专利名称：冠脉通片的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗冠心病心绞痛中药的质量控制方法，属于制药领域。
背景技术：
冠脉通片执行部颁标准，具有活血化瘀、芳香开窍、补益肝肾作用，用于肝肾不足， 痰瘀阻络之胸痹，表现为心悸胸闷、胸痛头晕；以及冠心病心绞痛见以上症候者。该药由中药材枸杞子、何首乌、淫羊藿、红花、石菖蒲、丹参、桑寄生、冰片组成；其中丹参、冰片、何首乌、淫羊藿均是起主要治疗作用的药材。现有冠脉通片部颁标准质量控制方法中，缺少对这些起主要治疗作用药材的质量控制方法，因此，现有技术在全面评价冠脉通片质量优劣方面存在局限性。本发明克服现有技术的不足，完善冠脉通片的质量控制标准，增加了丹参、 冰片含量测定的质量控制方法以及何首乌、淫羊藿薄层色谱定性鉴别方法，使本复方制剂质量控制标准进一步完善。

发明内容
本发明目的是克服现有技术不足，完善并制定冠脉通片的质量控制方法，增加了丹参、冰片含量测定的质量控制方法以及何首乌、淫羊藿薄层色谱定性鉴别方法，使质量检测方法更完善，能够有效控制冠脉通片的产品质量。本发明通过下述技术方案得以实现1.冠脉通片中丹参用高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)含量测定a.色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 磷酸溶液-乙腈为流动相，二组份的配比为74 沈或75 25 ；检测波长为270-290nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。b.对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量，加70% -80%甲醇制成每 Iml含丹酚酸B为0. 02mg-0. 06mg的溶液，摇勻，制成对照品溶液；c.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，混勻，精密称取 0. lg-0. 3g，精密加入70% -80%甲醇25ml-75ml，称定重量，超声提取30-60分钟，放冷，用 70 % -80 %甲醇补足减失的重量，摇勻，过滤，取续滤液，通过0. 45 μ m的微孔滤膜，制成供试品溶液；d.高效液相色谱法测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20 μ 1，注入液相色谱仪，测定。以冠脉通片除去包衣，每克含丹参按丹酚酸B计，不得少于7. Omg/克。2.冠脉通片中冰片用气相色谱法(中国药典2010年版一部附录VIE)含量测定a.色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇为固定相的毛细管柱，柱温为140°C ； 进样口温度160-200°C;检测器温度为200-250°C;分流进样，分流比1 10;采用内标物法测定；理论板数按龙脑峰计算应不低于2000 ；b.内标物溶液的制备精密称取水杨酸甲酯适量，加乙酸乙酯制成浓度为CN 102526380 A5. 0-10. Omg/ml的溶液；作为内标物溶液；c.对照品溶液的制备精密称取龙脑对照品适量，置IOml量瓶中，加内标物溶液 lml，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇勻，制成每Iml含0. 50-1. OOmg的溶液，作为对照品溶液；d.供试品溶液的制备精密量取内标物溶液与乙酸乙酯液，配制成1 9的混合溶液；取冠脉通片适量，除去包衣，研细，混勻，精密称取0. 5g-l. 5g，精密加入上述混合溶液15ml-30ml，称定重量，超声提取30-60分钟，凉至室温，称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，摇勻，静置，取上清液，过滤，取续滤液，通过0. 45 μ m的微孔滤膜，制成供试品溶液；e.气相色谱法测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-3 μ 1，注入气相色谱仪，测定。以冠脉通片除去包衣，每克含冰片按龙脑计，不得少于6. 5mg/克。3.冠脉通片中何首乌用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别a.对照药材溶液的制备取何首乌对照药材0. 2-lg，加乙醇或乙酸乙酯的任一种 1050ml，加热回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种l-5ml使溶解，制成对照药材溶液；b.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，取1.5-3. Og，加乙醇或乙酸乙酯的任一种30-120ml，加热回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种l_5ml使溶解，制成供试品溶液；c.薄层色谱法试验吸取上述对照药材和供试品两种溶液各6-20 μ 1，分别点于同一硅胶G或GF2M任一种薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，三组份的配比为 15 2 1或16 3 2，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；4.冠脉通片中淫羊藿用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别a.对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品，加甲醇或乙醇制成每Iml含0. 5-2mg 的溶液，作为对照品溶液；b.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，取1.5-3. 0g，置250ml平底烧瓶中以50ml乙酸乙酯超声提取30-60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙醇的任一种l-5ml使溶解，制成供试品溶液；c.薄层色谱法试验吸取上述对照品溶液和供试品溶液各5-201，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H或GF2M任一种薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水 5-10°C以下放置的上层溶液为展开剂，三组份的配比为1.3 1 1或1.5 1 1，展开， 取出，晾干，喷以5-10%三氯化铝试液，在100-110°C加热烘干2-10分钟，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。本发明所述冠脉通片部颁标准为‘中药成方制剂第十九册WS3-B-3619-98’所载标准。本发明提供了丹参、冰片含量测定的质量控制方法以及何首乌、淫羊藿薄层色谱定性鉴别方法，方法简便易行，可作为冠脉通片质量控制指标。
