专利名称：一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法
技术领域：
本发明涉及一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法，属于检测技术领域。
背景技术：
三聚氰胺脲甲醛树脂(MUF)是在脲醛树脂的基础上通过添加三聚氰胺得到的改性树脂，又称三聚氰胺改性脲醛树脂。由于三聚氰胺甲醛树脂(MF)成本较高而脲醛树脂(UF)的耐水性不好，三聚氰胺脲甲醛树脂(MUF)的性价比高且耐水性好，目前大部分木材加工企业都已采用三聚氰胺脲甲醛树脂作为粘合剂。虽然大部分木材加工企业采用三聚氰胺脲甲醛树脂作为粘合剂，但是对其粘结机理、品质的检测，正确的使用都缺乏认识。饲料粘合剂也称赋形剂，主要用于加工颗粒饲料，可以改善粒料品质、增加生产效率及延长铸模寿命，同时可以减少饲料粉尘，特别是水产饲料需要提高其在水中不散、不沉的特性，从而减少养分流失。又因为其含氮元素的比例较高，故可能被不法商人添加到动物饲料中，用作饲料粘合剂或冒充蛋白质。三聚氰胺脲甲醛树脂不但没有任何的营养价值，甚至对动物是有害的，严重的甚至能够导致动物的死亡。三聚氰胺脲甲醛树脂在饲料的生产、包装及充当“伪蛋白”过程中扮演着重要的角色，当前缺乏与之配套的检测标准，监管者对乳品质量安全的监督和管理中缺少有效手段，因此建立饲料中三聚氰胺脲甲醛树脂的检测方法势在必行。

发明内容
本发明旨在用毛细管电泳方法快速筛查饲料中的三聚氰胺脲甲醛树脂。此方法样品前处理简单，可靠性高，可对掺杂在饲料中三聚氰胺脲甲醛树脂进行快速筛查。本发明的技术方案是一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法，其特征是，包括以下步骤(I)样品前处理(提取三聚氰胺脲甲醛树脂)称取饲料试样于具塞塑料离心管中，加入四氢呋喃(THF)-水溶液(四氢呋喃水=37:13(V/V))，涡旋振荡后再加入甲醇超声提取，离心，将上清液过滤至另一具塞塑料离心管中，再加甲醇重复提取I次，合并上清液，氮吹浓缩至近干后用甲醇-水(体积比I: I)定容过滤，待电泳分析；(2)三聚氰胺脲甲醛树脂的检测采用毛细管电泳-DAD检测，检测波长为224nm，分离电压+15kv ;背景电解质溶液为IOOmM三氟乙酸(TFA)/50%甲醇(50%甲醇与IOOmM三氟乙酸水溶液的体积比为1:1);；如果毛细管电泳-DAD检测结果在检测波长为224nm处具有特征吸收峰，则证明饲料中含有三聚氰胺脲甲醛树脂，如果在检测波长为224nm处不具有特征吸收峰，则证明不含有三聚氰胺脲甲醛树脂。优选地，步骤(I)处理方式为称取2. Og (精确至0. Ig)饲料试样于50mL具塞塑料离心管中，加入2mL的四氢呋喃(THF)-水溶液，涡旋振荡2min后加入8mL甲醇在超声波清洗器中超声提取15min，超声结束后离心5min (4000r/min)，将上清液过滤至另一 50mL具塞塑料离心管中，再IOmL甲醇重复提取一次，合并上清液，氮吹浓缩至近干后用甲醇-水定容至2mL。过0. 22 ii m的滤膜，待电泳分析。优选地,步骤(3)分析方法Beckman P/ACE System MDQ, 二极管阵列检测器,工作站为32Karat ;进样3s50mbar，毛细管温度保持室温；实验前，依次用0. lmol/L的NaOH溶液、水和缓冲溶液(IOOmM三氟乙酸(TFA)/50%甲醇)冲洗毛细管5、2、2min，两次进样间用缓冲溶液冲洗2min。本发明的有益效果为(I)建立一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法，对乳品质量安全起到监督作用。(2)标样溶解采用以四氢呋喃(THF)-水(37:13，V/V)作为最佳配比溶剂，解决了三聚氰胺脲甲醛树脂难溶解的问题。(3)采用了四氢呋喃-/K，甲醇溶液作为三聚氰胺脲甲醛树脂的提取溶液，以涡旋和超声的混合提取方式，可以充分的提取样品中的树脂。(4)毛细管电泳采用的电解质为TFA-甲醇的时候，其峰形好，基线低。


