专利名称：犬猫尿结石成分的快速检测分析方法
技术领域：
本发明涉及兽医诊断与分析检测领域，特别涉及一种犬猫尿结石成分的快速纟企测分析方法。
背景技术：
尿石症是尿路中的无机或有机盐类结晶的凝结物(如结石、积石或多量结晶等)刺激泌尿系黏膜而引起的出血、炎症和阻塞的一种疾病，是动物和人泌尿系统的一种常见多发病。据国内外研究数据统计，动物中的犬猫尿石
症的发病率为0.5-1.0%,而且治疗后两年内尿石症的复发率也多高达50-70%。因此，正确防治本病^艮有必要，这就要求对尿结石的组成成分进行分析，据此选择不同的防治方案。犬猫尿结石一般有以下几种草酸钙、磷酸铵镁、尿酸、碳酸钙、硅酸盐、磷酸钙、胱氨酸结石等，其中以前4种最常见，约占结石发生总量的95%以上。结石成分分析主要包括化学分析和物理分析，其中化学分析主要有定性和定量分析，而物理分析主要包括原子光镨、X射线衍射、红外光谱、热分析、显微镜技术等。这些分析技术大多需要高端的设备，专业的人员和较多的样品前处理要求，因而多用于科学研究上，在兽医临床实践上尚未得到应用。化学定性分析方法由于操作简便快速，无需特殊复杂的仪器设备，检测结果较为可靠，能够初步了解结石的成分，对临床的治疗和预防具有重要意义，而且费用低廉，很适于引入兽医临床，在结石成分分析中发挥应用。

发明内容
本发明的目的在于克服上述不足之处，提供一种操作简便、效果显著的犬猫尿结石成分的快速;f企测分析方法。本发明是通过以下技术方案来实现的
一种犬猫尿结石成分的快速检测分析方法，其特征在于将简单快速的化学定性分析方法应用于犬猫尿结石成分的判定；实施步骤如下第一步骤准备各种用于犬猫尿结石成分快速分析的试剂试剂1: 1N盐酸；取盐酸8.4ml，加入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀至刻度；
试剂2: 20%醋酸钠，取醋酸钠20g,加水使溶解成100ml;
试剂3:钼酸铵，取钼酸铵10g,加水使溶解成100ml;
试剂4: 10%碳酸钠，取无水碳酸钠10g，加水溶解至100ml;
试剂5:磷鴒酸，取磷钨酸lg,加水溶解至100ml;
试剂6: 5N氬氧化钠，取氢氧化钠20g,加水使溶解成100ml;
试剂7: 2g/L达旦黄，取达旦黄200mg,加水佳j容解成100ml;
试剂8:奈氏试剂，将24.4g氢氧化钾溶于内有70ml水的100ml容量瓶中，并冷却至室温；将10g碘化汞和7g碘化钾溶于10ml水中，然后慢慢注入容量瓶中，边加边摇动；加水至刻度，摇匀，放置2天后使用，试剂避光保存；
第二步骤将采集到的结石样本洗净、室温下干燥，在研钵中研成粉末；取结石粉末20-50mg，平均分装到5支玻管中，依次进行下列测试
(1 )碳酸盐在玻管中加入1N盐酸lml,如有气体放出，试管底部向上冒出气泡，或伴有嘶嘶声，即提示为碳酸盐；
(2) 草酸盐在上述已加了盐酸的玻管中加入20%醋酸钠10滴，如出现白色沉淀则提示有草酸盐的存在；
(3) 磷酸盐取尿石粉末试管，加入钼酸铵试剂10滴，放置片刻后加热，溶液出现黄色或黄色沉淀现象，提示有磷酸盐存在；
(4) 尿酸取尿石粉末试管1支，加入10%碳酸钠4滴，混匀，然后加入磷鴒酸试剂2滴，立即出现蓝色为尿酸阳性；
(5) 钙在玻管中加入1N盐酸lml， 振荡混合后，加入5N氩氧化钠溶液3滴，若出现白色沉淀则提示4丐盐存在；
(6 )镁取上述检测钙的溶液中加2g/L达旦黄3滴，在白色背景下，出现血红色沉淀者为镁盐阳性；
(7 ) 4妄在玻管中加入1N盐酸lml, 振荡混合后，加入5N氢氧化钠
5溶液3滴，使其呈偏石威性，用试纸测试获知，再加入奈氏试剂2-3滴，如显黄 色或红棕色沉淀为铵阳性；
第三步骤测试结果分析判定根据检测离子是否为阳性，判定其结石 组成；结石样品中磷酸盐、铵、镁都为阳性，即判定为磷酸铵镁结石；草酸 盐、钙都为阳性，即判定为草酸钙结石。