具体实施方式
实施例处方枸杞子IOOg何首乌IOOg 淫羊藿IOOg 红花20g石菖蒲IOOg丹参IOOg 桑寄生IOOg冰片6g取组方中何首乌50g、丹参50g粉碎成细粉，备用；组方中枸杞子、桑寄生、淫羊藿、 红花、石菖蒲及剩余的丹参、何首乌，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成相对密度1.43-1. 45 (60士5°C热测)的浸膏；浸膏加入何首乌、 丹参细粉及适量辅料，混勻，制成颗粒，加入冰片及适量润滑剂，混勻，压制成713片，包衣， 即得。该药物的质量控制方法包括下列步骤1.冠脉通片中丹参用高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)含量测定a.色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 磷酸溶液-乙腈为流动相，二组份的配比为74 26 ；检测波长为^6nm。理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000。b.对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量，加75%甲醇制成每Iml含丹酚酸B为0. 03mg的溶液，摇勻，制成对照品溶液；c.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，混勻，精密称取0.2g，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，超声提取40分钟，放冷，用75%甲醇补足减失的重量，摇勻，过滤，取续滤液，通过0. 45 μ m的微孔滤膜，制成供试品溶液；d.高效液相色谱法测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定。以冠脉通片除去包衣，每克含丹参按丹酚酸B计，不得少于7. Omg/克。2.冠脉通片中冰片用气相色谱法(中国药典2010年版一部附录VIE)含量测定a.色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇为固定相的毛细管柱，柱温为140°C ； 进样口温度180°C ；检测器温度为220°C ；分流进样，分流比1 10;采用内标物法测定；理论板数按龙脑峰计算应不低于2000 ；b.内标物溶液的制备精密称取水杨酸甲酯适量，加乙酸乙酯制成浓度为5. Omg/ ml的溶液；作为内标物溶液；c.对照品溶液的制备精密称取龙脑对照品适量，置IOml量瓶中，加内标物溶液 lml，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇勻，制成每Iml含0. 78mg的溶液，作为对照品溶液；d.供试品溶液的制备精密量取内标物溶液与乙酸乙酯液，配制成1 9的混合溶液；取冠脉通片适量，除去包衣，研细，混勻，精密称取l.Og，精密加入上述混合溶液 20ml，称定重量，超声提取40分钟，凉至室温，称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量， 摇勻，静置，取上清液，过滤，取续滤液，通过0. 45 μ m的微孔滤膜，制成供试品溶液；e.气相色谱法测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2 μ 1，注入气相色谱仪，测定。以冠脉通片除去包衣，每克含冰片按龙脑计，不得少于6. 5mg/克。3.冠脉通片中何首乌用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别a.对照药材溶液的制备取何首乌对照药材0.3g，加乙醇50ml，加热回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇3ml使溶解，制成对照药材溶液；b.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，取2. lg，加乙醇100ml，加热回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇3ml使溶解，制成供试品溶液；C.薄层色谱法试验吸取上述对照药材和供试品两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 2 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置 365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；4.冠脉通片中淫羊藿用薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)鉴别a.对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；b.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，取2. lg，置250ml平底烧瓶中以50ml乙酸乙酯超声提取40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，制成供试品溶液；c.薄层色谱法试验吸取上述对照品溶液5-10μ1，供试品溶液10_15μ1， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水 (1.3 1 1)10°C以下放置的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝试液，在105°C加热烘干2-5分钟，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
