专利名称：一种透骨草配方颗粒的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种透骨草配方颗粒的薄层色谱鉴别方法和含量测定方法，属于中药质量检测领域。
背景技术：
透骨草配方颗粒为风仙花科植物风仙Impatiens balsamina L.的全草经加工制成的配方颗粒，气微、味甘、苦，具有祛风、除湿、活血、通经、软坚、舒筋、消肿、止痛等功效，主要用于风湿痹痛，筋骨挛缩，寒湿脚气，疱癣肿毒等病症的治疗。中药配方颗粒是以符合炮制规范的单味中药饮片为原料，采用现代制药工业的先进工艺和方法，经提取、浓缩、干燥、制粒制成一定规格供医疗机构临床配方使用的制成品，是中药饮片的一种补充形式，可供临床医生代替中药饮片使用，变传统中药汤剂的大包饮片用砂锅合煎、过滤饮服等繁杂操作为规范化工业大生产、小包装、水冲即服。与传统中药饮片相比，工业化批量生产的中药配方颗粒，品质均一，依据质量标准检测的结果(数据和图谱)重现性好，既保持了原中药饮片的药性、药味和药效，又具有不需煎煮，疗效确切，安全方便等优点，是传统中药饮片与时俱进的产物，是“源于饮片，高于饮片”的现代中药汤齐U。中药配方颗粒不仅用于中医临床配方，而且还可用作中成药的原料药品、用于保健食品、食品、日用化妆品、精细化工品、兽用药品等方面。它将成为介于中药饮片和中成药之间的一个新兴产业。与传统的中药煎剂相比，中药配方颗粒具有免煎易服，易储存，携带方便等优点。但中药配方颗粒经过一系列工序的加工后已失去药材的外形特征，难以靠性状鉴别来对药材进行鉴定，且在其质量控制上也与原药材有所不同。薄层色谱法操作简单，方便，适用于中药材及各种中药制剂的定性鉴别，高效液相色谱法灵敏度高，适用于各种制剂的定量分析。本发明采用薄层色谱法对透骨草配方颗粒进行定性鉴别，同时采用高效液相色谱法对其中的茶多酚类成分原儿茶酸进行含量测定，旨在建立一种透骨草配方颗粒的质量检测方法，该方法可用于透骨草配方颗粒的质量控制，对保证产品质量的稳定性及临床用药的有效性与安全性具有重要意义。

发明内容
本发明的目的在于提供透骨草配方颗粒的薄层色谱鉴别方法及高效液相含量测定方法。[薄层鉴别]取本品粉末0.5g，加甲醇20ml，超声30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇1.0ml使溶解，作为供试品溶液。另取透骨草对照药材粗粉3.0g,加水50ml，煮沸30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液3.0 μ 1、供试品溶液2.0 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(7: 2.5: 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。[含量测定]照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.2%磷酸(10: 90)为流动相，DAD检测器检测，检测波长:260nm，柱温25°C，流速:lml/min。对照品溶液的制备精密称取原儿茶酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含原儿茶酸11.06 μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粉末约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10μ 1、供试品溶液10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明的优点在于方法简单、准确，灵敏度高，精密度、稳定性好，采用HPLC法测定透骨草配方颗粒中原儿茶酸的含量，峰形好，分离度高，可作为透骨草配方颗粒的质量控制和考察工艺稳定性的有效技术手段，对提闻广品质量具有重大意义。
具体实施例方式实施例1:透骨草配方颗粒的薄层色谱鉴别[薄层鉴别]取本品粉末0.5g，加甲醇20ml，超声30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇1.0ml使溶解，作为供试品溶液。另取透骨草对照药材粗粉3.0g,加水50ml，煮沸30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液3.0 μ 1、供试品溶液2.0 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(7: 2.5: 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。实施例2:透骨草配方颗粒的含量测定方法[含量测定]照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定；1、仪器与试药(I)仪器:Agilent 1100高效液相色谱仪，DAD检测器，四元梯度泵，G2170AA数据
处理系统。(2)试药:乙腈为色谱纯试剂(一级)，水为双蒸水，其它试剂均为分析纯。原儿茶酸对照品(批号:100080-200707)购于中国药品生物制品检定所。2、实验条件(I)色谱条件:色谱柱:Agilent Zorbax Extend C18 (4.6mmX 250mm, 5 μ m)柱；流动相:乙腈-0.2 %磷酸溶液(10: 90);检测波长:260nm ;柱温:25°C ;流速:1.0ml/min。3、方法学考察(I)线性范围的考察:分别精密吸取对照品溶液(每Iml含原儿茶酸11.06μ g)2y 1、4μ 1、6μ 1、8μ 1、10μ1，注入液相色谱仪进行色谱测定，按上述色谱条件测定峰面积，并以峰面积(Y)对进样量(X)进行线性回归，得标准曲线。
Y = 34.3842220X+5.0426544，r = 0.99923 ；表明原儿茶酸在22.12-110.6ng范围内呈线性关系，结果见表I。表I原儿茶酸对照品测定结果
权利要求
1.一种透骨草配方颗粒的质量检测方法，该方法包括: (1)薄层色谱鉴别方法，和 (2)高效液相色谱法含量测定方法。
2.权利要求1所述透骨草配方颗粒的质量检测方法，其中所述薄层色谱鉴别方法为: 供试品溶液配制，取透骨草配方颗粒粉末0.5g，加甲醇20ml，超声30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇1.0ml使溶解，作为供试品溶液； 对照品溶液配制，另取透骨草对照药材粗粉3.0g,加水50ml，煮沸30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液； 照中国药典2010年版一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液3.0 μ 1、供试品溶液2.0μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(7: 2.5: 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.权利要求1所述透骨草配方颗粒的质量检测方法，其中所述高效液相色谱法含量测定方法为: 色谱条件，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.2%磷酸(10: 90)为流动相，DAD检测器检测，检测波长:260nm，柱温25°C，流速:lml/min ； 对照品溶液的制备，精密称取原儿茶酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含原儿茶酸.11.06 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备，取透骨草配方颗粒粉末约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法，分别精密吸取对照品溶液10 μ 1、供试品溶液10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
一种透骨草配方颗粒的质量检测方法，该方法包括薄层色谱鉴别方法和含量测定方法。采用薄层色谱法对透骨草配方颗粒进行定性鉴别，同时采用高效液相色谱法对其中的茶多酚类成分原儿茶酸进行含量测定，建立一种透骨草配方颗粒的质量检测方法，使产品质量得到了有效控制。
文档编号G01N30/02GK103105450SQ20121033119
公开日2013年5月15日 申请日期2012年9月7日 优先权日2012年9月7日
发明者涂瑶生, 谭登平, 孙冬梅, 程学仁, 刘法锦, 毕晓黎 申请人:广东省中医研究所, 广东一方制药有限公司