本发明的有益效果是本发明方法科学合理，操作简单，检测分析快速、 效率高，成本低，有效节约资源；为犬猫尿结石病的预防和治疗提供了有效 的前提，且适用范围广。
具体实施例方式
以下结合较佳实施例，对依据本发明提供的具体实施方式
详述如下
一种犬猫尿结石成分的快速检测分析方法，其特征在于将简单快速的化 学定性分析方法应用于犬猫尿结石成分的判定；实施步骤如下
第一步骤准备各种用于犬猫尿结石成分快速分析的试剂(选择部分检 测试剂来分析临床最常见的草酸4丐、磷酸铵镁、尿酸、碳酸钩结石)
试剂1: 1N盐酸；取盐酸8.4ml，加入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀至 刻度；
试剂2: 20%醋酸钠，耳又醋酸钠20g,加水使溶解成100ml;
试剂3:钼酸《妄，耳又钼酸4妄10g,加水佳_溶解成100ml;
试剂4: 10%碳酸钠，取无水碳酸钠10g,加水溶解至100ml;
试剂5:磷鴒酸，取磷鵠酸lg,加水溶解至100ml;
试剂6: 5N氢氧化钠，耳又氢氧化钠20g,加水4吏溶解成100ml;
试剂7: 2g/L达旦黄，取达旦黄200mg，加水使溶解成100ml;
试剂8:奈氏试剂，将24.4g氢氧化钾溶于内有70ml水的100ml容量瓶 中，并冷却至室温；将10g碘化汞和7g碘化钾溶于10ml水中，然后慢慢注 入容量瓶中，边加边摇动；加水至刻度，摇匀，放置2天后使用，试剂避光 保存；
第二步骤将采集到的结石样本洗净、室温下干燥，在研钵中研成粉末； 取结石粉末20-50mg (绿豆大小)，平均分装到5支玻管中，依次进行下列测试
(1 )碳酸盐在玻管中加入IN盐酸lml,如有气体力文出，试管底部向 上冒出气泡，或伴有嘶嘶声，即提示为碳酸盐；
(2) 草酸盐在上述已加了盐酸的玻管中加入20%醋酸钠10滴，如出 现白色沉淀则提示有草酸盐的存在；
(3) 磷酸盐取尿石粉末试管，加入钼酸铵试剂10滴，放置片刻后加 热，溶液出现黄色或黄色沉淀现象，提示有磷酸盐存在；
(4) 尿酸取尿石粉末试管l支，加入10%碳酸钠4滴，混匀，然后 加入磷鴒酸试剂2滴，立即出现蓝色为尿酸阳性；
(5) 钙在玻管中加入1N盐酸lml, 振荡混合后，加入5N氬氧化钠 溶液3滴，若出现白色沉淀则提示4丐盐存在；
(6) 镁取上述检测4丐的溶液中加2g/L达旦黄3滴，在白色背景下，出 现血红色沉淀者为镁盐阳性；
(7铵在玻管中加入1N盐酸lml, 振荡混合后，加入5N氢氧化钠溶 液3滴，使其呈偏碱性，用试纸测试获知，再加入奈氏试剂2-3滴，如显黄色 或红棕色沉淀为4妄阳性；
第三步骤测试结果分析判定根据检测离子是否为阳性，判定其结石 组成；结石样品中磷酸盐、铵、镁都为阳性，即判定为磷酸铵镁结石；草酸 盐、钙都为阳性，即判定为草酸钓结石。
一般来说，结石成分都较单一，但也存在少量的混合结石存在，例如磷 酸盐和钙都为阳性的情况下，可能就有磷酸钙成分的存在，但其在结石中所 占的比例不大。
临床检测试验
应用实例1
一两岁京巴犬就诊时发现，精神沉郁，弓背收腹屡屡作出排尿姿势，呕 吐，尿频，尿淋漓，有血尿，时而呻吟，全身颤抖。初步诊断怀疑尿石症， 经X光检查，膀胱与尿道出现结石。手术取石后，应用上述试剂及检测方法 对结石进行了成分分析，草酸盐阳性，钾阳性，磷酸盐弱阳性，碳酸盐、尿
7酸、镁和铵检测阴性，结果判定为草酸钙结石。建议以后使用碱化日粮来调
整尿液pH值，如Hill's犬用u/d日粮。手术后以年随访，犬身体健康，未再 发生结石。结石成分后来经X射线衍射、红外光谱进一步鉴定，证实为草酸 钙，与采用本发明的快速纟企测分析方法结果完全一致。 应用实例2
