专利名称：农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法
技术领域：
本发明涉及农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其技术领域属于农药分析方法。
背景技术：
印楝素是从印楝种仁中提取的一种植物源杀虫活性成分，对多种昆虫具有良好的杀虫活性。印楝素的作用机制是使昆虫拒食、忌避及抑制昆虫的生长发育，对大多数害虫具有驱杀效果，而对温血动物无毒无害，不会使害虫产生抗药性，并具持效时间长的特点。可用于防治200多种农、林、仓储和卫生害虫，尤其对鳞翅目、鞘翅目和双翅目等害虫有特效，是世界上公认的广谱、高效、低毒、易降解、无残留的环境友好新型杀虫剂。目前含印楝素的农药制剂以乳油为主。印楝素的水基型制剂与乳油相比，具有生产成本低、环境相容性好、符合无公害农产品生产农药使用规范等优点，是印楝素农药制剂的未来发展方向。关于印楝素水基型制剂的制备和应用，相关科技文献已有报道。由于水基型制剂中的助剂较多，整个体系的成分比较复杂，如果采用通常的直接取样进行分析，杂质对有效成分的测定会产生严重的干扰。有关能有效将水基型制剂中的杂质除去，进行水基型制剂中印楝素的分析方法，到目前为止尚无报道。

发明内容
本发明提供了一种农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，具有简便、准确、快速、可靠的特点，对农药水基型制剂中有效成分印楝素的定量分析，有重要的实用价值。
本发明是这样实现的1.标准溶液的配制称取50～2000mg印楝素标样于容量瓶中，用有机溶剂溶解后定容；2.试样预处理及试样溶液的配制称取含有相当于标准溶液中印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于容量瓶中，加入与标准溶液配制容量瓶体积相同的有机溶剂和水，有机溶剂与水的比例为1∶1～10，超声波振荡萃取1～10min，静置或离心分层后取出有机相过滤。移取5～50mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂5～50mL在超声波振荡器上反萃取1～10min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，过滤后待测。
3.测定将步骤(2)的待测样品使用不同极性的高效液相色谱柱，用有机溶剂或水或有机溶剂与水的混合液体作流动相，在柱箱温度为10～50℃；流动相流速为0.1～10mL/min；检测波长为190～900nm的色谱条件下，采用紫外检测器或二极管阵列检测器，对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
本发明中所述的水基型制剂是水剂、水乳剂、微乳剂、浓乳剂、水悬浮剂、胶悬剂、浓悬浮剂和可溶性液剂中的一种。
本发明中所述的有机溶剂是二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯、甲醇、乙腈、乙醚、己烷、正己烷、环己烷中的一种或几种混合。
本发明中所述的不同极性的高效液相色谱柱是硅胶柱、C8柱或C18柱。
所述的检测波长是190～210nm或220～900nm。
本发明中所述的紫外检测器是固定波长为254nm的紫外检测器或可变波长范围为190～900nm的紫外检测器。
目前含印楝素的农药制剂以乳油为主，水基型制剂与乳油相比，具有生产成本低、环境相容性好、符合无公害农产品生产农药使用规范等优点，是印楝素农药制剂的未来发展方向。关于印楝素水基型制剂的制备和应用，相关科技文献已有报道。由于水基型制剂中的助剂较多，整个体系的成分比较复杂，如果采用通常的直接取样进行分析，杂质对有效成分的测定会产生严重的干扰。本发明采用的方法是将干扰杂质除去后，再对有效成分进行测定，能准确、快速、可靠地对水基型制剂中印楝素的定量分析。这种水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，到目前为止尚无报道。有效的水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法的建立，对准确、快速、可靠地对水基型制剂中印楝素的定量分析和拓展印楝素水基型制剂在农业生产实践中的应用，具有重要意义。
具体实施例方式
实施例一1.标准溶液的配制称取50mg印楝素标样于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，0.45um有机滤膜过滤。
2.试样预处理及试样溶液的配制称取含有50mg印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于25mL容量瓶中，加入25mL有机溶剂和水的混合液体，有机溶剂与水的比例为1∶1，超声波振荡萃取1min，静置或离心分层后取出有机相过滤。移取5mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂5mL在超声波振荡器上反萃取1min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，0.45um有机滤膜过滤后待测。
3.测定将步骤2的待测样品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色谱柱，用体积比为水+乙腈＝56+44的混合液体作流动相，在柱箱温度为10℃；流动相流速为0.1mL/min；检测波长为190nm的色谱条件下，采用紫外检测器对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
实施例二1.标准溶液的配制称取100mg印楝素标样于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，0.45um有机滤膜过滤。
2.试样预处理及试样溶液的配制称取含有100mg印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于25mL容量瓶中，加入25mL有机溶剂和水的混合液体，有机溶剂与水的比例为1∶5，超声波振荡萃取5min，静置或离心分层后取出有机相过滤。移取10mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂10mL在超声波振荡器上反萃取5min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，0.45um有机滤膜过滤后待测。
3.测定将步骤2的待测样品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色谱柱，用体积比为水+乙腈＝56+44的混合液体作流动相，在柱箱温度为10℃；流动相流速为1.0mL/min；检测波长为218nm的色谱条件下，采用紫外检测器对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
实施例三1.标准溶液的配制称取2000mg印楝素标样于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，0.45um有机滤膜过滤。
2.试样预处理及试样溶液的配制称取含有2000mg印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于50mL容量瓶中，加入50mL有机溶剂和水的混合液体，有机溶剂与水的比例为1∶10，超声波振荡萃取10min，静置或离心分层后取出有机相过滤。移取50mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂50mL在超声波振荡器上反萃取10min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，0.45um有机滤膜过滤后待测。