权利要求
1.冠脉通片的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材枸杞子、何首乌、淫羊藿、 红花、石菖蒲、丹参、桑寄生、冰片组成，其特征在于该方法包括下列步骤(1)该药物中药材丹参用高效液相色谱法含量测定a.色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.磷酸溶液-乙腈为流动相，二组份的配比为74 沈或75 25 ；检测波长为270-290nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。b.对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量，加70%-80%甲醇制成每Iml含丹酚酸B为0. 02mg-0. 06mg的溶液，摇勻，制成对照品溶液；c.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，混勻，精密称取0.lg-0. 3g， 精密加入70% -80%甲醇25ml-75ml，称定重量，超声提取30-60分钟，放冷，用70% -80% 甲醇补足减失的重量，摇勻，过滤，取续滤液，通过0. 45 μ m的微孔滤膜，制成供试品溶液；d.高效液相色谱法测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μ 1，注入液相色谱仪，测定。以冠脉通片除去包衣，每克含丹参按丹酚酸B计，不得少于7. Omg/克。(2)该药物中冰片用气相色谱法含量测定a.色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇为固定相的毛细管柱，柱温为140°C；进样口温度160-200°C ；检测器温度为200-250°C ；分流进样，分流比1 10;采用内标物法测定；理论板数按龙脑峰计算应不低于2000 ；b.内标物溶液的制备精密称取水杨酸甲酯适量，加乙酸乙酯制成浓度为 5. 0-10. Omg/ml的溶液；作为内标物溶液；c.对照品溶液的制备精密称取龙脑对照品适量，置IOml量瓶中，加内标物溶液1ml， 加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，摇勻，制成每Iml含0. 50-1. OOmg的溶液，作为对照品溶液；d.供试品溶液的制备精密量取内标物溶液与乙酸乙酯液，配制成1 9的混合溶液；取冠脉通片适量，除去包衣，研细，混勻，精密称取0. 5g-l. 5g，精密加入上述混合溶液 15ml-30ml，称定重量，超声提取30-60分钟，凉至室温，称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，摇勻，静置，取上清液，过滤，取续滤液，通过0. 45 μ m的微孔滤膜，制成供试品溶液；e.气相色谱法测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1_3μ1，注入气相色谱仪，测定。以冠脉通片除去包衣，每克含冰片按龙脑计，不得少于6. 5mg/克。
2.根据权利要求1所述冠脉通片的质量控制方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)该药物中药材何首乌用薄层色谱法鉴别a.对照药材溶液的制备取何首乌对照药材0.2-lg，加乙醇或乙酸乙酯的任一种 10-50ml，加热回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种l_5ml使溶解，制成对照药材溶液；b.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，取1.5-3.Og，加乙醇或乙酸乙酯的任一种30-120ml，加热回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇或乙酸乙酯的任一种l_5ml使溶解，制成供试品溶液；c.薄层色谱法试验吸取上述对照药材和供试品两种溶液各6-20μ 1，分别点于同一硅胶G或GF2M任一种薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，三组份的配比为·15 2 1或16 3 2，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)该药物中药材淫羊藿用薄层色谱法鉴别a.对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品，加甲醇或乙醇制成每Iml含0.5-2mg的溶液，作为对照品溶液；b.供试品溶液的制备取冠脉通片适量，除去包衣，研细，取1.5-3.0g，置250ml平底烧瓶中以50ml乙酸乙酯超声提取30-60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙醇的任一种 l-5ml使溶解，制成供试品溶液；c.薄层色谱法试验吸取上述对照品溶液和供试品溶液各5-20μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H或GF2M任一种薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水5-10°C 以下放置的上层溶液为展开剂，三组份的配比为1.3 1 1或1.5 1 1，展开，取出， 晾干，喷以5-10%三氯化铝试液，在100-110°C加热烘干2-10分钟，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
全文摘要
本发明涉及由中药材枸杞子、何首乌、淫羊藿、红花、石菖蒲、丹参、桑寄生、冰片制成的一种中药复方制剂冠脉通片的质量控制方法，其特征是利用高效液相色谱法、气相色谱法及薄层色谱法对该中药复方制剂中药材丹参、冰片进行含量测定以及对何首乌、淫羊藿做薄层鉴别。该方法能够有效控制冠脉通片的质量，可作为该药质量控制和考察工艺可靠性的方法。
文档编号G01N30/90GK102526380SQ201010608589
公开日2012年7月4日 申请日期2010年12月28日 优先权日2010年12月28日
发明者苗淑杰, 贾勋 申请人:天津同仁堂集团股份有限公司