专利名称：一种快速测定饮料酒中氨基甲酸乙酯的方法
技术领域：
本发明属于分析检测技术领域，具体说是一种针对饮料酒中氨基甲酸乙酯的快速检测方法。具体涉及应用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术检测饮料酒中氨基甲酸乙酯的方法。
背景技术：
存在于饮料酒中的氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate，简称EC)含量甚微，大多在几μ g/L到几百μ g/L。传统测定时，预处理方法溶剂萃取(LLE)和固相萃取(SPE)的操作较烦琐，耗时费力且需用有一定危害的有机溶剂，不利于分析人员的身体健康，亦不经济环保。顶空-固相微萃取-气质联用技术(HS-SPME-GC-MS)测定饮料酒中EC，集采样、 萃取、进样于一体，自动快速高效，且无需有机溶剂，低碳环保。使用此方法时，萃取头的选择和萃取检测条件对结果影响很大。一般检测饮料酒中EC的HS-SPME-GC-MS方法，采用的萃取头有DVB/CAR/PDMS三相头(王利平、刘杨岷、袁身淑，固相微萃取气质联用分析黄酒中的氨基甲酸乙酯，江苏食品与发酵，2003，4;高年发、刘欠欠、韩德新等，氨基甲酸乙酯含量随葡萄酒酿造过程变化趋势的研究，食品工业科技，2010，7) Xff/DVB头(梁新红，中国葡萄酒中氨基甲酸乙酯的研究，西北农林科技大学，博士论文，2007 ；冯丽丹，葡萄酒中氨基甲酸乙酯检测方法的研究，西北农林科技大学，硕士论文，2008)。但CW/DVB头现已停产，而DVB/ CAR/PDMS三相头虽比PA头萃取效率高些，但用于酒体成分复杂的酒种譬如黄酒等时，干扰较严重，给后续的检测定量带来不小的难度，限制了此法的适用性。目前尚未有文献或专利公开使用PA萃取头及相应萃取分离条件进行饮料酒中EC的测定。

发明内容
本发明的目的是提供一种快速测定饮料酒中EC的方法。本发明的技术方案为吸取酒样置于顶空瓶中，加入PC内标溶液，再加入氯化钠， 旋紧瓶盖，插入聚丙烯酸酯(PA)萃取头搅拌萃取富集EC，再用气相色谱-质谱联用进行定性定量分析。顶空固相微萃取吸取酒样SmL置于20mL的顶空瓶中，加入8 μ L乙醇配制的 150mg/L的PC内标溶液，再加入3g氯化钠，旋紧瓶盖，插入85 μ m的PA萃取头，在50_80°C 下250rpm恒温搅拌萃取30_60min。气相色谱-质谱联用检测萃取完毕后将萃取头取出，插入气相色谱进样口 250°C 热解吸 5min，DB-WAX 毛细管柱，60mX0. 25匪 i. d. X0. 25 μ m，载气为 He，流速 anL/min ； 不分流进样。程序升温起始温度50°C恒温2min，然后以5°C /min的速度升温至230°C， 保持lOmin。MS条件为EI电离源，电子能量70eV，离子源温度230°C，扫描范围30. 00 350. OOamu, SIM模式特征离子62。通过比对样品和标准品的保留时间来确认EC峰。标准曲线的建立制作标准曲线所用的一系列EC浓度的溶液，均是用模拟酒溶液(5g/L的乳酸溶于IL 4% 20% (ν/ν)的乙醇溶液，用IM的NaOH调整ρΗ值到4. 00)逐步稀释原溶液而得。依次对每一浓度梯度的标准溶液进行顶空固相微萃取，以EC与PC峰面积之比为纵坐标，EC化合物的浓度为横坐标绘制标准曲线，见图1。酒样测定用重蒸馏的去离子水将待测酒样稀释到最终酒精含量为4% 20% (ν/ν)，然后用顶空固相微萃取技术富集饮料酒中的EC，再用气相色谱-质谱联用进行定性定量分析，图2为示例色谱图。根据样品中EC/PC的面积比，对照标准曲线算得样品中的EC 含量。有益效果本发明采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术，建立了快速简便检测饮料酒中EC的方法，集采样、萃取、进样于一体，自动快速高效，且无需有机溶剂， 低碳环保，克服了以往方法中的诸多不足。建立的方法能够快速检测并准确定量饮料酒中的EC。以PC为内标，检测限1. 19 μ g/L，线性相关性系数大于0.99，回收率为90. 21% 99. 07%，相对标准偏差小于10%。该方法可用于各种饮料酒中EC的分析检测定量。


