专利名称:一种快速检测激发子诱导植物抗病性效能的方法
技术领域:
本发明涉及诱导抗病性检测方法,特别是用黄瓜黄化苗为实验材料。
背景技术:
用植物幼苗作为生物材料来对激发子进行检测比较接近农作物的实际生长状态和环境,对其实际应用又较好的指导意义,但是在激发子的筛选和定性研究中周期较长。比如用黄瓜幼苗作实验,从播种到出来实验结果至少需要1个多月时间,其它植物的生长周期就更长了,因此给实验研究带来了很多不便。
前人研究表明,以黄瓜黄化苗为试材,通过喷雾接种黄化子叶方法鉴定黄瓜不同品种抗黑星病,确定该方法与培养绿苗一片真叶期喷雾法比较,同样准确、可靠。同时具有鉴定周期短,不受环境条件影响、接种症状表现明显、易于分级等优点。
发明内容
本发明目的是提供一种快速检测激发子诱导植物抗病性效能的方法,即用以黄瓜黄化苗为实验材料,通过不同激发子处理后接种黑星病菌来检测其诱导抗病效能。
本发明中黄瓜黄化苗植株的培养方法如下首先,黄瓜种子经0.1%的升汞表面消毒后,再用蒸馏水冲洗,在25℃恒温箱中催芽24小时,黄瓜种子发芽后播种于下垫两层纱布的搪瓷盘中(20×30cm),然后在23-25℃恒温箱中黑暗避光条件下培养5天,种壳脱落后用于实验。
本发明中检测激发子诱导植物抗病性效能的方法如下将各种激发子以喷雾法处理上述培养好的黄瓜黄化苗,诱导处理48小时后,用黑星病菌孢子悬液接种黄化苗,4天后观察黄瓜黄化子叶发病情况,以确定各种激发子对诱导植物抗病性的效果。
用上述黄瓜黄化苗植株为试材检测激发子诱导植物抗病性效能,具有实验周期短、不受外界环境条件影响、实验重复性好、接种症状表现明显、易于分级和实验观察等优点。
具体实施例方式
实施例1、选取不同来源的激发子,包括草酸青霉果胶酶提取液、黑曲霉果胶酶提取液、高大毛霉培养滤液、真菌多糖和果胶寡糖,分别以喷雾法诱导处理黄瓜黄化苗植株,同时以喷雾清水的植株作为对照,黄瓜品种为“中农5号”。诱导处理后48h,接种黑星病菌孢子悬液,浓度为2×105个孢子/m1,接种黑星病菌后4天,调查各个处理中黄化子叶发病情况,并计算各激发子的诱导抗病效果,实验结果如表1
表1
各种激发子的使用浓度草酸青霉果胶酶提取液其中内切果胶酶含量100 U/ml黑曲霉果胶酶提取液其中内切果胶酶含量50 U/ml高大毛霉培养滤液其中内切果胶酶含量20 U/ml真菌多糖其中总糖含量0.06%(W/V)果胶寡糖其中总糖0.05%(W/V)实施例2、选取两种中感黄瓜黑星病品种“中农5号”、“中农8号”和两种高感黄瓜黑星病品种“长春密刺”、“新泰密刺”。首先,各品种的黄瓜种子经0.1%的升汞表面消毒后,再用蒸馏水冲洗,在25℃恒温箱中催芽24小时,黄瓜种子发芽后播种于下垫两层纱布的搪瓷盘中(20×30cm),然后在23-25℃恒温箱中黑暗避光条件下培养5天,种壳脱落后用于实验。选用草酸青霉果胶酶提取液作为激发子,以喷雾法处理上述培养好的黄瓜黄化苗,诱导处理48小时后,用黑星病菌孢子悬液接种黄化苗,4天后观察黄瓜黄化子叶发病情况,计算该激发子对不同品种黄瓜的诱导抗病效果,实验结果如表2表2
实验条件激发子浓度其中内切果胶酶含量100 U/ml黑星菌孢子浓度2×105个孢子/ml
权利要求
1.一种快速检测诱导激发子效能的方法,其特征在于,采用黄瓜黄化苗作为实验材料。
2.如权利要求1所述快速检测诱导激发子效能的方法,其特征在于,所述黄瓜黄化苗是在恒温培养箱中黑暗条件下生长的植株。
3.如权利要求1所述快速检测诱导激发子效能的方法,其特征在于,所述黄瓜黄化苗品种为黑星病感病品种。
4.如权利要求1所述快速检测诱导激发子效能的方法,其特征在于,实验所用植物试材的培养方法是,首先,黄瓜种子经0.1%的升汞表面消毒后,再用蒸馏水冲洗,在25℃恒温箱中催芽24小时,黄瓜种子发芽后播种于下垫两层纱布的搪瓷盘中(20×30cm),然后在23-25℃恒温箱中黑暗避光条件下培养5天,种壳脱落后用于实验。
5.如权利要求1所述快速检测诱导激发子效能的方法,其特征在于,激发子诱导抗病效能的检测方法是,首先,将各种激发子以喷雾法处理上述培养好的黄瓜黄化苗,诱导处理48小时后,然后用黑星病菌孢子悬液接种黄化苗,4天后观察黄瓜黄化子叶发病情况,以确定各种激发子对诱导植物抗病性的效果。
全文摘要
本发明提供一种用于快速检测不同激发子诱导植物抗病性效能的方法。本发明使用恒温培养箱中黑暗条件下生长的黄瓜感黑星病品种的黄化苗植株,按下列方法制备和进行实验首先,黄瓜种子经0.1%的升汞表面消毒后,再用蒸馏水冲洗,在25℃恒温箱中催芽24小时,黄瓜种子发芽后播种于下垫两层纱布的搪瓷盘中(20×30cm),然后在23-25℃恒温箱中黑暗避光条件下培养5天,种壳脱落后用于实验。将各种激发子以喷雾法处理上述培养好的黄瓜黄化苗,诱导处理48小时后,用黑星病菌孢子悬液接种黄化苗,4天后观察黄瓜黄化子叶发病情况,以确定各种激发子对诱导植物抗病性的效果。用该方法检测各种激发子的诱导植物抗病活性,实验周期短、不受外界环境条件影响、实验重复性好、接种症状表现明显、易于分级和实验观察等优点。
文档编号G01N33/48GK1715913SQ20041006253
公开日2006年1月4日 申请日期2004年7月1日 优先权日2004年7月1日
发明者张洪勋, 彭霞薇 申请人:中国科学院生态环境研究中心