专利名称：一种凝胶电泳谱带快速染色方法
技术领域：
本发明涉及生物化学实验中蛋白质染色技术，特别是蛋白质凝胶电泳测定过程中的蛋白质谱带快速染色技术。
背景技术：
在生物化学实验中，对蛋白质、核酸、多糖等的分析通常采用凝胶电泳技术手段将分析对象进行分离，电泳分离后得到载有蛋白质谱带的凝胶胶板经染色后方可进行鉴定。蛋白质染色方法有多种，目前通常采用的有考玛斯亮兰染色和银染色等，但无论哪种染色方法，其染色时间都需要数小时，甚至一天，时间较长。尽管采用了加温、震荡等手段，但仍难于达到蛋白质快速染色的目的。
为解决上述传统蛋白质染色过程费时的问题，本发明提出一种快速蛋白质染色方法，即在原有蛋白质染色技术的基础上，用特殊装置按照一定程序对染色样品进行一定剂量的微波辐照，从而使染色速度大大提高，时间缩短至数分钟。

发明内容
本发明提出的快速蛋白质染色方法的基本原理是，电泳后得到的载有蛋白质的凝胶胶片在染色过程中，即在用染料和生物大分子结合形成有色复合物时，对其加以特定的微波辐照，使该染色环境中的极性分子在电磁波的作用下高速振动，并伴随升温。在极性分子振动和适宜温度双重作用下，使染料和凝胶胶片上被分离的微量蛋白质分子(或其残片)相互作用迅速结合形成有色复合物。
本发明提出的快速染色方法过程描述如下1.将分析样品经一系列处理及电泳分离后得到载有蛋白质谱带的凝胶胶片备用。
2.配制考玛斯亮兰染色溶液。
3.将上述胶片放入盛有染色液的非金属器皿中，一并置于微波辐照器中，在一定强度下照射数分钟，温度保持在25℃--60℃。
4.将已染色的凝胶胶片转移至脱色液中，进行背景脱色。
上述染色方法，染色过程仅需2-10分钟，检测灵敏度为0.1μg。


附图为本发明原理示意图，图中1——微波反射腔体2——开孔旋转板3——电机4——微波波导5——磁控管6——非金属染色槽7——染色液8——电泳凝胶板9——托网10——循环泵11——冷却器12——染色液循环管具体实施方案结合

本发明的具体实施实例1.非金属染色槽(6)置于微波处理装置的微波反射腔体中，染色液循环管(12)连接在非金属染色槽(6)的进、出口上。
2.将配制好的蛋白质染色液注入非金属染色槽(6)，液面略高于出口。
3.将电泳完成后载有蛋白质谱带的凝胶胶板(8)水平置于非金属染色槽(6)内的托网(9)上。
4.调节微波染色装置的功率到适当强度，开机幅照2～10分钟，同时染色液循环系统的循环泵(10)和冷却器(11)使非金属染色槽(6)内的染色液(7)循环流动并保持温度在25～60℃之间。
5.将染色后的电泳凝胶板取出，放入清水中进行背景脱色即完成染色。
凝胶电泳过程中，蛋白质谱带染色是实现快速测定的关键环节和瓶颈。本发明提出的快速蛋白质染色方法与传统技术相比，使用特定的微波设备施以辐照，同时起到加速分子振动和升温的作用，染色时间大大缩短，为实现蛋白质快速测定提供强有力的支持。
权利要求
1.一种凝胶电泳谱带快速染色方法，其特征是，将经电泳分离后得到的载有蛋白质谱带的凝胶胶板置于盛有染色液的非金属槽内，施以微波辐照2-10分钟。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，微波辐照的功率在100瓦-1200瓦范围内。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是，非金属槽连接循环冷却系统，以使染色液处于流动状态，并使温度保持在25-60℃之间。
全文摘要
一种凝胶电泳谱带快速染色方法，通过如下步骤实现将电泳后得到的凝胶胶板置于盛有染色液的非金属槽内，施以微波辐照2－10分钟，同时使染色液保持流动，温度控制在25－60℃之间。本发明在染色过程施以微波辐照，同时起到分子振动和升温作用，使染色时间大大缩短。
文档编号G01N33/558GK1609608SQ20031011011
公开日2005年4月27日 申请日期2003年10月20日 优先权日2003年10月20日
发明者崔学晨, 张利群, 徐献军, 孙宪光, 崔实, 魏杰, 崔立晨 申请人:崔学晨, 张利群, 徐献军