专利名称：一种乳核内消制剂的质量检测控制方法
技术领域：
制药技术背景技术 乳核内消制剂为妇科临床常用中成药，但原质量标准中无含量测定，仅进行了生物碱理化鉴别，大部分的天然植物均含生物碱，该鉴别方法专属性差。现代中药制剂没有含量测定几乎无法保证药品的质量，本发明用可靠性、精密度、稳定性等方面均较先进的高效液相法对主要药效成分芍药苷进行含量测定，应用高效液相法可以更好地进行制剂的质量控制。

发明内容
乳核内消制剂常用的有口服液、胶囊、颗粒等，处方中赤芍为主要药物，所含主要成分为芍药苷，因此对制剂(乳核内消颗粒)中芍药苷的进行含量测定。
1.实验仪器及试药高效液相色谱仪日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪；手动进样器，Hpchemstation；forLC(Rev.A.06.01)数据处理器。色谱柱Diamonsil C18(250×4.6mm)超声波清洗机波达1004型电子分析天平梅特勒T24型(1/10000AB-104-N(上海，1/10000)离心机台式高速离心机TGL-16G型微量进样器20ul，美国HAMILTON实验试药流动相用水超纯水；甲醇色谱纯；冰醋酸、异丙醇分析纯。
芍药苷对照品(供含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供，批号0736-200118，0736-200219。
①色谱条件与系统适用性试验参照《中国药典》2000年版一部“白芍”项下芍药苷“含量测定”方法进行。日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，Diamonsil C18(250×4.6mm)，甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇(67∶173∶4∶4)为流动相，流速1ml/min，柱温30℃，检测波长为230nm。在以上条件下，取对照品溶液、供试品溶液、甲醇溶剂、阴性样品溶液和辅料(空白)溶液进样，记录色谱图，从色谱图可得芍药苷和样品中的其它组分可以完全分离，且甲醇溶剂、阴性样品溶液和辅料(空白)溶液无干扰。
②供试品溶液制备a.提取溶剂选择供试品溶液取的制备样品(031001)称取约0.5g，于具塞三角瓶中，精密称定，分别精密加入50％乙醇、无水乙醇、50％甲醇、甲醇各25ml，密塞，超声提取20分钟，放冷，滤过，取续滤液过微孔滤膜(0.45um)，滤液作为供试品溶液。
对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，摇匀，即得。
在选定的色谱条件下，分别取对照品溶液和供试品溶液各10μl进样，记录色谱图，计算含量，结果见表1。
表1 提取溶剂选择

由表1可得，甲醇提取芍药苷含量最高，因此选择甲醇为提取溶剂。
b.提取时间考察供试品溶液取的制备取样品(031001)约0.5g，于具塞三角瓶中，精密称定，精确加入甲醇25ml，分别超声提取10分钟、15分钟、20分钟、30分钟后，放冷，滤过，精取续滤液过微孔滤膜(0.45um)，滤液作为供试品溶液。
在选定的色谱条件下，取供试品溶液各10μl进样，记录色谱图，计算含量，结果见表2。
表2 提取时间考察

提取20分钟后，芍药苷含量不再变化，故超声提取时间定为20分钟。
③检测波长根据文献选230nm作为检测波长。
④精密度
对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，摇匀，既得。
供试品溶液取的制备取样品(031001)称取约0.5g，于具塞三角瓶中，精密称定，精密加入甲醇25ml，密塞，超声提取20分钟，放冷，滤过，取续滤液过微孔滤膜(0.45um)，滤液作为供试品溶液。
分别取对照品溶液和供试品溶液各10μl，连续进样5次，记录色谱图，测定峰面积，计算平均峰面积值和RSD，结果表明精密度良好。见表3。
表3 精密度考察

⑤稳定性日内稳定性对照品溶液、供试品溶液制备同精密度项下在选定色谱条件下，分别于0小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时、8小时取对照品溶液和供试品溶液各10μl进样，记录色谱图，测定峰面积值，计算平均峰面积和RSD，结果见表4。
表4 日内稳定性考察