3.测定将步骤2的待测样品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色谱柱，用体积比为水+乙腈＝56+44的混合液体作流动相，在柱箱温度为50℃；流动相流速为10mL/min；检测波长为900nm的色谱条件下，采用紫外检测器对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
实施例四1.标准溶液的配制称取50mg印楝素标样于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，0.45um有机滤膜过滤。
2.试样预处理及试样溶液的配制称取含有50mg印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于25mL容量瓶中，加入25mL有机溶剂和水的混合液体，有机溶剂与水的比例为1∶1，超声波振荡萃取1min，静置或离心分层后取出有机相过滤。移取5mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂5mL在超声波振荡器上反萃取1min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，0.45um有机滤膜过滤后待测。
3.测定将步骤2的待测样品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色谱柱，用体积比为水+乙腈＝56+44的混合液体作流动相，在柱箱温度为10℃；流动相流速为0.1mL/min 检测波长为190nm的色谱条件下，采用二极管阵列检测器对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
实施例五1.标准溶液的配制称取100mg印楝素标样于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，0.45um有机滤膜过滤。
2.试样预处理及试样溶液的配制称取含有100mg印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于25mL容量瓶中，加入25mL有机溶剂和水的混合液体，有机溶剂与水的比例为1∶5，超声波振荡萃取5min，静置或离心分层后取出有机相过滤。移取10mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂10mL在超声波振荡器上反萃取5min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，0.45um有机滤膜过滤后待测。
3.测定将步骤2的待测样品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色谱柱，用体积比为水+乙腈＝56+44的混合液体作流动相，在柱箱温度为10℃；流动相流速为1.0mL/min；检测波长为218nm的色谱条件下，采用二极管阵列检测器对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
实施例六1.标准溶液的配制称取2000mg印楝素标样于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，0.45um有机滤膜过滤。
2.试样预处理及试样溶液的配制称取含有2000mg印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于50mL容量瓶中，加入50mL有机溶剂和水的混合液体，有机溶剂与水的比例为1∶10，超声波振荡萃取10min，静置或离心分层后取出有机相过滤。移取50mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂50mL在超声波振荡器上反萃取10min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，0.45um有机滤膜过滤后待测。
3.测定将步骤2的待测样品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色谱柱，用体积比为水+乙腈＝56+44的混合液体作流动相，在柱箱温度为50℃；流动相流速为10mL/min；检测波长为900nm的色谱条件下，采用二极管阵列检测器对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
权利要求
1.农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其步骤是(1)标准溶液的配制称取50～2000mg印楝素标样于容量瓶中，用有机溶剂溶解后定容；(2)试样预处理及试样溶液的配制称取含有相当于标准溶液中印楝素有效成分的印楝素水基型制剂于容量瓶中，加入与标准溶液配制容量瓶体积相同的有机溶剂和水，有机溶剂与水的比例为1∶1～10，超声波振荡萃取1～10min，静置或离心分层后取出有机相过滤，移取5～50mL过滤后的有机相于容器中蒸干，加入有机溶剂5～50mL在超声波振荡器上反萃取1～10min，转至体积与移取液体积相同的容量瓶中用有机溶剂定容，过滤后待测；(3)测定将步骤(2)的待测样品使用不同极性的高效液相色谱柱，用有机溶剂或水或有机溶剂与水的混合液体作流动相，在柱箱温度为10～50℃；流动相流速为0.1～10mL/min；检测波长为190～900nm的色谱条件下，采用紫外检测器或二极管阵列检测器，对印楝素进行高效液相色谱定量分析。
2.根据权利要求1所述的农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的水基型制剂是水剂、水乳剂、微乳剂、浓乳剂、水悬浮剂、胶悬剂、浓悬浮剂和可溶性液剂中的一种。
3.根据权利要求1所述的农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的有机溶剂是二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯、甲醇、乙腈、乙醚、己烷、正己烷、环己烷中的一种或几种混合。
4.根据权利要求1所述的农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的不同极性的高效液相色谱柱是硅胶柱或C8柱或C18柱。
5.根据权利要求1所述的农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的检测波长是190～210nm。
6.根据权利要求1所述的农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的检测波长是220～900nm。
7.根据权利要求1所述的农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法，其特征在于所述的紫外检测器是固定波长为254nm的紫外检测器或可变波长范围为190～900nm的紫外检测器。
全文摘要
本发明涉及一类制剂中农药有效成分的分析，具体是农药水基型制剂中印楝素的高效液相色谱分析方法。采用液—液分配的方法对水基型制剂样品净化除杂，用有机溶剂或水作流动相，使用不同极性的高效液相色谱柱，采用紫外检测器或二极管阵列检测器，对农药水基型制剂中的印楝素进行高效液相色谱定量分析。
文档编号G01N30/74GK1790010SQ200510048760
公开日2006年6月21日 申请日期2005年12月27日 优先权日2005年12月27日
发明者叶敏, 朱有勇, 李成云, 李正跃, 肖春 申请人:云南农业大学