专利名称：六味锦鸡儿制剂的检测方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种中药制剂的检测方法。
背景技术：
六味锦鸡儿汤散为藏药，收载于《卫生部药品标准》藏药分册中，标准编号为 WS3-BC-0292-95,由鬼箭锦鸡儿、藏木香、草果、豆蘧、槟榔、高良姜六味药组成。主要用于调合血、龙，咳嗽，呼吸急促，劳伤引起的肾腰疼痛、遗精、阴部瘘管，巴”病、腹水。目前使用的六味锦鸡儿汤散记载于《中华人民共和国卫生部药品标准》1995年版
藏药第一册拼音名LiuweiJinjier Tangsan书页号Cl-295标准编号WS3-BC-0292-9处方鬼箭锦鸡儿200g、藏木香200g、草果100g、豆蘧100g、槟榔100g、高良姜 IOOg0制法以上六味，粉碎成粗粉，过筛，混匀，即得。性状本品为浅棕色粗粉；气微香，味苦、微辣。检查应符合散剂项下有关的各项规定。功能与主治补肾，燥湿。用于调合血、龙，咳嗽，呼吸急促，劳伤引起的肾腰疼痛、 遗精、阴部瘘管，“冈巴”病、腹水。用法与用量一次2g，一日2次。用奶茶煎服。规格每袋装20g。贮藏密闭，置阴凉干燥处。本发明根据藏药质量标准提高的要求，对该处方中药材及剂量做出调整，具体为 藏锦鸡儿150g、巴夏嘎100g、余甘子130g、矮紫堇100g、松生等膏100g、洪连100g。藏锦鸡儿收载《卫生部药品标准》(藏药第一册)，本品为豆科植物鬼箭锦鸡儿 Caraganajubata(pall. )Poir.及昌都锦鸡儿 Caraganachangduensis fiauf 的木部心材。 砍取褐红色木部，切断，阴干。巴夏嘎收载于《西藏自治区地方药材质量标准》，标准号为XZ-BC-OOO1-2003，为 I!粟科植物小花黄堇Corydalis racemosa(Thunb. )pers的干燥地上部分，晾干或切断晾干备用。余甘子收载《中国药典》2010年版一部，第167页，本品系藏族习用药材，为大戟科植物余甘子Phyllanthus emblica L.的干燥成熟果实。冬季至次春果实成熟时采收，除去杂质，干燥。矮紫堇收载于《卫生部药品标准》(藏药第一册)，标准编号WS3-BC-0114-95，本品为罂■粟科植物矮紫堇 Corydalis hendersonii Hemsl. (C. nepaiesis kitamura)和扁柄黄堇C. mucionifera Maxim.的干燥全草,夏季连根挖起,洗净，阴干。洪连收载《中国药典》2010年版一部，弟249页，本品系减族习用药材。为玄参科植物短筒兔耳草Lagotis brevituba Maxim的干燥全草。夏、秋二季花开时采收,除去杂质，洗净，阴干。松生等膏本品为鼠李科植物西藏猫乳Rhamnella gilgitica Mansf. et Melch. 的小叶鼠李Rhamnus parvifolia Bunge的干燥木材。全年均可采收,除去树皮,锯成段,劈开后晒干。取药材片，加水2倍，用文水煨泡3 4天，煮沸4小时，滤过，残渣再加水I. 5 倍，煮、滤二次，合并滤液，用文火浓缩成膏。草果收载《中国药典》2010年版一部,第222页,本品为姜科植物草果Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收,除去杂质,晒干或低温干燥。豆蘧收载《中国药典》2010年版一部,第156页,本品为姜科植物白豆蘧Amomum Kravanh Pierre exGagnep.或爪睡白豆蘧 Amomum compactum Soland ex Maton 的干燥成熟果实。按产地不同分为“原豆蘧”和“印尼白寇”。槟榔收载《中国药典》2010年版一部，第342页，本品为棕榈科植物槟榔Rreca catechu L.的干燥成熟种子。春末至秋初采收成熟果实，用水煮后，干燥，除去果皮，取出种子，干燥。高良姜收载《中国药典》2010年版一部，第270页，本品为姜科植物高良姜 Alpinia officinarum Hance的干燥根莖。夏末秋初采挖,除去须根和残留的鳞片，洗净，切断，晒干。目前尚未有六味锦鸡儿制剂的检测方法。

发明内容
本发明的目的在于提供一种六味锦鸡儿制剂的检测方法，所述方法重现性好、专属性强，能够有效地检测六味锦鸡儿制剂的质量，从而使六味锦鸡儿制剂的质量稳定、安
全、可控。为实现上述目的，本发明的技术方案为一种六味锦鸡儿制剂的检测方法，所述制剂的原料药组成为藏锦鸡儿/鬼箭锦鸡儿120-180重量份、巴夏嘎80-120重量份、余甘子100-150重量份、矮紫堇80-120重量份、松生等膏80-120重量份、洪连80-120重量份；所述检测方法包括通过薄层层析对制剂中的余甘子和/或洪连进行定性鉴别。具体地，余甘子的定性鉴别包括la)制备余甘子供试品溶液、余甘子对照药材溶液、不含余甘子的阴性样品溶液；2a)照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VIB试验，分别吸取步骤Ia)所获得的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液，并点样于同一硅胶G薄层板上；3a)以沸点为60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，将步骤2a)所获得的薄层板放置在展开缸中饱和、展开、取出、晾干，喷以三氯化铁溶液，风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与余甘子对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点；洪连的定性鉴别包括Ib)制备洪连供试品溶液、洪连对照药材溶液、不含洪连的阴性样品溶液；CN 102590430 A