日间稳定性
在选定色谱条件下，分别于0天、1天、3天、5天、15天，取对照品溶液和供试品溶液各10μl进样，记录色谱图，测定峰面积值，计算平均峰面积和RSD，结果见表5。
表5 日间稳定性考察

结果表明对照品溶液和供试品溶液15天内稳定。
⑥重复性对照品溶液制备同精密度项下。
供试品溶液制备同精密度项下，共5份。
取对照品溶液和供试品溶液(031001)各10μl进样，测定峰面积值，用外标法计算含量，结果表明重复性良好。见表6。
表6 重复性测定结果

重复性良好。
⑦线性和范围对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解，分别制成每1ml含0.07mg和每1ml含0.7mg的溶液。
取对照品溶液(0.07mg/ml)2μl、5μl、8μl、10μl、20μl；对照品溶液(0.7mg/ml)3μl进样，记录色谱图，测定峰面积，以峰面积(Y)对进样量(X，μg)回归，结果见表7。
表7 线性和范围测定结果

以上结果表明，进样量在0.14～2.1μg范围内，峰面积与进样量呈良好线性关系。
⑧加样回收试验对照品溶液制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.7mg的溶液。
供试品溶液取的制备精称取己知含量样品(031001)，于具塞三角瓶中，分别准确加入对照品(1号、2号、3号样品加芍药苷对照品0.7mg/ml×1.8ml，4号、5号、6号样品加芍药苷对照品0.7mg/ml×2.4ml，7号、8号、9号样品加芍药苷对照品0.7mg/ml×3.0ml)，1号、2号、3号样品精密加入甲醇23.2ml，4号、5号、6号样品精密加入甲醇22.6ml，7号、8号、9号样品精密加入甲醇22ml，密塞，超声提取20分钟，放冷，滤过，取续滤液过微孔滤膜(0.45um)，滤液作为供试品溶液。
在选定色谱条件下，分别取对照品溶液和供试品溶液各10μl进样，测定峰面积值，按外标法计算含量，并计算加样回收率，测定结果见表8。
表8 回收率测定结果

⑨样品测定仪器日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪色谱条件与系统适用性试验甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇(67∶173∶4∶4)为流动相，检测波长230nm，柱温30℃。理论板数按芍药苷峰计算，应不低于1500。
对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，摇匀，既得。
供试品溶液的制备取样品，精密称取0.5g，于具塞三角瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，超声提取20分钟，放冷，滤过，取续滤液过微孔滤膜(0.45um)，滤液作为供试品溶液。
测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，计算，即得。
具体实施例方式
乳核内消颗粒质量标准中芍药苷含量测定照高效液相色谱(中国药典2000年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇(67∶173∶4∶4)为流动相，流速1ml/min，柱温30℃，检测波长230nm。理论板数按芍药苷峰计算，应不低于1500。
对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下样品，精密称取0.5g，于具塞三角瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，超声提取20min，放冷，取续滤液过微孔滤膜(0.45um)，滤液作为供试品溶液。
测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，用峰面积按外标法计算，即得。
本品每克含赤芍以芍药苷(C23H28O11)计不得少于5.0mg。
权利要求
1.在乳核内消颗粒、胶囊、口服液、片剂等乳核内消制剂的生产和销售中，用高效液相色谱法测定芍药苷含量，以控制乳核内消制剂的质量，使生产出的药物安全有效。
2.根据权利要求1，在乳核内消颗粒的生产和销售中，用高效液相色谱法测定芍药苷含量，以控制乳核内消制剂的质量，使生产出的药物安全有效。
全文摘要
用高效液相色谱法测定乳核内消颗粒等乳核内消制剂中芍药苷含量，以控制乳核内消制剂的质量。使生产出的药物安全有效。乳核内消颗粒质量标准中芍药苷含量测定照高效液相色谱(中国药典2000年版一部附录Ⅵ D)测定。测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，用峰面积按外标法计算，即得。
文档编号G01N30/00GK1841061SQ200510020608
公开日2006年10月4日 申请日期2005年3月29日 优先权日2005年3月29日
发明者刘传捷 申请人:刘传捷