专利名称：注射用阿奇霉素中有关物质的检查方法
技术领域：
本发明涉及药物领域，具体而言，涉及注射用阿奇霉素中有关物质的检查方法。
背景技术：
注射用阿奇霉素中有关物质的检查是评价其安全性的一个重要指标。注射用阿奇霉素中有关物质王要指阿奇霉素B、阿奇霉素Gx、红霉素A偕亚胺酿等。相关技术中，注射用阿奇霉素中有关物质的检查是采用薄层色谱法(TLC):将供试品(注射用阿奇霉素)和对照液分别在硅胶G薄层板上点样，通过比较两者的斑点数量和颜色深浅来判断有关物质含量是否达到安全水平。各种检查方法只是将对照液的种类和浓度稍作改变，所用的原理都相同，例如，国家药品标准WS1- (X-296) -2003Z:取供试品(注射用阿奇霉素)，用无水乙醇溶解并稀释制成每Iml含阿奇霉素20mg的溶液，作为供试品溶液；取供试品溶液和红霉素标准品，用无水乙醇溶解并稀释制成每Iml中含阿奇霉素和红霉素各0.4mg的溶液，作为对照溶液(I);另取供试品溶液二份，分别用无水乙醇制成每Iml含阿奇霉素0.6mg和0.2mg的溶液，作为对照溶液(2)和(3)。精密吸取上述四种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-正己烷-二乙胺(10:10:2)为展开剂，展开后晾干，喷以显色剂(取钥酸钠2.5g、硫酸铈lg，加10%硫酸溶液溶解并稀释至100ml)，置105°C加热数分钟。当对照溶液(I)中阿奇霉素与红霉素斑点完全分离，供试品溶液的杂质斑点不超过3个，且各杂质斑点的颜色与对照溶液的主斑点比较，最大的一个杂质斑点不深于对照溶液(2)的主斑点(3% )，其他两个杂质斑点均分别不深于对照溶液(3)的主斑点(I %)时，该供试品有关物质含量达到安全水平，否则达不到安全水平。

由上文可知，相关技术中的检查方法只能实现半定量评价有关物质含量的目的，无法实现定量评价，因而不能进行更科学地研究，例如影响其注射剂安全性的原因分析等。

发明内容
本发明的目的在于提供注射用阿奇霉素中有关物质的检查方法，以解决上述的问题。在本发明的实施例中提供了注射用阿奇霉素中有关物质的检查方法，包括下列步骤:步骤A:取阿奇霉素B对照品，并用氯化钠注射液将其稀释为同一浓度或不同浓度的溶液，再用这些溶液按照阿奇霉素B注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一阿奇霉素B注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用的阿奇霉素B注入量定为阿奇霉素B的注入量限度；步骤B:取阿奇霉素Gx对照品，并用氯化钠注射液将其稀释为同一浓度或不同浓度的溶液，再用这些溶液按照阿奇霉素Gx注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一阿奇霉素Gx注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用的阿奇霉素Gx注入量定为阿奇霉素Gx的注入量限度；步骤C:取红霉素A偕亚胺醚对照品，并用氯化钠注射液将其稀释为同一浓度或不同浓度的溶液，再用这些溶液按照红霉素A偕亚胺醚注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一红霉素A偕亚胺醚注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用的红霉素A偕亚胺醚注入量定为红霉素A偕亚胺醚的注入量限度；步骤D:定量分析待测注射用阿奇霉素中阿奇霉素B的含量C1、阿奇霉素Gx的含量C2、红霉素A偕亚胺醚的含量C3、阿奇霉素的含量C ；步骤E:根据待测注射用阿奇霉素的每次最大用量m，以及下列公式计算，得到阿奇霉素B的杂质限度W1、阿奇霉素Gx的杂质限度W2和红霉素A偕亚胺醚的杂质限度W3:
权利要求