2b)照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VIB试验，分别吸取步骤Ib)所获得的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液，并点样于同一硅胶G薄层板上；3b)以甲醇-乙酸-水为展开剂，将步骤2b)所获得的薄层板放置在展开缸中饱和、展开、取出，晾干，置紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与洪连对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点。具体地，所述余甘子、洪连的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液的制备方法包括(I)余甘子的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液取所述六味锦鸡儿制剂，研细，加甲醇，超声处理，滤过，滤液浓缩，作为余甘子供试品溶液；另取余甘子对照药材，按照所述余甘子供试品溶液的制备方法制成余甘子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含余甘子的阴性样品，并按所述余甘子供试品溶液的配制方法制成余甘子阴性样品溶液；(2)洪连的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液取所述六味锦鸡儿制剂，研细，加甲醇，超声处理，滤过，滤液浓缩，作为洪连供试品溶液；另取洪连对照药材，按照所述洪连供试品溶液的制备方法制成洪连对照药材溶液； 按处方比例及制备工艺，配置不含洪连的阴性样品，并按所述洪连供试品溶液的配制方法制成洪连阴性样品溶液。更具体地，所述检测方法包括以下步骤a)余甘子的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂0. 5 5重量份，研细，加甲醇5 40体积份，超声处理 10 60分钟，滤过，滤液浓缩至0. 5 8体积份，作为余甘子供试品溶液；另取余甘子对照药材0. I 2. 5重量份，按照所述余甘子供试品溶液的制备方法制成余甘子对照药材溶液; 按处方比例及制备工艺，配置不含余甘子的阴性样品，并按所述余甘子供试品溶液的配制方法制成余甘子阴性样品溶液。照《中国药典》2010年版一部附录VIB所述薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各0. 001 0. 02体积份，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以沸点为 60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开剂的体积比为石油醚-乙酸乙酯-甲酸(I 15 I 9 0.05 0.5)，薄层板置展开缸中饱和0 40分钟，展开，取出，晾干， 喷以10%三氯化铁溶液热风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与余甘子对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点；b)洪连的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂0. 5 5重量份，研细，加丙酮5 40体积份，超声处理 10 60分钟，滤过，滤液浓缩至0. 5 8体积份，作为洪连供试品溶液；另取洪连对照药材 0. I 2. 5重量份，按照所述洪连供试品溶液的制备方法制成洪连对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含洪连的阴性样品，并按所述洪连供试品溶液的配制方法制成洪连阴性样品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB所述薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各0. 001 0. 02体积份,分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比为0. I 10 : 0.05 5 I 20的甲醇-乙酸-水为展开剂,薄层板置展开缸中饱和0 40分钟,展开,取出， 晾干，置365nm紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与洪连对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点。
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更具体地，所述检测方法包括以下步骤i)余甘子的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂2g，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至4ml，作为余甘子供试品溶液；另取余甘子对照药材0. 5g，按照所述余甘子供试品溶液的制备方法制成余甘子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含余甘子的阴性样品， 并按所述余甘子供试品溶液的配制方法制成余甘子阴性样品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB所述薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 y L，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以沸点为60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开剂的体积比为石油醚-乙酸乙酯-甲酸(6 4 0.25)，薄层板置展开缸中饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以10%三氯化铁溶液热风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与余甘子对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点；ii)洪连的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂2g，研细，加丙酮20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至4ml，作为洪连供试品溶液；另取洪连对照药材0. 5g，按照所述洪连供试品溶液的制备方法制成洪连对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含洪连的阴性样品，并按所述洪连供试品溶液的配制方法制成洪连阴性样品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB 所述薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 u L，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比为 2:1: 7的甲醇-乙酸-水为展开剂，薄层板置展开缸中饱和30分钟，展开，取出，晾干， 置365nm紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与洪连对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点。