专利名称：一种快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种诊断消化性溃疡的反应盒及应用，尤其涉及一种定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒以及在诊断消化性溃疡中幽门螺杆菌感染的应用。
背景技术：
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，HP)感染是慢性B型胃炎的主要病因，与非溃疡型消化不良、胃和十二指肠溃疡及胃癌关系密切。流行病学研究表明，国人无症状或健康人群中HP感染率为39.9～49.6％。
传统的幽门螺杆菌检测方法主要包括一是直接从胃粘膜中检测HP，包括细菌培养、组织涂片和切片染色，二是尿素酶试验或14C呼气实验诊断HP感染，三是免疫学方法如ELISA等，近年来又有血清学检测及PCR等方法。目前诊断HP感染的金标准是胃粘膜病理组织检查和细菌培养，但是耗时耗力，花费较高，不利于临床应用。不适用于大批量检测，给HP的检测带来不便。快速尿素酶诊断有很高的敏感性和特异性，分别为85％和90％，阳性预测率和阴性预测率分别为94％和76％(Mumtaz，Khalid；Abid，Shahab；Yakoob，Javed；Abbas，Zaigham；Hamid，Saeed；Islam，M.；Shah，Hasnain A.；Jafri，Wasim。An office-based serological test for detection of current Helicobacter pyloriinfectionis it useful？European Journal of Gastroenterology & Hepatology.18(1)85-88，January 2006.)，已广泛应用于临床。
最新型的Pronto dry干试纸法是目前最敏感最快速的干纸检测法，但是花费较高。因此如何快速、准确、经济地测定HP感染是临床面临的课题之一。

发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒。该反应盒不仅取材制作方便，更重要的是能快速地对幽门螺杆菌感染进行定性检测，且准确、经济。
本发明的另一个目的是提供该定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒在进行定性检测幽门螺杆菌感染中的应用。
在实现上述发明目的中，本发明所述的快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒，包括盒体，设在盒体内的应用试剂，表面有浅凹的塑料反应板，华特门试纸；其特征是所述华特门试纸是经1％的尿素溶液和酚红指示剂完全浸透，再晾干的试纸，所述应用试剂是蒸馏水和1％尿素酶溶液，所述塑料反应板是表面有圆形浅凹的塑料反应板。
其中上述华特门试纸由下述方法制得A)将尿素加入无离子水中，混匀，配成浓度为1％的尿素溶液，再加入酚红指示剂至溶液呈黄色；B)放入华特门试纸使之完全浸泡；C)待试纸完全浸透后，取出晾干并裁成实验需要的形状和大小。
本发明所述的快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒的应用，其应用方法是1)使用前1-5分钟，在放有华特门干试纸的反应板浅凹内加入1-2滴蒸馏水，使试纸上的尿素及酚红溶于水中；2)取1％尿素酶溶液1-2滴加入设定的浅凹中，颜色变成粉红色，作为阳性对照孔；3)将胃镜检测时取出的胃粘膜标本放入检测浅凹中；4)溶液变成粉红色，示为阳性；5)若胃粘膜标本显示为阳性，即可定性为幽门螺杆菌感染。
在上述的快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒的应用中，本发明的华特门试纸中含有尿素，遇到能产生尿素酶的幽门螺杆菌，即生成氨和二氧化碳，从而改变试剂的pH值，同时华特门试纸中含有能随pH值改变而变色的酚红指示剂，因此，利用本发明的快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒根据溶液的颜色变化，可以很轻松的实现对HP感染的定性检测。
本发明的快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒与现有技术相比具有以下优点和效果1、原料来源丰富，价格低廉；2、反应盒稳定，反应盒所用试纸可以长时间室温保存，保质期长；3、制作及检测步骤简单，只需1人即可完成整个操作过程；4、定性准确，实验证明，准确率为98.4％；5、检测速度快，一次检测时间仅为1-10分钟，减少了人力资源的浪费。
具体实施例方式
下面通过实施例，进一步阐明本发明的突出特点和显著进步，但仅在于说明本发明而决不限制本发明。
实施例1取尿素(hydrogen eroxide urea)50g，加入无离子水5000ml混匀配成浓度为1％的尿素溶液，加入适量酚红指示剂至溶液呈黄色。放入华特门试纸待之完全浸透，待试纸完全浸透后，取出晾干，将试纸裁成圆片备用。
使用前1-5分钟，在放有华特门干试纸的反应板浅凹内加入1-2滴蒸馏水，使试纸上的尿素及酚红溶于水中；取1％尿素酶溶液1-2滴加入设定的浅凹中，作阳性对照孔；取胃镜检测时取出的胃粘膜标本放入检测浅凹中；溶液变成粉红色，示为阳性；若胃粘膜标本显示为阳性，即可定性为幽门螺杆菌感染。
阳性对照孔可见溶液变成粉红色，显示为阳性。
检测孔放入已证实的HP感染阳性病人的胃粘膜标本，也呈阳性的粉红色。
重复实验结果表明准确率为98.4％。
上述实验中，华特门试纸(Whatman paper)和尿素(Urea)由Crown Scientific公司提供，酚红PH指示剂、尿素酶购自SIGMA公司。
权利要求
1.一种快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒，包括盒体，设在盒体内的应用试剂，表面有浅凹的塑料反应板，华特门试纸；其特征是所述华特门试纸是经1％的尿素溶液和酚红指示剂完全浸透，再晾干的试纸，所述应用试剂是蒸馏水和1％尿素酶溶液，所述塑料反应板是表面有圆形浅凹的塑料反应板。
2.根据权利要求1所述的快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒，其特征是所述华特门试纸由下述方法制得A)将尿素加入无离子水，混匀，配成浓度为1％的尿素溶液，再加入酚红指示剂至溶液呈黄色；B)放入华特门试纸使之完全浸泡；C)待试纸完全浸透后，取出晾干并裁成实验需要的形状和大小。
3.权利要求1或2所述的快速定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒的应用，其应用方法是1)使用前1-5分钟，在放有华特门干试纸的反应板浅凹内加入1-2滴蒸馏水，使试纸上的尿素及酚红溶于水中；2)取1％尿素酶溶液1-2滴加入设定的浅凹中，作阳性对照孔；3)取胃镜检测时取出的胃粘膜标本放入检测浅凹中；4)溶液变成粉红色，示为阳性；5)若胃粘膜标本显示为阳性，即可定性为幽门螺杆菌感染。
全文摘要
本发明公开了一种定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒，包括盒体，设在盒体内的应用试剂，表面有浅凹的塑料反应板，华特门试纸；其中所述华特门试纸是经1％的尿素溶液和酚红指示剂完全浸透，再晾干的试纸，所述应用试剂是蒸馏水和1％尿素酶溶液，所述塑料反应板是表面有圆形浅凹的塑料反应板。同时还公开了该反应盒在快速定性检测幽门螺杆菌感染诊断中的应用。本发明的反应盒及应用方法有效地克服了现有技术中存在的不足，可以很轻松的实现对幽门螺杆菌感染的定性检测。
文档编号G01N33/52GK1916608SQ20061006876
公开日2007年2月21日 申请日期2006年9月5日 优先权日2006年9月5日
发明者郭拥军, 刘同宝, 孙英, 陈良华 申请人:山东大学