图I为三聚氰胺脲甲醛树脂的电泳图；其中A电解质溶液为TFA-甲醇、B电解质溶液为TFA-乙腈。图2为三聚氰胺脲甲醛树脂的光谱图。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。I、仪器与样品I. I、仪器毛细管电泳-DADI. 2、样品奶牛饲料2、方法与结果2. I电解质溶液的选择对三聚氰胺脲甲醛树脂(MF)分别选用IOOmM三氟乙酸(TFA) -50%甲醇(体积比I: I)、乙酸/ACN (体积比I: I)为电解质溶液进行电泳。电泳图见图I。当选用TFA-甲醇的时候，峰形好，基线较低。因此选用IOOmM三氟乙酸(TFA)_50%甲醇作为电解质溶液。2. 2检测波长的选择 通过DAD 二极管阵列检测器全波长扫描图2可以得知，该化合物在224nm和273. 9nm处有特征吸收峰，为提高其测试灵敏度，选择224nm为检测波长。2. 3分析筛查方法评价-回收率、精密度和精确度对空白奶牛饲料样品分别在20、50、100浓度水平上进行添加，每个平行重复5次，测定其回收率，回收率见表1，三聚氰胺脲甲醛树脂在饲料的添加回收率44. 979T51. 22%，相对标准偏差为9. 39% 11. 61%。市售饲料添加三聚氰胺脲甲醛树脂的含量约为5%才能起到赋形剂的作用，因此该方法灵敏到完全能够起到筛查作用。表I三聚氰胺脲甲醛树脂在饲料中的添加回收率
权利要求
1.一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法，其特征是，包括以下步骤 (1)样品前处理 称取饲料试样于具塞塑料离心管中，加入体积比为37:13的四氢呋喃-水溶液，涡旋振荡后再加入甲醇超声提取，离心，将上清液过滤至另一具塞塑料离心管中，再加甲醇重复提取I次，合并上清液，氮吹浓缩至近干后用体积比1:1的甲醇-水定容过滤，待电泳分析； (2)三聚氰胺脲甲醛树脂的检测 采用毛细管电泳-DAD检测，检测波长为224nm,分离电压+15kv ;背景电解质溶液为体积比为I :1的IOOmM三氟乙酸/50%甲醇，如果毛细管电泳-DAD检测结果在检测波长为224nm处具有特征吸收峰，则证明饲料中含有三聚氰胺脲甲醛树脂，如果在检测波长为224nm处不具有特征吸收峰，则证明不含有三聚氰胺脲甲醛树脂。
2.如权利要求I所述的一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法，其特征是，所述步骤(I)前处理为称取2. Og饲料试样于50mL具塞塑料离心管中，加入2mL的四氢呋喃-水溶液，润旋振荡2min后加入8ml甲醇在超声波清洗器中超声提取15min,超声结束后离心5min，将上清液过滤至另一 50mL具塞塑料离心管中，再IOml甲醇重复提取一次，合并上清液，氮吹浓缩至近干后用甲醇-水定容至2mL，过0. 22 y m的滤膜，待电泳分析。
3.如权利要求I或2所述的一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法，其特征是，所述步骤(2)为进样3S50mbar，毛细管温度保持室温；检测前，依次用·0.lmol/L的NaOH溶液、水和IOOmM三氟乙酸/50%甲醇冲洗毛细管5、2、2min，两次进样间用IOOmM三氟乙酸/50%甲醇冲洗2min。
全文摘要
本发明公开了一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法。它首先称取饲料试样于具塞塑料离心管中，加入四氢呋喃-水溶液，涡旋振荡后再加入甲醇超声提取，离心，将上清液过滤至另一具塞塑料离心管中，再加甲醇重复提取1次，合并上清液，氮吹浓缩至近干后用甲醇-水定容过滤；然后采用毛细管电泳-DAD检测，如果在检测波长为224nm处具有特征吸收峰，则确认饲料中含有三聚氰胺脲甲醛树脂。本发明建立了一种快速筛查饲料中是否存在三聚氰胺脲甲醛树脂的方法，对乳品质量安全起到监督作用。
文档编号G01N1/28GK102721731SQ20121023652
公开日2012年10月10日 申请日期2012年7月10日 优先权日2012年7月10日
发明者吕潇, 李增梅, 梁京芸, 毛江胜, 苑学霞, 谷晓红, 赵善仓, 邓立刚, 郭长英, 陈业兵 申请人:山东省农业科学院中心实验室