本发明所述的六味锦鸡儿制剂的剂型可以是片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或散剂。 制备方法为取所述六味锦鸡儿制剂，粉碎成细粉，过筛，混匀，加适量水制丸，阴干即得； 或取所述六味锦鸡儿制剂，粉碎成细粉，过筛，混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂颗粒剂、丸剂、胶囊剂、片剂或散剂。本发明针对六味锦鸡儿制剂的组成成分，对指标性成分余甘子、洪连进行定性检测，以达到对制剂的质量进行控制的目的。本发明提供了良好的六味锦鸡儿制剂的检测方法，该检测方法具有灵敏、重现性好和专属性强的特点。


图I为六味锦鸡儿制剂中余甘子薄层层析鉴别图；其中从左至右样品顺序为供试品溶液I、供试品溶液2、供试品溶液3、余甘子对照药材溶液、余甘子对照药材溶液、余甘子阴性样品溶液；其中展开剂为石油醚(60°C 90°C)_乙酸乙酯-甲酸(6 : 4 : 0. 25)。图2为六味锦鸡儿制剂中洪连薄层层析鉴别图；其中从左至右样品顺序为供试品溶液I、供试品溶液2、供试品溶液3、洪连对照药材溶液、洪连对照药材溶液、洪连阴性样品溶液；其中展开剂为甲醇-乙酸-水(2 : I : 7)。
具体实施方式
下述实验例和实施例进一步说明但不限于本发明。下述用于各成分鉴别的制剂、在各鉴别方法下均简称为“供试品”，应理解为其是按照各鉴别方法要求制备的供试品，例如在余甘子定性鉴别方法中所述的供试品为“余甘子定性鉴别的供试品”。实验例I :余甘子的薄层层析条件的筛选实验(I)仪器电子秤、具塞锥形瓶、移液管、超声波提取仪、漏斗、滤纸、蒸发皿、点样器、硅胶G 板、层析缸、喷雾瓶、电吹风。(2)对照药材余甘子对照药材(批号121289-200301)，购自中国药品生物制品检定所。(3)试剂甲醇、乙醚、丙酮、石油醚(60 90°C )、乙酸乙酯、甲酸、三氯化铁。(4)检验方法提取溶剂的选择分别采用乙醚、丙酮、甲醇等溶液为提取溶剂；提取方法的选择分别采用超声提取和冷浸提取；展开剂的选择分别采用石油醚(60 90°C )-乙酸乙酯(3 8)、石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯(6 4)、石油醚(60 90°C)_乙酸乙酯-甲酸(6 4 0.25)为展开剂；分别选择以上提取溶剂、提取方法和展开剂进行试验，结果如下
权利要求
1.一种六味锦鸡儿制剂的检测方法，所述制剂的原料药组成为藏锦鸡儿/鬼箭锦鸡儿120-180重量份、巴夏嘎80-120重量份、余甘子100-150重量份、矮紫堇80-120重量份、 松生等膏80-120重量份、洪连80-120重量份；所述检测方法包括通过薄层层析对制剂中的余甘子和/或洪连进行定性鉴别。
2.如权利要求I所述的检测方法，其中，所述的余甘子定性鉴别包括.Ia)制备余甘子供试品溶液、余甘子对照药材溶液、不含余甘子的阴性样品溶液；.2a)照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VIB试验，分别吸取步骤la)所获得的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液，并点样于同一硅胶G薄层板上；.3a)以沸点为60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，将步骤2a)所获得的薄层板放置在展开缸中饱和、展开、取出、晾干，喷以三氯化铁溶液，风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与余甘子对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点；洪连的定性鉴别包括.Ib)制备洪连供试品溶液、洪连对照药材溶液、不含洪连的阴性样品溶液；.2b)照薄层色谱法《中国药典》2010版一部附录VIB试验，分别吸取步骤lb)所获得的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液，并点样于同一硅胶G薄层板上；.3b)以甲醇-乙酸-水为展开剂，将步骤2b)所获得的薄层板放置在展开缸中饱和、展开、取出，晾干，置紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与洪连对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点。
3.如权利要求2所述的检测方法，其中所述余甘子、洪连的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液的制备方法包括(1)余甘子的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液取所述六味锦鸡儿制剂，研细，加甲醇，超声处理，滤过，滤液浓缩，作为余甘子供试品溶液；另取余甘子对照药材，按照所述余甘子供试品溶液的制备方法，制成余甘子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含余甘子的阴性样品，并按所述余甘子供试品溶液的配制方法制成余甘子阴性样品溶液；(2)洪连的供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液取所述六味锦鸡儿制剂，研细，加甲醇，超声处理，滤过，滤液浓缩，作为洪连供试品溶液；另取洪连对照药材，按照所述洪连供试品溶液的制备方法，制成洪连对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含洪连的阴性样品，并按所述洪连供试品溶液的配制方法制成洪连阴性样品溶液。
