专利名称：戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种抗体检测试剂盒，具体涉及戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒。
背景技术：
戊型肝炎病毒(h印atitis E virus，戊型肝炎)是非甲非乙型急性肝炎的病原体， 主要经粪口途径传播，也有报道可以通过血液传播。人对戊型肝炎普遍易感，病人发病症状严重，病死率高，青壮年戊肝病死率可达1 % 2 %，远较其它各型肝炎高，孕妇戊肝病的死亡率可高达20%左右，给人类健康造成严重威胁。ELISA检测法是目前用于检测血清戊型肝炎抗体最常用的一种方法，其中以间接 ELISA用途最广，现在已有商品化的试剂盒。用于检测戊型肝炎的抗原有3种即组织培养全病毒抗原，合成肽抗原和表达抗原，目前最受关注的是表达抗原。常用的表达抗原有 0RF22的表达抗原，0RF23的表达抗原以及同时含有0RF22和0RF23编码产物的重组表达抗原。Uchida等应用结构基因0RF22区中部的一段重组表达蛋白作为抗原的抗戊型肝炎 ELISA法检测52例戊肝病人血清，戊型肝炎阳性率为67. 31% .Tsarve等构建了含有巴基斯坦戊型肝炎SAR255株完整戊型肝炎0RF22基因组的重组杆状病毒63222IV22，ELISA法监测接种戊型肝炎的8种灵长类动物的血清学转变，证实应用此法检测戊型肝炎具有高度灵敏性和特异性。国内何志强等利用大肠杆菌表达的部分0RF22蛋白，建立的双抗原夹心EL ISA方法，该方法与利用同一抗原的间接ELISA比较，结果符合良好，且s/co (OD/cutoff) 比值较间接法更高。但ELISA法操作复杂、检测时间长，需要对待测样品进行稀释、温育、分离、洗涤和显色等操作，大概需要用两个小时以上。

实用新型内容本实用新型的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种可以快速定性检测血清样本中的戊型肝炎病毒IgG抗体的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒。为了实现上述目的，本实用新型提供的技术方案为戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒，检测试剂盒由盒体和盒盖组成，盒体内设置有铝箔袋；所述铝箔袋内设置有试纸条；所述试纸条由反应板切割而成；所述试纸条宽4mm ；所述反应板由胶板、反应膜、 鼠抗人IgG单抗金结合物垫、粗纤维滤纸和样品垫组成；所述反应膜是由用磷酸盐缓冲液稀释过的重组HEV-^Vg和用磷酸盐缓冲液稀释过的羊抗鼠IgG抗体包被的；所述反应膜设置在胶板上；所述胶板上部设置有1. 5cm宽的粗纤维滤纸；粗纤维滤纸的下部压住反应膜；所述胶板下部依次设置有鼠抗人IgG单抗金结合物垫和样品垫；所述鼠抗人IgG单抗金结合物垫宽0. 9cm ；所述鼠抗人IgG单抗金结合物垫的上部压住反应膜；所述样品垫位于鼠抗人 IgG单抗金结合物垫的下部；所述样品垫的上部压住鼠抗人IgG单抗金结合物垫。本实用新型的有益效果为戊型肝炎病毒IgG抗体检测试剂盒具有快速、简便、 准确和灵敏度高的特点，整个操作时间仅需20分钟就可以判读结果。胶体金快速检测试纸条，以多表位的重组抗原为原料，具有操作更加简便，成本低廉，特异性好，灵敏度高的特点，可单份检测，易于普及，对于戊型肝炎病毒IgG的检测和控制效果明显。

图1为本实用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的盒体示意图。图2为本实用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的铝箔袋示意图。图3为本实用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的未切割前的反应板示意图。图4为本实用新型提供的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的切割后试纸条的示意图。其中，1为胶板，2为反应膜，3为粗纤维滤纸，4为鼠抗人IgG单抗金结合物垫，5为
