专利名称:一种荧光检测次氯酸根的方法
技术领域:
本发明涉及次氯酸根检测技术,具体属于一种以分散紫26为荧光试剂,快速、定量荧光检测次氯酸根的方法。
背景技术:
NaOCl被广泛用于漂白剂和消毒剂,其浓度范围为10_5 10_2mol/L。但是,浓缩的次氯酸盐溶液对人类和动物的健康有潜在的危害。另一方面,次氯酸根是一个重要的生物活性氧物种(R0S),它在免疫系统中起着关键的作用。生物体内的次氯酸根对生命体是必不可少的,具有重要的抗菌性能。然而,异常的次氯酸盐浓度可以导致组织损伤和疾病,如肝缺血再灌注损伤,动脉 粥样硬化,肺损伤,类风湿心血管疾病,神经元变性,关节炎和癌症。因此,灵敏的和高选择性的用于次氯酸盐检测的探针是非常需要的。而检测环境和生物样品中的次氯酸根,如天然水和自来水也是生化研究的兴趣所在。近年来,荧光探针备受关注。然而,大多数荧光探针一般涉及复杂和高成本的有机合成。因此,发展用商业可得、廉价的试剂,操作方便、选择性高、灵敏度高的次氯酸根定量检测方法尤为重要
发明内容
:本发明的目的是为了克服现有技术次氯酸根检测中存在的问题,提供一种体系廉价、操作方便、选择性高、灵敏度高的荧光检测次氯酸根的方法。本发明将商业可得的分散紫26作为荧光试剂在检测C10_中应用。分散紫26的
结构式:
权利要求
1.分散紫26作为荧光试剂在检测次氯酸根中的应用。
2.一种荧光检测次氯酸根的方法:其特征在于,步骤为: (1)、配制pH=7.0、浓度为IOmM的HEPES缓冲溶液,并用乙醇配制2mM的分散紫26乙醇溶液; (2)、按体积比400:7将HEPES缓冲溶液和分散紫26乙醇溶液加到干净的荧光比色皿中,在荧光分光光度仪上检测,随着待测样的加入,625nm的荧光强度逐渐减弱; (3)、用蒸馏水配制2mM的CIO—溶液,把2mL的HEPES缓冲溶液和35μ L的分散紫26乙醇溶液加到荧光比色皿中,逐渐加入C10—溶液的体积为25、50、100、200、300、400、500、600uL,同时在荧光光谱仪上测定625nm的对应的荧光强度F为566、530、492、397、323、213、23,以C10_浓度为横坐标,以相对荧光强度Ftl-F为纵坐标绘制图,Ftl = 588,得到C10_浓度的工作曲线;线性回归方程为R-F=〗.164+0.929c, c的单位为10_6mOl/L ; (4)、将HEPES缓冲溶液2000uL和分散紫26乙醇溶液35uL加到干净的荧光比色皿中,用微量进样器吸取V ul待测样品溶液,加入到此干净的荧光比色皿中,在荧光分光光度仪上检测,将测得的荧光强度代入步骤(3)的线性回归方程,得到浓度C,待测样品Cit3w=2000uLXcX 1(T6/VuL ,即可求得 ClCT 的浓度。
全文摘要
本发明提供了一种次氯酸根的荧光检测方法,是基于商业可得的分散紫26定量检测次氯酸根的方法。具体是在pH为7.0的HEPES缓冲溶液中,利用次氯酸根能将分散紫26的氨基氧化为硝基,发生荧光淬灭,实现次氯酸根的检测。该检测方法,对次氯酸根显示了高的灵敏性和选择性,检测试剂廉价、检测过程简便、灵敏、快速,检测结果准确。
文档编号G01N21/64GK103149184SQ20131004273
公开日2013年6月12日 申请日期2013年2月4日 优先权日2013年2月4日
发明者霍方俊, 阴彩霞 申请人:山西大学