专利名称：适用于直接测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的衍生化试剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及烟草所用的衍生化试剂，特别是一种适用于直接测定烟草及烟 草制品中西柏烷二萜醇和蔗糖酯等表面物质的衍生化试剂，该衍生化试剂可以
质。A , '、 、、 ， 、 背景技术：
烟草中的化学成分是多种多样和十分复杂的，西柏烷二碎醇和蔗糖酯等是 烟草表面一种分布较广泛的重要化学成分，它们被认为是重要的香味物质前体。 但由于对该类物质的提取和分离纯化较为困难，因而它们被公认为是较难准确 测定的烟草化学成分。目前烟草中该类物质的分析方法大致有气相色谱法、气
质联用法、液质联用法，甚至连薄层色i普法都有应用。因为气相和气质联用方 法分析时如果不进行衍生化处理，则不能实现这两种物质的分离，进行衍生化 处理时，对衍生化条件的掌握尺度又会导致精确定量的难以实现。因此，寻找 一种可以直接应用于对该类物质的衍生化测定的试剂至关重要。

发明内容
本发明的目的正是针对现有技术中所存在的问题而提供一种适用于直接测 定烟草及烟草制品中西柏烷二碎醇的衍生化试剂及其应用方法，该试剂能够有 效地将烟草中的西柏烷二碎醇和蔗糖酯等表面物质实现行之有效的衍生化，从 而实现烟草中的该类物质的精确定量分析。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的本发明的适用于直接测定烟 草及烟草制品中西柏烷二辟醇的衍生化试剂包括一种难挥发溶剂和另 一种硅烷 化试剂共同构成，其中难挥发溶剂和硅烷化试剂以2: 1-1: 2的体积比先后加入
到待测烟草样品中，所述难挥发溶剂为二曱基曱酰胺DMF或二曱基曱砜DMS0， 所述硅烷化试剂为N，0-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)或三曱基氯硅 烷(TMCS )。
上述的西柏烷二辟醇包括a及p两种构型的二碎醇。
a. 先将难挥发溶剂二曱基曱酰胺DMF或二曱基曱石风DMSO加入经溶剂萃取
得来的待测烟草样品中，充分混合均匀；
b. 再将BSTFA或三甲基氯硅烷TMCS加入到混有难挥发溶剂的待测样品中；
c. 将上述混合物在60-80。C下反应0. 5-1. 5小时，即可利用化学分析方法 进行待测烟草样品中的表面物质测量。
在本发明中，难挥发溶剂相对待测烟草样品的加入量为20%-80%。 本发明所述化学分析方法为气相色谱-质谱联用分析测定方法。 本发明的试剂具有可以对诸如烟草这样复杂体系的西柏烷二萜醇和蔗糖酯 等进行有效衍生化并准确测定其含量的优点。
具体实施例方式
本发明以下将结合实施例作进一步描述，但并不限制本发明 实施例1
a、 称取过40目筛的烟草样品0. 4 g于玻璃烧瓶中，加入20ml萃取溶剂二 氯甲烷，在常温下、超声波萃取频率为50KHz和超声功率350w下超声10min， 冷却至室温后，用装有5g无水好u酸钠的滤纸滤去烟末。
b、 将所得滤液在10- 13kpa下浓缩至干。残渣用三氯曱烷洗涤定容至10ml。 取出1毫升，在惰性气体保护下浓缩至干后。先加入难挥发溶剂(如DMFO. 25 ml), 然后按比例加入硅烷化试剂(如BSTFAO. 25 ml)使总体积为0. 5ml，在7(TC下 反应1小时。
c、 对所得样品进行GC-MS分析。
实施例2
a、 取两片烤烟青烟叶，在5000ml的玻璃烧杯中加入2000ml萃取溶剂二氯 曱烷，将烟叶在烧杯中浸蘸三次，每次六秒种。蘸后溶液用装有50克无水硫酸 钠的滤纸过滤。
b、 将所得滤液在10-13kpa下浓缩至干。残渣用三氯曱烷定容至50ml。 取出1毫升，在惰性气体保护下浓缩至干。先加入难挥发溶剂(如DMSO 0. 5 ml ), 然后按比例加入硅烷化试剂(如BSTFAO. 25 m10)使总体积为0. 75ml，在70。C 下反应1小时。
c、 对所得样品进行GC-MS分析。 实施例3
a、 取五片香料烟青烟叶，在2000ml的玻璃烧杯中加入500ml萃取溶剂二 氯曱烷，将烟叶在烧杯中浸蘸五次，每次六三秒种。蘸后溶液用装有15克无水 石克酸钠的滤纸过滤。
b、 将所得滤液在10- 13kpa下浓缩至干。残渣用三氯曱烷洗涤定容至10ml。 取出1毫升，在惰性气体保护下浓缩至干。先加入难挥发溶剂(如DMFO. " ml ), 然后按比例加入硅烷化试剂(如TMCS 0. 25 ml )使总体积为0. 5ml，在7(TC下 反应1小时。
c、 对所得样品进行GC-MS分析。
权利要求
1、一种适用于直接测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的衍生化试剂，其特征在于它包括一种难挥发溶剂和另一种硅烷化试剂共同构成，其中难挥发溶剂和硅烷化试剂以2∶1-1∶2的体积比相继加入到待测烟草样品中，所述难挥发溶剂为二甲基甲酰胺DMF或二甲基甲砜DMSO，所述硅烷化试剂为N，O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺BSTFA或三甲基氯硅烷TMCS。
2、 根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品中西柏烷二碎醇的衍生化试 剂，其特征在于所述的西柏烷二萜醇包括oc及P两种构型的二萜醇。
3、 一种权利要求1所述的衍生化试剂的衍生化应用方法，其特征在于它 包括以下工艺步骤a. 先将难挥发溶剂二曱基曱酰胺DMF或二甲基曱砜DMS0加入经溶剂萃取得来的待测烟草样品中，充分混合均匀；b. 再将BSTFA或三甲基氯硅烷TMCS加入到混有难挥发溶剂的待测样品中；c. 将上述混合物在60-8(TC下反应0. 5-1. 5小时，即可利用化学分析方法 进行待测烟草样品中的表面物质测量。
4、 根据权利要求3所述的衍生化试剂的衍生化应用方法，其特征在于 难挥发溶剂相对待测烟草样品的加入量为20°/。-80°/ 。
5、 根据权利要求3所述的衍生化试剂的衍生化应用方法，其特征在于 所述化学分析方法为气相色谱-质谱联用分析测定方法。
全文摘要
一种适用于直接测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的衍生化试剂，其特征在于它将一种难挥发溶剂(DMF或DMSO)和另一种硅烷化试剂(BSTFA或TMCS)按一定比例混合后在一定温度下反应特定时间而完成对烟草表面成分的衍生化，从而制得可以直接应用于气相色谱-质谱联用分析表面物质的样品。该衍生化试剂可以和气质联用分析方法结合从而实现快速准确测定烟草及烟草制品中的表面物质。本发明具有可以对诸如烟草这样复杂体系的西柏烷二萜醇和蔗糖酯等进行有效衍生化并准确测定其含量的优点。
文档编号G01N30/00GK101178391SQ20071019309
公开日2008年5月14日 申请日期2007年12月12日 优先权日2007年12月12日
发明者丽 丁, 刘克建, 谢复炜, 乐 赵 申请人:中国烟草总公司郑州烟草研究院