1.注射用阿奇霉素中有关物质的检查方法，其特征在于，包括下列步骤: 步骤A:取阿奇霉素B对照品，并用氯化钠注射液将其稀释为同一浓度或不同浓度的溶液，再用这些溶液按照阿奇霉素B注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一阿奇霉素B注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用的阿奇霉素B注入量定为阿奇霉素B的注入量限度； 步骤B:取阿奇霉素Gx对照品，并用氯化钠注射液将其稀释为同一浓度或不同浓度的溶液，再用这些溶液按照阿奇霉素Gx注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一阿奇霉素Gx注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用的阿奇霉素Gx注入量定为阿奇霉素Gx的注入量限度； 步骤C:取红霉素A偕亚胺醚对照品，并用氯化钠注射液将其稀释为同一浓度或不同浓度的溶液，再用这些溶液按照红霉素A偕亚胺醚注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一红霉素A偕亚胺醚注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用的红霉素A偕亚胺醚注入量定为红霉素A偕亚胺醚的注入量限度； 步骤D:定量分析待测注射用阿奇霉素中阿奇霉素B的含量C1、阿奇霉素Gx的含量C2、红霉素A偕亚胺醚的含量C3、阿奇霉素的含量C ； 步骤E:根据待测注射用阿奇霉素的每次最大用量m，以及下列公式计算，得到阿奇霉素B的杂质限度W1、阿奇霉素Gx的杂质限度W2和红霉素A偕亚胺醚的杂质限度W3: ` 步骤F:将分别——对应地与所述W1, W2，W3进行比较,且 且则所述待测注射用阿奇霉素中有关物质含量达到安全水平，否则达不到安全水平。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤A至C中，用氯化钠注射液将每步对应的对照品稀释为不同浓度的溶液，再取相同剂量的这些溶液按照浓度递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验。
3.根据权利要求1-2任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤D中的定量分析的方法为: 高效液相色谱分析法。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法检测CpC2, C3、C所用的填充剂均为十八烷基硅烷键合硅胶，所用的流动相均为体积比为45:55的磷酸盐缓冲液-乙腈；检测波长为210nm。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的pH值为8.0-8.4。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的pH值为8.2。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的配制方法为:取0.05mol/L磷酸氢二钾溶液，用0.2g/mL的磷酸溶液调节pH值至8.2。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法为:用乙腈将待测注射用阿奇霉素稀释为一定浓度的溶液，作为第一样品；再将第一检测样品稀释η倍作为第二样品；向高效液相色谱仪注入所述第一样品，检测C1, C2, C3 ;向高效液相色谱仪中注入所述第二样品，检测C ； 所述η为50-150。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述第一样品中注射用阿奇霉素的浓度为 8-10mg/mL,且所述 n=100。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述第一样品和第二样品的注入量均为.50 μ L
全文摘要
本发明涉及药物领域，具体涉及注射用阿奇霉素中有关物质的检查方法。其包括取阿奇霉素B对照品，并用氯化钠注射液稀释为溶液，再用这些溶液按照注入量递增的顺序依次进行异常毒性检查法试验，直至某一阿奇霉素B注入量的试验的复试中出现小鼠死亡结果时，将该试验的前一个试验中所用注入量定为阿奇霉素B的注入量限度；按照同样方法，测量阿奇霉素Gx和红霉素A偕亚胺醚的注入量限度；定量分析待测药中上述三种物质和阿奇霉素的含量C；根据每次最大用量以及公式计算，得到三种有关物质的杂质限度W1、W2和W3；若≤W1，且≤W2，且≤W3，则药物的有关物质含量达到安全水平，否则达不到安全水平。本发明实现了定量评价的目的。
文档编号G01N30/02GK103245744SQ201310172819
公开日2013年8月14日 申请日期2013年5月10日 优先权日2013年5月10日
发明者陈果, 梁仁兴, 王晓玲, 鲁成宪, 张寒煦 申请人:峨眉山通惠制药有限公司