专利名称：一种测定烟用添加剂中山梨酸含量的方法
技术领域：
本发明属于烟用添加剂理化检验技术领域，具体涉及一种运用气相色谱/质谱选择离子法测定烟用添加剂中山梨酸含量的方法。
背景技术：
山梨酸(2，4-己二烯酸)，化学式C6HO2，广泛应用于食品、饮料、烟草、农药、化妆品等行业。山梨酸的防腐作用是同类产品苯甲酸的5 10倍。由于它可通过多种途径影响环境而造成污染，尤其是在食品中的安全问题近年来引起了人们的高度关注，国家对其使用有严格的限量标准，过量使用会对入体产生危害，而烟用添加剂是卷烟配方中重要组成部分，所以建立烟用添加剂中山梨酸的测定方法具有重要意义。现有技术中，山梨酸的测定多采用薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)等，目前尚未见采用选择性离子检测法测定烟用添加剂中山梨酸的报道。

发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种测定烟用添加剂中山梨酸含量的方法。本发明的目的通过以下技术方案予以实现。除非另有说明，本发明所采用的百分数均为重量百分数。一种测定烟用添加剂中山梨酸含量的方法，包括以下步骤
(1)标准工作溶液制备称取IOmg 250mg的山梨酸标准品于IOOmL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容到刻度，得到山梨酸浓度为0. 1 2. 5mg/mL的标准储备液；分别移取20 μ L、 100 μ L ,500 μ L ,2000 μ L ,5000 μ L和10000 μ L的标准储备液于100 mL的容量瓶中，分别用甲醇溶解混勻并定容到刻度，得到6个浓度级别的标准工作溶液；
(2)样品溶液的制备称取0.300 1. OOg待测烟用添加剂样品，用甲醇超声萃取后， 离心，滤膜过滤，滤液即为样品溶液；
(3)气相色谱质谱分析利用气相色谱质谱仪对6种浓度的标准工作溶液和样品溶液进行检测分析；
(4)标准曲线绘制及结果计算。所述的样品溶液制备具体为准确称取0. 300 1. OOg样品于具塞锥形瓶中，加入20mL甲醇，超声萃取20min，转移至离心管中，用8500r/min离心lOmin，取上层清液，经 0. 2 μ m滤膜过滤，滤液即为样品溶液。所述的气相色谱质谱分析，其色谱条件采用HP-VOC熔融石英毛细管色谱柱；进样量为ι μ L，载气为惰性气体氦气，分流比为5:1，恒流流速为1. 5mL/min ；升温程序为初始温度150°C，然后以20°C /min的升温速率升至220°C，保持5min，再以10°C /min升温速率升至250°C，保持IOmin ；其质谱条件为传输线温度为280°C ；电离EI能量为70eV ；离子源温度为230°C ；溶剂延迟时间为3min，选择性离子扫描模式SIM分段扫描，以特性离子进行定量分析，第一特征离子定量，第二特征离子辅助定性分析；其中；所述的色谱柱的规格为60 mXO. 32 mm i. d. XI. 8 Mm d. f.。所述的标准曲线绘制及结果计算为以山梨酸的色谱峰面积对其相应的浓度进行回归分析，得到标准曲线；将相同条件下测得样品溶液的山梨酸的色谱峰面积，代入标准曲线，求得样品中山梨酸的含量。相对于现有技术，本发明具有以下优点
(1)本发明对样品的处理方法和色谱条件进行了改进和优化，采用HP-VOC柱，由于该柱耐水性好，而烟用添加剂中大多含有较高的水，适合于烟用添加剂中山梨酸的批量分析。(2)采用甲醇萃取液，烟用添加剂均在其中有较好的溶解性，山梨酸能获得较好的萃取效率。(3)所采用的色谱条件使目标化合物色谱峰分离度都较好，并均具有较好的线性相关性，检出限在0. 05 μ g/mL之间；
(4)本发明的加标回收率为101. 3%，平均相对标准偏差(RSD)为2. 2%，说明本方法的回
收率高，重复性好。


图1为本发明测定方法的流程图； 图2为标准工作溶液的色谱分析图3为样品溶液的色谱分析图； 图4为山梨酸标准曲线图。
具体实施例方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的详细说明，但附图和实施例并不是对本发明的限定。实施例1
测定烟用添加剂87537中的山梨酸的含量(测定流程如图1所示)
1、标准工作溶液的制备
(1)混合标准储备液称取200.Omg的山梨酸于IOOmL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容到刻度，混合得到混合标准储备液，其中山梨酸的浓度为2. Omg/mL ；混合标准储备液在4°C 冰箱内密封存放，有效期为3个月；
(2)标准工作溶液分别移取20μ L、100y L ,500 μ L ,2000 μ L ,5000 μ L 和 10000 μ L的标准储备液于100 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容到刻度并混勻，得到6个浓度级别的标准工作溶液，标准溶液现配现用；
2、样品溶液及空白溶液的制备