取收集自宠物诊所的30例尿结石，应用上述试剂及检测方法进行分析， 判定结石成分。然后应用X射线衍射、红外光谱进一步鉴定。结果发现，30 例犬猫尿结石中含草酸4丐13例，磷酸铵镁15例，尿酸1例，其他类型结石1 例。经与X射线衍射、红外光i普结果比较发现，化学定性分析方法准确可靠， 对结石主要成分的判定与X射线衍射、红外光谱结果完全相符，为改善动物 生存环境、有效防治动物的尿石症提供了可靠的依据。
本发明方法简单快速，化学定性分析方法准确可靠。
上述参照实施例对犬猫尿结石成分的快速检测分析方法进行的详细描 述，是说明性的而不是限定性的，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和 修改，应属本发明的保护范围之内。
权利要求
1、一种犬猫尿结石成分的快速检测分析方法，其特征在于将简单快速的化学定性分析方法应用于犬猫尿结石成分的判定；实施步骤如下第一步骤准备各种用于犬猫尿结石成分快速分析的试剂试剂11N盐酸；取盐酸8.4ml，加入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀至刻度；试剂220％醋酸钠，取醋酸钠20g，加水使溶解成100ml；试剂3钼酸铵，取钼酸铵10g，加水使溶解成100ml；试剂410％碳酸钠，取无水碳酸钠10g，加水溶解至100ml；试剂5磷钨酸，取磷钨酸1g，加水溶解至100ml；试剂65N氢氧化钠，取氢氧化钠20g，加水使溶解成100ml；试剂72g/L达旦黄，取达旦黄200mg，加水使溶解成100ml；试剂8奈氏试剂，将24.4g氢氧化钾溶于内有70ml水的100ml容量瓶中，并冷却至室温；将10g碘化汞和7g碘化钾溶于10ml水中，然后慢慢注入容量瓶中，边加边摇动；加水至刻度，摇匀，放置2天后使用，试剂避光保存；第二步骤将采集到的结石样本洗净、室温下干燥，在研钵中研成粉末；取结石粉末20-50mg，平均分装到5支玻管中，依次进行下列测试(1)碳酸盐在玻管中加入1N盐酸1ml，如有气体放出，试管底部向上冒出气泡，或伴有嘶嘶声，即提示为碳酸盐；(2)草酸盐在上述已加了盐酸的玻管中加入20％醋酸钠10滴，如出现白色沉淀则提示有草酸盐的存在；(3)磷酸盐取尿石粉末试管，加入钼酸铵试剂10滴，放置片刻后加热，溶液出现黄色或黄色沉淀现象，提示有磷酸盐存在；(4)尿酸取尿石粉末试管1支，加入10％碳酸钠4滴，混匀，然后加入磷钨酸试剂2滴，立即出现蓝色为尿酸阳性；(5)钙在玻管中加入1N盐酸1ml，振荡混合后，加入5N氢氧化钠溶液3滴，若出现白色沉淀则提示钙盐存在；(6)镁取上述检测钙的溶液中加2g/L达旦黄3滴，在白色背景下，出现血红色沉淀者为镁盐阳性；(7)铵在玻管中加入1N盐酸1ml，振荡混合后，加入5N氢氧化钠溶液3滴，使其呈偏碱性，用试纸测试获知，再加入奈氏试剂2-3滴，如显黄色或红棕色沉淀为铵阳性；第三步骤测试结果分析判定根据检测离子是否为阳性，判定其结石组成；结石样品中磷酸盐、铵、镁都为阳性，即判定为磷酸铵镁结石；草酸盐、钙都为阳性，即判定为草酸钙结石。
全文摘要
本发明涉及一种犬猫尿结石成分的快速检测分析方法，其特征在于将简单快速的化学定性分析方法应用于犬猫尿结石成分的判定；步骤如下第一步骤准备各种用于犬猫尿结石成分快速分析的试剂。第二步骤将采集到的结石样本洗净、室温下干燥，在研钵中研成粉末；取结石粉末20-50mg，平均分装到5支玻管中，依次进行犬猫尿结石中所含碳酸盐、磷酸盐、尿酸、钙、铵成分测试。第三步骤测试结果分析判定根据检测离子是否为阳性，判定其结石组成；结石样品中磷酸盐、铵、镁都为阳性，即判定为磷酸铵镁结石；草酸盐、钙都为阳性，即判定为草酸钙结石。该方法科学合理，操作简单，检测分析快速、效率高，成本低；为犬猫尿结石病的有效防治提供了前提条件。
文档编号G01N31/00GK101655485SQ20081005421
公开日2010年2月24日 申请日期2008年8月22日 优先权日2008年8月22日
发明者王连民, 王金勇 申请人:天津生机集团股份有限公司