4.如权利要求I至3任一项所述的检测方法，包括下述步骤a)余甘子的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂O. 5 5重量份，研细，加甲醇5 40体积份，超声处理10 60分钟，滤过，滤液浓缩至O. 5 8体积份，作为余甘子供试品溶液；另取余甘子对照药材.O.I 2. 5重量份，按照所述余甘子供试品溶液的制备方法，制成余甘子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含余甘子的阴性样品，并按所述余甘子供试品溶液的配制方法制成余甘子阴性样品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB所述薄层色谱法试验， 吸取上述三种溶液各O. 001 O. 02体积份，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以沸点为60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开剂的体积比为石油醚-乙酸乙酯-甲酸=I 15 I 9 O. 05 O. 5，薄层板置展开缸中饱和O 40分钟，展开，取出，晾干， 喷以10%三氯化铁溶液热风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与余甘子对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点；b)洪连的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂O. 5 5重量份，研细，加丙酮5 40体积份，超声处理10 60分钟，滤过，滤液浓缩至O. 5 8体积份，作为洪连供试品溶液；另取洪连对照药材O. I ·2.5重量份，按照所述洪连供试品溶液的制备方法，制成洪连对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含洪连的阴性样品，并按所述洪连供试品溶液的配制方法制成洪连阴性样品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB所述薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各O. 001 O. 02体积份,分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比为O. I 10 : O. 05 5 I 20的甲醇-乙酸-水为展开剂,薄层板置展开缸中饱和O 40分钟,展开,取出， 晾干，置365nm紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与洪连对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点。
5.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，包括以下步骤i)余甘子的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂2g，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至 4ml，作为余甘子供试品溶液；另取余甘子对照药材O. 5g，按照所述余甘子供试品溶液的制备方法，制成余甘子对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含余甘子的阴性样品， 并按所述余甘子供试品溶液的配制方法制成余甘子阴性样品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB所述薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 μ L，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以沸点为60 90°C的石油醚-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开剂的体积比为石油醚-乙酸乙酯-甲酸=6 4 O. 25，薄层板置展开缸中饱和20分钟，展开，取出，晾干，喷以10%三氯化铁溶液热风吹至斑点显色清晰；薄层色谱中，在与余甘子对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点；ii)洪连的定性鉴别取所述六味锦鸡儿制剂2g，研细，加丙酮20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至 4ml，作为洪连供试品溶液；另取洪连对照药材O. 5g，按照所述洪连供试品溶液的制备方法，制成洪连对照药材溶液；按处方比例及制备工艺，配置不含洪连的阴性样品，并按所述洪连供试品溶液的配制方法制成洪连阴性样品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB 所述薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 μ L，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比为 2:1: 7的甲醇-乙酸-水为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20分钟，展开，取出，晾干， 置365nm紫外光灯下检视；薄层色谱中，在与洪连对照药材色谱相应的位置上，供试品色谱显相同颜色的斑点。
6.如权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述制剂原料药组成为藏锦鸡儿/鬼箭锦鸡儿150重量份、巴夏嘎100重量份、余甘子130重量份、矮紫堇100重量份、松生等膏 100重量份、洪连100重量份。
7.如权利要求I所述的检测方法，其特征在于，所述六味锦鸡儿制剂的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或散剂。
8.如权利要求I所述的检测方法，其特征在于，取所述六味锦鸡儿制剂，粉碎成细粉， 过筛，混匀，加适量水制丸，阴干即得；或取所述六味锦鸡儿制剂，粉碎成细粉，过筛，混匀， 混匀，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂。
全文摘要
本发明涉及六味锦鸡儿制剂的检测方法，包括下述鉴别方法通过薄层层析对制剂中余甘子和/或洪连进行定性鉴别。所述检测方法具有灵敏、重现性好和专属性强的特点，通过该检测方法，可以对六味锦鸡儿制剂进行有效的检测。
文档编号G01N30/90GK102590430SQ20121001500
公开日2012年7月18日 申请日期2012年1月17日 优先权日2012年1月17日
发明者张国霞, 续艳丽, 陈丽娟 申请人:西藏奇正藏药股份有限公司