图IEC测定的标准曲线；图2EC分离的色谱图； EC及内标PC的分离色谱图。
具体实施例方式实施例1黄酒中EC的快速测定本发明选取了一市售黄酒，用重蒸馏的去离子水将酒样稀释到最终酒精含量为 4% 20% (v/v)，吸取稀释后酒样8mL置于20mL的顶空瓶中，加入8yL PC内标溶液 (150mg/L)，再加入3g氯化钠，旋紧瓶盖，插入85 μ m的PA萃取头进行顶空固相微萃取及气相色谱-质谱联用检测EC含量。测得其EC含量见表1。表1 一市售黄酒中的EC含量
权利要求
1.一种快速测定饮料酒中氨基甲酸乙酯的方法，其特征是吸取酒样置于顶空瓶中，加入PC内标溶液，再加入氯化钠，旋紧瓶盖，插入聚丙烯酸酯萃取头搅拌萃取富集氨基甲酸乙酯，再用气相色谱-质谱联用进行分析。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述萃取头为85μ m的聚丙烯酸酯萃取头。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是具体方法如下1)待测酒样稀释到最终酒精含量为4% 20%(ν/ν)，吸取稀释后酒样SmL置于20mL 的顶空瓶中，加入8μ L乙醇配制的150mg/L的PC内标溶液，再加入3g氯化钠，旋紧瓶盖， 插入85μπι的聚丙烯酸酯萃取头，在50-80°C下250rpm恒温搅拌萃取30_60min ；2)萃取完毕后将萃取头取出，插入气相色谱进样口250°C热解吸5min，DB-WAX毛细管柱，60mX0.25mm i. d. X0. 25 μ m，载气为He，流速anL/min ；不分流进样。程序升温起始温度50°C恒温2min，然后以5°C /min的速度升温至230°C，保持lOmin。MS条件为EI电离源，电子能量70eV，离子源温度230°C，扫描范围30. 00 350. OOamu, SIM模式特征离子62。 通过比对样品和标准品的保留时间来确认EC峰。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征是待测酒样稀释到最终酒精含量为4% 20%。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征是根据样品中EC/PC的面积比，对照标准曲线算得酒样中的EC含量。
全文摘要
本发明公开了一种快速测定饮料酒中氨基甲酸乙酯的方法，用重蒸馏的去离子水将待测酒样稀释到最终酒精含量为4％～20％(v/v)，用顶空-固相微萃取技术富集酒中的氨基甲酸乙酯，无需繁琐的预处理过程且无需有机溶剂，再用气质联用技术进行检测定量分析，对照标准曲线算得酒样中的EC含量。本发明建立的方法能够快速检测并准确定量饮料酒中的氨基甲酸乙酯，检测限可低至1.19μg/L，线性相关系数大于0.99，回收率为90.21％～99.07％，相对标准偏差小于10％。本方法克服了以往测定方法中的诸多缺陷，可用于各种饮料酒中氨基甲酸乙酯的检测定量分析。
文档编号G01N30/02GK102445505SQ201110288339
公开日2012年5月9日 申请日期2011年9月26日 优先权日2011年9月26日
发明者刘俊, 徐岩, 赵光鳌 申请人:江南大学