专利名称:一种检测熊果酸抑制AGEs的作用机制的方法
技术领域:
本发明属于病理检测领域,具体的涉及一种检测熊果酸抑制AGEs的作用机制的方法。
背景技术:
人体内持久的高血糖状态,会导致许多结构功能蛋白和核酸蛋白与葡萄糖发生非酶糖化反应,形成晚期糖基化产物(Advance Glycation End Products,AGEs),AGh除可影响这些蛋白正常结构与功能外,它还可通过晚期糖基化受体(RAGE)发挥多种病理作用,业已证明AGEs是糖尿病(Diabetic Mellitus,DM)患者加速发生血管病变的主要原因之一。 因此,抑制AGEs形成,是防治糖尿病血管病变的重要手段。熊果酸(Ursolic Acid, UA)具有抗肿瘤、抗糖尿病、降脂、抗氧化等多种生物学效应,我们前期动物实验已证实UA对DM血管损伤有改善作用,但其作用机制尚不清楚。
发明内容
本发明的目的在于提供一种检测熊果酸抑制AGEs的作用机制的方法,包括以下步骤步骤1 模拟体内蛋白质非酶糖基化反应体系;步骤2 检测熊果酸对果糖胺生成的抑制作用;步骤3 检测熊果酸对AGEs生成的抑制作用;步骤4 数据处理,利用统计学比对熊果酸对果糖胺生成的抑制作用与熊果酸对 AGEs生成的抑制作用,即可知道熊果酸对AGEs的抑制的作用机制。本发明能简单、有效的检测出熊果酸对AGEs的抑制的作用机制。
具体实施例方式一种检测熊果酸抑制AGEs的作用机制的方法,包括以下步骤步骤1 模拟体内蛋白质非酶糖基化反应体系;以牛血清白蛋白(BSA)浓度,葡萄糖浓度和孵育时间这3个因素,每个因素4个水平,用L1605)正交试验反应体系筛选最佳条件。在PBS液中加入BSA,使其质量终浓度为1,2,2. 5,5g/L,d_葡萄糖质量终浓度为 5,10,25,50mM,加入终浓度为IOmM的EDTA防腐,0. ^ii微孔滤膜无菌过滤后,置于37°C培养箱,孵育20,40,60,80d,构成表1正交试验因素水平表。表1正交试验因素水平表
权利要求
1. 一种检测熊果酸抑制AGEs的作用机制的方法,其特征在于,包括以下步骤 步骤1,模拟体内蛋白质非酶糖基化反应体系; 步骤2,检测熊果酸对果糖胺生成的抑制作用; 步骤3,检测熊果酸对AGEs生成的抑制作用;步骤4,数据处理,利用统计学比对熊果酸对果糖胺生成的抑制作用与熊果酸对AGEs 生成的抑制作用,即可知道熊果酸对AGEs的抑制的作用机制。
全文摘要
本发明公开了一种检测熊果酸抑制AGEs的作用机制的方法,包括以下步骤步骤1、模拟体内蛋白质非酶糖基化反应体系;步骤2、检测熊果酸对果糖胺生成的抑制作用;步骤3、检测熊果酸对AGEs生成的抑制作用;步骤4、数据处理,利用统计学比对熊果酸对果糖胺生成的抑制作用与熊果酸对AGEs生成的抑制作用,即可知道熊果酸对AGEs的抑制的作用机制。本发明能简单、有效的检测出熊果酸对AGEs的抑制的作用机制。
文档编号G01N21/31GK102478503SQ20101055817
公开日2012年5月30日 申请日期2010年11月25日 优先权日2010年11月25日
发明者向敏, 吴萍萍, 张雅琴, 王建梅 申请人:苏州卫生职业技术学院