专利名称：免疫磁性微球荧光光纤流动分析仪的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及医药、环保、食品、国防、农业、畜牧业的免疫分析测定仪，特别是集荧光免疫分析、光纤传感器、流动分析、免疫磁珠分离于一体的分析仪器。
在现有技术中(1)用于放射免疫法的γ-计数仪等放射性计量测定设备，价格昂贵，少则几十万，多则上百万，所涉及的同位素有放射性污染，给操作人员及环境带来极大的危害，国外对该方法及仪器已逐渐趋于淘汰。(2)用于酶联免疫法的酶标仪，难于实现实时、在位，自动化，所用酶易失活，也有仪器昂贵的不足。(3)用于荧光免疫法的荧光仪，未能实现实时、在线、大批量检测，自动进样和自动检测均未实现，且测定周期长。(4)新近发展起来的光纤免疫传感器，多是将光纤探头上固定有特异抗体或抗原，经反应、测定后需将探头再生处理，这就限制了该类仪器使用的连续性和自动化。如一种可在位荧光光纤传感器(Bright FV，et al.Anal Chem.，1990，621065-1069)，与毛细管进样技术结合，虽可实行在位及远距高遥测，但存在抗体进样与抗原的结合与解离，即再生问题，难以普及。又如一种测定有机农药硫磷的荧光光纤传感器(Bowyer JR，etal.Analyst，1991，116117-122)，同样需对传感器探头进行再生处理，致使方法重现性不理想，检测周期较长，通用性差，无法实现自动化，更难实现批量样本的快速分析。
本实用新型正是为了克服上述现有技术中的不足之处而提供一种可自动、原位、在线分析的免疫磁性微球荧光光纤流动分析仪。
本设计流动注射分析仪、可控电磁场、反应圈，荧光光纤流通池、激发光、光纤固定架、光纤传感器、荧光分光光度计及数据处理系统计算机或记录仪组成。本设计解决的是连接流动注射分析仪和荧光分光光度计的可控电磁场、反应圈、荧光光纤流通池、光纤固定架及光纤传感器的结构，且设计如下(1)可控电磁场的磁场安匝＝4000匝，电流I＝1.0A，磁场感应强度变化幅度为0-9980(GS)；(2)反应圈为样品通道，可以是管形，也可以是螺旋形；(3)荧光光纤流通池由有垫圈的固定塞的流动池体、Y形光纤束及光纤固定螺母组成，而Y形光纤束的夹角为10°-20°；流动池可以是活塞式园柱形，也可以是园盘形和Z形；(4)光纤固定架由激发光、45°平面境，凸透镜、激发光纤、光纤头，样品荧光、荧光光纤、柱型透镜组成。光纤、平镜、透镜由螺钉固定。其工作原理是是由流动注射分析仪通过可控电磁场控制的反应圈，与荧光光纤流通池相连，光源发出的激发光通过光纤固定架上的光纤传感器与荧光分光光度计相连接，将荧光分光光度计的读数转换成数据处理系统上的响应值，其中流动注射分析仪、荧光分光光度计、数据处理系统如计算机或记录仪为现有技术中的商品仪器，其操作按其说明书要求即可。
本实用新型与现有技术相比具有如下优点1.本设计集荧光免疫分析、光纤传感趋、流动分析、免疫磁珠分离于一体的仪器，操作简单。
2.具有通用性(1)结合免疫磁珠的吸附、富集、分高功能可实现在流路中固相抗原抗体结合态和游离态标记物的自动在线分离，实现快速荧光测定；(2)若为均相的免疫测定，可不采用载体磁珠，作为普通荧光光纤流动分析；(3)若在光纤探头上覆盖一层特殊的敏感膜，又可成为荧光光纤免疫传感流动系统，实现一机多能；(4)使用本设计，可对多种蛋白(抗原、抗体、药物等)进行标记，可提供与本设计相匹配的测定药盒。
3.本设计取样、混合、反应均可自动化，反应可在流路中进行(可运行，可倍流)，准确控制反应时间。
以下是本实用新型说明书附图的图面说明

图1是本实用新型的各仪器的连接框图。
图2是本实用新型的各仪器的连接示意图。
图中R1、R2为试剂、C为截流、S为样品。
图3是本实用新型管形反应圈的剖视图。
图4是本实用新型螺旋形反应圈的示意图。
图5是本实用新型圆盘式流通池的剖视图。
图6是本实用新型圆盘式流通池体的局部左视图。
图7是本实用新型活塞式园柱式流通池的剖视图。
图8是本实用新型圆盘Z形通池的剖视图。
图9是本实用新型光纤固定架及光路示意图。
本实用新型以下将结合附图和实施例作进一步详述实施例1.一种免疫磁性微球荧光光纤流动分析仪，由流动注射分析仪〔1〕、可控电磁场〔2〕、反应圈〔3〕，荧光光纤流通池〔4〕、激发光〔5〕、光纤固定架〔6〕、光纤传感器〔7〕、荧光分光光度计〔8〕及数据处理系统〔9〕计算机或记录仪组成，其特别之处在于连接流动注射分析仪〔1〕和荧光分光光度计〔8〕的可控电磁场〔2〕、反应圈〔3〕、荧光光纤流通池〔4〕、光纤固定架〔6〕及光纤传感器〔7〕的结构是(1)可控电磁场〔2〕的磁场安匝＝4000匝，电流I＝1.0A，磁场感应强度变化幅度为0-9980(GS)。(2)反应圈〔3〕为样品通道，可以是管形，也可以是螺旋形。(3)荧光光纤流通池〔4〕由有垫圈〔11〕的固定塞〔12〕的流动池体〔13〕、Y形光纤束〔14〕及光纤固定螺母〔15〕组成，而Y形光纤束的夹角为10°-20°；流动池〔13〕可以是活塞式园柱形，也可以是园盘形和Z形。(4)光纤固定架〔6〕由激发光〔5〕、45°平面镜〔16〕，凸透镜〔17〕、激发光纤〔18〕、光纤头〔19〕，样品荧光〔20〕、、荧光光纤〔21〕、柱型透镜〔22〕组成，光纤、平镜、透镜由螺钉固定。
