专利名称：鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法
技术领域：
本发明属于药物检测领域，具体涉及一种鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法。
背景技术：
麝香酮(3-甲基环十五烷酮C6H3O)是天然麝香重要的生理活性成份；经国内多年研究，它是具有天然麝香芳香开窍和利气止痛等功用的主要成份。但天然麝香资源日益减少，因而研制人工合成麝香，是解决这个药源的方向之一，所以麝香酮的化学合成必须首先解决。在这方面国内已进行了十余年的工作，提出和试验了十多种合成方法。经全国有关会议讨论，仅选定了环己酮合成路线和芥子酸合成路线为适宜的合成方法。4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮是同分异构体，3-甲基环十五烷酮是人工麝香的主要成分之一，4-甲基环十五烷酮也具有一定生理活性，将两种物质分离可以得到两种活性成分，采用鉴别的方法主要是判定这两种成分是否分离为单物质。由于此两种物质分子式相同，结构相近，因此一些物理和化学性质也相近，首先采用高效液相色谱方法检测，先将其衍生成腙后进行色谱分析，由于均为消旋体，色谱峰出现了两个面积相当的峰，且改变各种条件无法分离，因此无法采用该方法鉴别；然后直接进行液相色谱测定，因两种物质均属于末端吸收，紫外检测器检测峰面积太小，不容易鉴别这两种物质；后来改用蒸发光检测器检测，经多次试验结果误差太大，无法采用。因此需要发明一种分离效果很好且操作方法简便，快速，结果容易判定的方法，迅速鉴别这两种物质。

发明内容
为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种分离效果好，而且操作方法简便，快速，结果容易判定的4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮鉴别的方法。鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤: 分别称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品各6-12mg置5ml容量
瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品6-12mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2 -5 μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(18-20:0.2-0.6)或石油醚-乙醚(18-20:0.5-1.5)或石油醚-乙酸乙酯(18-20:0.6-1.0)展开；
晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，
4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与
3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。优选的，上述的展开步骤中，还包括再次展开，所述的再次展开的步骤为:
采用环己烷-乙酸乙酯(18-20:0.2-0.6)或石油醚-乙醚(18-20:0.5-1.5)或石油醚-乙酸乙酯(18-20:0.6-1.0)再次展开。更优选的，上述的方法包括下述的步骤:
称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2μ 1-5μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)或石油醚-乙醚(19:1)或石油醚-乙酸乙酯(19.2:0.8)展开；
晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，
4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与
3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。上述的方法包括下述的步骤:
称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2μ 1-5μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)或石油醚-乙醚(19:1)或石油醚-乙酸乙酯(19.2:0.8)展开；
环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)或石油醚-乙醚(19:1)或石油醚-乙酸乙酯(19.2:
0.8)再次展开；
晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，
4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与
3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。上述的薄层色谱法中，展开的试剂为环己烷-乙酸乙酯。上述再次展开的试剂为环己烷-乙酸乙酯。本发明的有益效果在于，采用以上的方法对4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮进行鉴别，本发明的方法中，采用的原料价廉易得，而且本发明的方法操作简便，快速，结果容易判定。
具体实施例方式下面结合具体实施方式
来对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不以此限制本发明。实施例1
鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤:
称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2μ 1-5μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)展开；
晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，
4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与
3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。实施例2
鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤:
称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品对照品分别点样2 μ 1-5 μ I于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙醚(19:1)展开；
晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，
4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与
3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。实施例3
分别称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品各6-12mg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品6-12mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品对照品分别点样2 μ 1-5 μ I于同一硅胶G薄层板上，以石油B1-乙酸乙酯(18-20:0.6-1.0)展开； 晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，
4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与
3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。实施例4
鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤:
称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2 μ 1-5 μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)展开；
再次展开，试剂为环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)；
晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，
4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。实施例5
鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤:
称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液；
另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；
按照薄层色谱法，将供试品对照品分别点样2 -5 μ I于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙醚(19:1)展开；
以石油醚-乙醚(19:1)再次展开。晾干，喷以2，4- 二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3-甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。
权利要求
1.鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤: 分别称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品各6-12mg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液； 另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品6-12mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液； 按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2 -5 μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(18-20:0.2-0.6)或石油醚-乙醚(18-20:0.5-1.5)或石油醚-乙酸乙酯(18-20:0.6-1.0)展开； 晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。
2.如权利要求1所述的鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，其特征在于，所述的展开步骤中，还包括再次展开，所述的再次展开的步骤为:采用环己烷-乙酸乙酯(18-20:0.2-0.6)或石油醚-乙醚(18-20:0.5-1.5)或石油醚-乙酸乙酯(18-20:0.6-1.0)再次展开。
3.如权利要求1所述的鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤: 称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液； 另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液； 按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2 μ 1-5 μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)或石油醚-乙醚(19:1)或石油醚-乙酸乙酯(19.2:0.8)展开； 晾干，喷以2，4_ 二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与3-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。
4.如权利要求1所述的鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，该方法包括下述的步骤: 称取4-甲基环十五烷酮供试品、3-甲基环十五烷酮供试品IOmg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释至5ml得供试品溶液； 另取3-甲基环十五烷酮对照品、4-甲基环十五烷酮对照品10mg，加入甲醇配制成5mg/ml溶液，作为对照品溶液；按照薄层色谱法，将供试品、对照品分别点样2μ 1_5μ I于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)或石油醚-乙醚(19:1)或石油醚-乙酸乙酯(19.2:0.8)展开； 环己烷-乙酸乙酯(19.6:0.4)或石油醚-乙醚(19:1)或石油醚-乙酸乙酯(19.2:0.8)再次展开； 晾干，喷以2，4-二硝基苯肼试液或香草醛硫酸溶液烘烤或盐酸氨基脲试液，显色，4-甲基环十五烷酮供试品色谱在与4-甲基环十五烷酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与3-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮供试品在与3-甲基环十五烷 酮对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点；在与4-甲基环十五烷酮对照品相应位置无相同斑点；3_甲基环十五烷酮对照品斑点与4-甲基环十五烷酮对照品斑点不对应。
5.如权利要求1所述的鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，其特征在于，所述的薄层色谱 法中，展开的试剂为环己烷-乙酸乙酯。
6.如权利要求5所述的鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法，其特征在于，所述再次展开的试剂为环己烷-乙酸乙酯。
全文摘要
本发明属于药物检测领域，具体涉及一种鉴别4-甲基环十五烷酮和3-甲基环十五烷酮的方法。该方法包括下述的步骤称取待鉴别的两种物质的供试品10mg置5ml容量瓶中，加甲醇稀释得供试品溶液；另取待鉴别的两种物质的对照品配制得对照品溶液；按照薄层色谱法，展开，晾干，喷显色剂显色，根据显色结果判断供试品是4-甲基环十五烷酮或3-甲基环十五烷酮，本发明的方法中，采用的原料价廉易得，而且本发明的方法操作简便，快速，结果容易判定。
文档编号G01N30/94GK103197025SQ20131009400
公开日2013年7月10日 申请日期2013年3月22日 优先权日2013年3月22日
发明者李樱, 文哲亮, 毕丽娟, 高钧, 李秀凤, 李海燕 申请人:山东宏济堂制药集团有限公司