(1)样品溶液制备准确称取0.500样品于具塞锥形瓶中，加入20mL甲醇，超声萃取 20min,转移至离心管中，8500r/min离心lOmin，取上层清液，经0. 2 μ m滤膜过滤，滤液即为样品溶液供气相色谱质谱测定用；
(2)空白溶液制备具塞锥形瓶不加样品，其他处理步骤同样品溶液制备； 3、色谱质谱分析
分别取标准工作溶液和样品溶液进行色谱分析，其色谱条件其色谱条件为采用HP-VOC熔融石英毛细管色谱柱(60 mXO. 32 mm i. d. X 1. 8 Mm d. f.);进样量为1 μ L，载气为惰性气体氦气，分流比为5:1，恒流流速为1. 5m L/min ；升温程序为初始温度150°C，然后以20°C /min的升温速率升至220°C，保持5min，再以10°C /min升温速率升至250°C，保持 IOmin ；
质谱分析条件传输线温度为280°C ；电离(EI)能量为70eV ；离子源温度为230°C ；溶剂延迟时间为3min，选择性离子扫描模式(SIM)分段扫描，以特性离子进行定量分析(第一特征离子定量，第二特征离子辅助定性分析)，标准工作溶液和样品溶液色谱分析结果分别如图2、图3所示。 4、标准曲线绘制及结果计算
首先以目标化合物的色谱峰面积对其浓度进行回归分析，山梨酸的标准工作曲线如图4所示，取最低浓度工作标准溶液，做六次平行试验，计算标准偏差，3倍标准偏差为检出限，10倍标准偏差为定量检测限，结果如表1所示； 表1烟用添加剂山梨酸的标准曲线和检测限
然后将测得3种目标化合物的色谱峰面积，代入所绘制的标准曲线，就得样品中目标化合物的浓度，计算公式如下
X—试样中山梨酸含量，单位为毫克每千克(mg/kg)； C一由标准曲线得出的山梨酸单位为毫克每升(μ g/mL)； v_萃取液体积，单位为毫升(mL). m—试料质量，单位为克(g); 具体检测结果如表2所示。
表2烟用添加剂样品87237中山梨酸含量检测结果
权利要求
1.一种测定烟用添加剂中山梨酸含量的方法，包括以下步骤(1)标准工作溶液制备称取IOmg 250mg的山梨酸标准品于IOOmL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容到刻度，得到山梨酸浓度为0. 1 2. 5mg/mL的标准储备液；分别移取20 μ L、 100 μ L ,500 μ L ,2000 μ L ,5000 μ L和10000 μ L的标准储备液于100 mL的容量瓶中，分别用甲醇溶解混勻并定容到刻度，得到6个浓度级别的标准工作溶液；(2)样品溶液的制备称取0.300 1. OOg待测烟用添加剂样品，用甲醇超声萃取后， 离心，滤膜过滤，滤液即为样品溶液；(3)气相色谱质谱分析利用气相色谱质谱仪对6种浓度的标准工作溶液和样品溶液进行检测分析；(4)标准曲线绘制及结果计算。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述的样品溶液制备具体为准确称取0. 300 1. OOg样品于具塞锥形瓶中，加入20mL甲醇，超声萃取20min，转移至离心管中， 用8500r/min离心lOmin，取上层清液，经0. 2 μ m滤膜过滤，滤液即为样品溶液。
3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述的气相色谱质谱分析，其色谱条件采用HP-VOC熔融石英毛细管色谱柱；进样量为1 μ L，载气为惰性气体氦气，分流比为 5:1，恒流流速为1. 5mL/min ；升温程序为初始温度150°C，然后以20°C /min的升温速率升至220°C，保持5min，再以10°C /min升温速率升至250°C，保持IOmin ；其质谱条件为传输线温度为280°C ；电离EI能量为70eV ；离子源温度为230°C ；溶剂延迟时间为3min，选择性离子扫描模式SIM分段扫描，以特性离子进行定量分析，第一特征离子定量，第二特征离子辅助定性分析；其中；所述的色谱柱的规格为60 mXO. 32 mm i.d. X 1.8 Mm d. f.。
4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述的标准曲线绘制及结果计算为 以山梨酸的色谱峰面积对其相应的浓度进行回归分析，得到标准曲线；将相同条件下测得样品溶液的山梨酸的色谱峰面积，代入标准曲线，求得样品中山梨酸的含量。
全文摘要
本发明公开了一种利用气相色谱/质谱选择离子法测定烟用添加剂中山梨酸含量的方法。包括标准工作溶液、样品溶液及空白溶液制备，经气相色谱/质谱选择离子分析后计算结果。该检测方法具有操作简单准确、灵敏度高、回收率高及重现性好等优点。所采用的色谱条件使目标化合物色谱峰分离度好，检测限可达到0.05μg/mL，回收率为101.3%，平均相对标准标准偏差(n=8)为2.2%。
文档编号G01N30/88GK102230925SQ201110168278
公开日2011年11月2日 申请日期2011年6月22日 优先权日2011年6月22日
发明者张静, 李响丽, 李文英, 潘家明, 王庆华, 胡燕, 范多青 申请人:红云红河烟草(集团)有限责任公司