样品垫。
具体实施方式
实施例1戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒，检测试剂盒由盒体和盒盖组成，盒体内设置有铝箔袋；铝箔袋内设置有试纸条；试纸条由反应板切割而成；试纸条宽4mm ；反应板由胶板1、反应膜2、鼠抗人IgG单抗金结合物垫4、粗纤维滤纸3和样品垫5组成；反应膜2是由用磷酸盐缓冲液稀释过的重组HEV-Ag和用磷酸盐缓冲液稀释过的羊抗鼠IgG 抗体包被的；反应膜2设置在胶板1上；胶板1上部设置有1. 5cm宽的粗纤维滤纸3 ；粗纤维滤纸3的下部压住反应膜2 ；胶板1下部依次设置有鼠抗人IgG单抗金结合物垫4和样品垫5 ；鼠抗人IgG单抗金结合物垫4宽0. 9cm ；鼠抗人IgG单抗金结合物垫4的上部压住反应膜2 ；样品垫5位于鼠抗人IgG单抗金结合物垫4的下部；样品垫5的上部压住鼠抗人 IgG单抗金结合物垫4。一、生产工艺条件的确定1、反应膜包被条件的优化1. 1检测线包被浓度和胶体金标记鼠抗人IgG稀释比例的选择按照上述确定好的标记条件进行标记，将其体积浓缩至原体积(原体积以胶体金体积计算)的1/10，再以不同的稀释比例稀释浓缩液，用稀释液浸泡金标垫，1.5ml/条，干燥后与以不同检测线包被浓度，0. 1 μ 1/mm的包被量包被好的戊型肝炎反应膜进行配对，检测内控血清。实验方案如表1，实验结果如表2、3:表1实验方案设计[0019]
权利要求1.戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒，检测试剂盒由盒体和盒盖组成，其特征在于盒体内设置有铝箔袋；所述铝箔袋内设置有试纸条；所述试纸条由反应板切割而成；所述试纸条宽4mm ；所述反应板由胶板、反应膜、鼠抗人IgG单抗金结合物垫、粗纤维滤纸和样品垫组成；所述反应膜是由用磷酸盐缓冲液稀释过的重组HEV-Ag和用磷酸盐缓冲液稀释过的羊抗鼠IgG抗体包被的；所述反应膜设置在胶板上；所述胶板上部设置有1. 5cm 宽的粗纤维滤纸；粗纤维滤纸的下部压住反应膜；所述胶板下部依次设置有鼠抗人IgG单抗金结合物垫和样品垫；所述鼠抗人IgG单抗金结合物垫宽0. 9cm ；所述鼠抗人IgG单抗金结合物垫的上部压住反应膜；所述样品垫位于鼠抗人IgG单抗金结合物垫的下部；所述样品垫的上部压住鼠抗人IgG单抗金结合物垫。
专利摘要本实用新型公开了一种戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒，包括硝酸纤维素膜检测线包被的重组抗原HEV-Ag、质控线上包被的羊抗鼠IgG抗体和金标垫上包被的由胶体金标记的鼠抗人IgG单抗，所述重组戊型肝炎病毒抗原浓度大于2mg/ml，用SDS-PAGE测定；所述羊抗鼠IgG抗体浓度大于4mg/ml；所述鼠抗人IgG单抗浓度大于2mg/ml，用SDS-PAGE测定，上样量在10μl条件下为两条带。本实用新型的有益效果为戊型肝炎病毒IgG抗体检测试剂盒具有快速、简便、准确和灵敏度高的特点，整个操作时间仅需20分钟就可以判读结果。胶体金快速检测试纸条，以多表位的重组抗原为原料，具有操作更加简便，成本低廉，特异性好，灵敏度高的特点，可单份检测，易于普及，对于戊型肝炎病毒IgG的检测和控制效果明显。
文档编号G01N33/531GK202196065SQ20112027511
公开日2012年4月18日 申请日期2011年7月29日 优先权日2011年7月29日
发明者李习荣 申请人:北京中检安泰诊断科技有限公司