本设计是将现有技术中的流动注射分析仪、荧光分光光度计及数据处理系统计算机或记录仪加设计部分组合成了可自动、原位、在线分析的免疫磁性微球荧光光纤流动分析仪。工作的原理如下流动注射分析仪〔1〕通过可控电磁场〔2〕控制的反应圈〔3〕，与荧光光纤流通池〔4〕相连，光源发出的激发光〔5〕通过光纤固定架〔6〕上的光纤传感器〔7〕与荧光分光光度计〔8〕相连接，将荧光分光光度计表头读数转换成数据处理系统〔9〕上的响应值(1)流动注射分析仪〔1〕是由1个6通道10档调速，速度5-80转/分的蠕动泵〔10〕、一个多功能阀〔11〕和通用化学块(仪器原有的集成电路)组成，完成试剂、试样、免疫磁珠的自动注入、汇合、反应、分离。(2)荧光分光光度计〔8〕是将被测物产生的荧光光强信号通过光电转化为电信号，被微电流计检测。(3)可控电磁场〔2〕的磁场安匝＝4000匝，电流I＝1.0A，磁场感应强度变化幅度为0-9980(GS)，通过1个可调电路对电流的调节，使电磁场强度对反应圈〔3〕中的免疫磁殊的吸附、富集、分离可控。(4)反应圈〔3〕为样品通道，可以是管形也可以是螺旋形。(5)荧光光纤流通池〔4〕由进、出带垫圈〔11〕的固定塞〔12〕的流动池体〔13〕、Y形光纤束〔14〕及光纤固定螺母〔15〕组成，被测物在此受激发光〔4〕照射，发出荧光；其中Y形光纤束的夹角为10°-20°。流动池可以是活塞式园柱形，也可以是园盘形和Z形。(6)光纤固定架〔6〕是使激发光〔5〕垂直射入到45°的平面镜〔16〕，通过凸透镜〔17〕聚焦于激发光纤〔18〕中，送到样品光纤头〔19〕，再将样品产生的荧光〔20〕通过样品光纤头导入荧光光纤〔21〕，通过柱型透镜〔22〕得到荧光信号，光纤、平镜、透镜由螺钉固定。(7)数据处理系统〔9〕是将荧光分光光度计上的读数进行处理，并记录保存；该系统可以是计算机，也可以是记录仪。
本设计还可以有如下的结构改变蠕动泵可以是主泵单独使用，可以主泵与1个4通道，其速度为10-60转/分的副泵同时使用。
实施例2.使用本设计对以下样品进行了检测(1)肺炎支原体IgG抗体进行测定42人次临床血清样本，标准曲线r＝0.9930，血清样本稀释64倍后，仍能测得阴、阳性，且与FLISA法、荧光显微镜法比较，阴阳性符合第均＞94％。
(2)对人血清白蛋白(HSA)的测定(生物制剂)检测下限为10-4g/ml，上限为40mg/ml，回收率为90.86～119.86％，精密度日内RSD 2.17～6.31％，日间RSD 2.25～9.44％，与临床现用方法(染料法)结果比较，r＝0.9847。
权利要求1.一种免疫磁性微球荧光光纤流动分析仪，由流动注射分析仪〔1〕、可控电磁场〔2〕、反应圈〔3〕，荧光光纤流通池〔4〕、激发光〔5〕、光纤固定架〔6〕、光纤传感器〔7〕、荧光分光光度计〔8〕及数据处理系统〔9〕计算机或记录仪组成，其特征在于连接流动注射分析仪〔1〕和荧光分光光度计〔8〕的可控电磁场〔2〕、反应圈〔3〕、荧光光纤流通池〔4〕、光纤固定架〔6〕及光纤传感器〔7〕的结构是1.1可控电磁场〔2〕的磁场安匝＝4000匝，电流I＝1.0A，磁场感应强度变化幅度为0-9980(GS)；1.2反应圈〔3〕为样品通道，可以是管形，也可以是螺旋形；1.3荧光光纤流通池〔4〕由有垫圈〔11〕的固定塞〔12〕的流动池体〔13〕、Y形光纤束〔14〕及光纤固定螺母〔15〕组成，而Y形光纤束的夹角为10°-20°；流动池〔13〕可以是活塞式园柱形，也可以是园盘形和Z形；1.4光纤固定架〔6〕由激发光〔5〕、45°平面镜〔16〕，凸透镜〔17〕、激发光纤〔18〕、光纤头〔19〕，样品荧光〔20〕、、荧光光纤〔21〕、柱型透镜〔22〕组成，光纤、平镜、透镜由螺钉固定。
专利摘要本设计由流动注射分析仪通过可控电磁场控制反应圈,与荧光光纤流通池相连,光源发出的激发光通过光纤固定架上的光纤传感器与荧光分光光度计相连接,将荧光分光光度计的读数转换成数据处理系统的响应值。本设计取样、混合、反应均可自动化,反应可在流路中进行(可运行,可倍流),准确控制反应时间。使用本设计及与之匹配的试剂药盒,可对多种蛋白(抗原、抗体、药物等)进行标记,实现自动、原位、在线分析。
文档编号G01N35/08GK2490584SQ00244650
公开日2002年5月8日 申请日期2000年10月13日 优先权日2000年10月13日
发明者何俊, 但德忠, 李毓琦 申请人:岳英