专利名称:快速检测c-反应蛋白试剂的制作方法
技术领域:
本发明属于医用检测试剂类。
1030年Tillett等发现了C-反应蛋白(C-ReactiveProtein);1941年Avery等测知为蛋白质,并正式命名,简称CRp,随后Macarty将CRp制成结晶,可用以制作抗血清。近年来,随着检测方法的更新,发现多种疾病的患者,其血液中的CRp均有不同程度的升高。特别是在疾病的急性期,数小时内有显著的上升,随病情转归又迅速下降。CRp在肝中合成,其功能主要是通过常路激活补体,促进白细胞移动,吞噬细菌和毒物。
目前对人体CRp的检测目的是1.确定炎症和组织损伤的非特异性指标;2.鉴别细菌与非细菌感染;3.作手术后继发感浆的诊断;4.用于烧伤病人和移植排异现象的鉴别;5.作为疾病疗效观察的指标。因此,对病人迅速地、准确地进行CRp检测是非常重要的。
目前对病人CRp检测的方法有毛细管沉淀法、乳胶波板凝集法、火箭电泳法、免疫比浊法、ELISA法、放免法等十多种。这些方法不足之处是应急能力差,需病人静脉血,有的方法需要价格昂贵的仪器,操作麻烦,易出差错等,且病人痛苦,医务人员工作量大,比较辛苦,不易推广普及。
本发明的目的是配制出一种操作简单的、省时省力的,病人痛苦小的,迅速准确的检测人体CRp的试剂。该试剂同时也能对血清进行检测。本试剂易于普及推广。
快速检测C-反应蛋白试剂的配制过程及方法1.用pH8.2,浓度为0.1mol/I的甘氨酸缓冲液将直径为0.6μ
,浓度为10og/L的聚苯乙烯乳胶稀释到20g/L。
2.加入上述同体积的、浓度为1g/L的羊抗人CRpZgG,而后于室温常压下搅动2小时,置4℃静止24小时。再10℃6000rpm离心30分钟,去上清,其沉淀部分用上述的甘氨酸缓冲液洗涤一次后,再加入上述的甘氨酸缓冲液使其恢复到原体积。
3.向上述混合液加入同体积的0.1~0.34mol/L,pH8.2的甘氨酸缓冲液。
4.再加入上述混合液 1/8 ~ 1/3 体积的蒸馏水。此液即为快速检测CRp试剂。
快速检测C-反应蛋白试剂各种成分及体积比为1.羊抗人CRpZgG,浓度为1g/L,1体积。
2.聚苯乙烯乳胶,浓度为100g/L, 1/5 体积。
3.甘氨酸缓冲液,浓度为0.1mol/L,pH8.2, 4/5 体积。
4.甘氨酸缓冲液,浓度为0.1~0.34mol/L,pH8.2,2体积。
5.蒸馏水, 1/2 ~ 4/3 体积。
6.每升快速检测CRp试剂加有防腐剂叠氮钠1.5g。
快速检测C-反应蛋白试剂的使用方法为取耳垂血或手指血20μ与本试剂70μl混匀,轻摇5分钟,有清晰白色凝集颗粒为阳性。而CRp含量超过正常值(>10μg/m),颗粒越大,且成片状,表明CRp含量越高。无清晰白色凝集颗粒为阴性,属正常,即CRp含量≤10μg/m。
权利要求
1.一种快速检测C-反应蛋白试剂,该试剂的组成成份及体积比为羊抗人CRP G,浓度为1g/L,1体积。聚苯乙烯乳胶,浓度为100g/L, 1/5 体积。甘氨酸缓冲液,浓度为0.1mol/L,PH8.2, 4/5 体积。甘氨酸缓冲液,浓度为0.1~0.34mol/L,PH8.2,2体积。蒸馏水, 1/2 ~ 4/3 体积。每升快速检测CRP试剂加有防腐剂叠氮钠1.5g。
全文摘要
快速检测C-反应蛋白试剂,是由羊抗人CRpZgCT、聚苯乙烯乳胶、甘氨酸缓冲液、蒸馏水、叠氮钠配制的一种试剂;采用这种试剂,只需取少量的耳垂血或手指血,在5分钟内即可对人体CRp的检测,迅速的确定阴阳性。用这种试剂,操作简单、省事省力,病人痛苦小、并且迅速准确。
文档编号G01N33/50GK1040438SQ89106920
公开日1990年3月14日 申请日期1989年8月30日 优先权日1989年8月30日
发明者杜群军, 王安平, 高敏, 李国栋, 王选臣 申请人:杜群军, 王安平, 高敏, 李国栋, 王选臣