇氧化酶，其中 3，3，，5，5，-四甲基联苯胺的浓度为20mg/m广50mg/mL、辣根过氧化物酶的浓度为0. 5U/ mL 100U/mL、胆固醇氧化酶0. 5U/mL 50U/mL。为了使过滤层能够充分的过滤血液，所述过滤层为非对称性滤膜，孔径从上到下 为 2. O μ m 0· 2 μ m。为了使蛋白质能够发生反应变为胆固醇，所述过滤层含有胆固醇酯酶，胆固醇酯 酶的浓度为0. 5U/mL 50U/mL。为了防水，所述表面层采用疏水材料。由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点
1.通过酶法和干化学显色反应结合，并配合血液过滤系统，实现了自我、即时、快 速进行总胆固醇半定量检测的效果；2.本发明结构简单，使用方便，成本低廉，符合POCT (point of care testing，即 时检测)的应用趋势。


图1是本发明实施例一的结构示意图；1、背衬2、比色观察窗3、透明层4、显色层5、过滤层6、表面层 7、血液滴加区
具体实施例方式如图1所示一种总胆固醇比色卡，包括由背衬1、透明层3、显色层4、过滤层5、表 面层6组成，背衬1上设有透明层3，透明层3上设有比透明层3小的显色层4，显色层4上 设有比显色层4大的过滤层5，过滤层5上设有比过滤层5大的表面层6 ；背衬1上设有比 色观察窗2 ；表面层6上设有血液滴加区7。背衬1和表面层6均采用疏水材料，在背衬1 表面覆盖有可粘性的胶。透明层3采用透明性疏水材料且其厚度< 0.5mm。显色层4的厚 度为0. ImnTl. 0mm,并含有浓度为20mg/mL 50mg/mL的3，3，，5，5，-四甲基联苯胺、浓度为 0. 5U/m广100U/mL的辣根过氧化物酶、浓度为0. 5U/m广50U/mL的胆固醇氧化酶。过滤层5 为非对称性滤膜，孔径从上到下为2. 0 μ πΓΟ. 2 μ m,并且含有浓度为0. 5U/m广50U/mL的胆 固醇酯酶。本实施例中显色层4 按下表配制溶液，采用0. 3mm的薄层层析试纸浸泡0. 5h，40°C干燥。
成分浓度
⑶(胆固醇氧化酶)50U/ mLHRP (辣根过氧化物酶)2 U/ mL
3, 3’，5，5’ -四甲基联苯胺20mg/mL_
Ig PH7. 0 KPB 溶解_过滤层5
按下表配方配制酶溶液，将聚砜膜蘸取酶溶液，40°C干燥。
成分浓度 使用方法①用采血针将手指刺破，滴一到两滴血到血液滴加区7中，血液涂满血液滴加区 7 ；②等待1分钟，观察比色卡的反面比色观察窗2中显示的颜色，并与标准比色卡对 比，选出最接近的颜色并读取所表示的总胆固醇浓度值。人血清检测结果 观察窗2中显示的颜色根据表中的颜色色号1-12依次加深。
权利要求
一种总胆固醇比色卡，包括由背衬(1)、透明层(3)、显色层(4)、过滤层(5)、表面层(6)组成，其特征在于背衬(1)上设有透明层(3)，透明层(3)上设有比透明层(3)小的显色层(4)，显色层(4)上设有比显色层(4)大的过滤层(5)，过滤层(5)上设有比过滤层(5)大的表面层(6)；背衬(1)上设有比色观察窗(2)；表面层(6)上设有血液滴加区(7)。
2.根据权利要求1所述总胆固醇比色卡，其特征在于所述背衬(1)采用疏水材料，并 在表面覆盖有可粘性的胶。
3.根据权利要求1所述总胆固醇比色卡，其特征在于所述透明层(3)采用透明性疏 水材料，厚度< 0. 5mm。
4.根据权利要求1所述总胆固醇比色卡，其特征在于所述显色层(4)的厚度为 0. lmnTl.Omm，并含有3，3’，5，5’ -四甲基联苯胺、辣根过氧化物酶、胆固醇氧化酶，其中 3，3，，5，5，-四甲基联苯胺的浓度为20mg/m广50mg/mL、辣根过氧化物酶的浓度为0. 5U/ mL 100U/mL、胆固醇氧化酶0. 5U/mL 50U/mL。
5.根据权利要求1所述总胆固醇比色卡，其特征在于所述过滤层(5)为非对称性滤 膜，孔径从上到下为2. 0 ii nTO. 2 u m。
6.根据权利要求1所述总胆固醇比色卡，其特征在于所述过滤层(5)含有胆固醇酯 酶，胆固醇酯酶的浓度为0. 5U/m广50U/mL。
7.根据权利要求1所述总胆固醇比色卡，其特征在于所述表面层(6)采用疏水材料。
全文摘要
本发明涉及一种总胆固醇比色卡，包括由背衬、透明层、显色层、过滤层、表面层组成，其特征在于背衬上设有透明层，透明层上设有比透明层小的显色层，显色层上设有比显色层大的过滤层，过滤层上设有比过滤层大的表面层；背衬上设有比色观察窗；表面层上设有血液滴加区。通过酶法和干化学显色反应结合，并配合血液过滤系统，实现了自我、即时、快速进行总胆固醇半定量检测的效果，结构简单，使用方便，成本低廉，符合POCT(point of care testing，即时检测)的应用趋势。
文档编号G01N21/78GK101865852SQ20101012520
公开日2010年10月20日 申请日期2010年3月16日 优先权日2010年3月16日
发明者徐华良, 肖洁瑾, 邹丽萍, 顾瑜 申请人:苏州市玮琪生物科技有限公司